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北冬虫夏草菌株鉴定与遗传多样性的分子标记研究

摘要第1-6页
Abstract第6-15页
第一章 前言第15-27页
 1. 北冬虫夏草的研究进展第15-19页
   ·北冬虫夏草的栽培技术研究第15-17页
     ·将北冬虫夏草菌接种于固体培养基上第15-16页
     ·液体培养北冬虫夏草菌丝第16-17页
     ·将北冬虫夏草菌接种于蛹体第17页
   ·北冬虫夏草的药效成分研究第17-18页
   ·北冬虫夏草的药理作用研究第18-19页
     ·调节免疫系统第18-19页
     ·抗肿瘤作用第19页
     ·降血脂及降血压作用第19页
     ·镇静及激素样作用第19页
   ·开发与应用第19页
 2. 食用菌中的拮抗反应第19-20页
 3. 分子标记及其在食用菌中的应用第20-26页
   ·随机扩增多态DNA(RAPD)第20-21页
   ·相关序列扩增多态性(SRAP)第21-22页
   ·靶位区域扩增多态性(TRAP)第22-23页
   ·简单重复序列间扩增(ISSR)第23页
   ·目标起始密码子多态性(SCOT)第23页
   ·特征性片段扩增区域(SCAR)第23-24页
   ·内转录间隔区(ITS)第24-25页
   ·分子标记在冬虫夏草菌研究中的应用第25-26页
 4. 研究目的与意义第26-27页
第二章 北冬虫夏草菌株的拮抗试验第27-32页
 1. 材料与方法第27页
   ·供试菌株第27页
   ·平板培养基第27页
   ·试验方法第27页
 2. 结果与分析第27-28页
 3. 小结与讨论第28-32页
第三章 北冬虫夏草基因组DNA的提取第32-40页
 1. 材料与方法第32-36页
   ·供试菌株第32页
   ·培养基第32页
     ·试管斜面培养基第32页
     ·液体PDA培养基第32页
   ·主要试剂与仪器、设备第32-33页
   ·方法第33-36页
     ·菌丝培养第33页
     ·DNA提取方法第33-35页
     ·DNA质量检测第35-36页
 2. 结果与分析第36-38页
   ·样品DNA的紫外吸收值比较第36页
   ·电泳检测结果第36-37页
   ·PCR扩增检测第37页
   ·酶切效果分析第37-38页
 3. 小结与讨论第38-40页
第四章 北冬虫夏草SRAP分析第40-48页
 1. 材料与方法第40-42页
   ·供试菌株第40页
   ·培养基第40页
     ·试管斜面培养基第40页
     ·液体PDA培养基第40页
   ·主要仪器与试剂第40页
   ·试验方法第40-42页
     ·菌丝培养第40页
     ·DNA的提取与检测第40页
     ·SRAP反应体系优化第40-41页
     ·SRAP引物的筛选第41页
     ·PCR产物的电泳检测第41-42页
     ·数据统计与分析第42页
 2. 结果与分析第42-45页
   ·DNA质量检测结果第42页
   ·SRAP反应体系的优化第42-44页
     ·Mg~(2+)浓度对SRAP扩增的影响第42-43页
     ·Taq DNA聚合酶的用量对SRAP扩增的影响第43页
     ·dNTPs浓度对SRAP扩增的影响第43页
     ·引物浓度对SRAP扩增的影响第43-44页
     ·模板DNA用量对SRAP扩增的影响第44页
   ·SRAP引物的筛选第44页
   ·SRAP扩增第44页
   ·样品的相似系数及UPGMA聚类分析第44-45页
 3. 小结与讨论第45-48页
第五章 北冬虫夏草ISSR分析第48-54页
 1. 材料与方法第48-49页
   ·供试菌株第48页
   ·培养基第48页
     ·试管斜面培养基第48页
     ·液体PDA培养基第48页
   ·主要仪器与试剂第48页
   ·试验方法第48-49页
     ·菌丝培养第48页
     ·DNA的提取和检测第48页
     ·ISSR反应体系优化第48页
     ·ISSR引物的筛选第48-49页
     ·PCR产物的电泳检测第49页
     ·数据统计与分析第49页
 2. 结果与分析第49-51页
   ·DNA质量检测第49页
   ·ISSR反应体系的优化第49-50页
     ·扩增程序的选择第49页
     ·PCR反应体系的优化第49-50页
   ·ISSR引物的筛选第50页
   ·ISSR扩增第50页
   ·样品的相似系数及UPGMA聚类分析第50-51页
 3. 小结与讨论第51-54页
第六章 北冬虫夏草SCoT分析第54-58页
 1. 材料与方法第54-56页
   ·供试菌株第54页
   ·培养基第54页
     ·试管斜面培养基第54页
     ·液体PDA培养基第54页
   ·主要仪器与试剂第54页
   ·试验方法第54-56页
     ·菌丝培养第54页
     ·DNA的提取第54页
     ·SCoT反应体系优化第54-55页
     ·SCoT引物的筛选第55-56页
     ·PCR产物的检测第56页
     ·数据统计与分析第56页
 2. 结果与分析第56-57页
   ·DNA质量检测第56页
   ·SCoT反应体系的优化第56-57页
   ·SCoT引物的筛选第57页
 3. 小结与讨论第57-58页
第七章 北冬虫夏草ITS分析第58-64页
 1. 材料与方法第58-59页
   ·供试菌株第58页
   ·培养基第58页
     ·试管斜面培养基第58页
     ·液体PDA培养基第58页
   ·主要仪器与试剂第58页
   ·试验方法第58-59页
     ·菌丝培养第58页
     ·DNA的提取第58页
     ·ITS反应体系第58页
     ·ITS引物第58-59页
     ·PCR产物的检测第59页
     ·ITS片段的纯化、克隆与测序第59页
     ·ITS序列分析与系统树的构建第59页
 2. 结果与分析第59-62页
   ·DNA质量检测第59页
   ·ITS片段的检测第59-60页
   ·ITS克隆片段的菌液检测第60页
   ·ITS测序结果及差异对比第60页
   ·ITS序列的Blastn及初步鉴定结果第60-62页
   ·ITS序列的系统发育学分析第62页
 3. 小结与讨论第62-64页
总结、创新与展望第64-68页
 1. 拮抗试验与分子标记第64页
 2. 高质量DNA的提取第64页
 3. SRAP、ISSR、SCoT、ITS四种分子标记的比较分析第64-66页
 4. 创新点第66页
 5. 展望第66-68页
参考文献第68-74页
附录A SRAP扩增图谱第74-77页
附录B ISSR扩增图谱第77-80页
附录C ITS序列第80-89页
致谢第89-91页
作者简介第91页

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