摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-15页 |
第一章 前言 | 第15-27页 |
1. 北冬虫夏草的研究进展 | 第15-19页 |
·北冬虫夏草的栽培技术研究 | 第15-17页 |
·将北冬虫夏草菌接种于固体培养基上 | 第15-16页 |
·液体培养北冬虫夏草菌丝 | 第16-17页 |
·将北冬虫夏草菌接种于蛹体 | 第17页 |
·北冬虫夏草的药效成分研究 | 第17-18页 |
·北冬虫夏草的药理作用研究 | 第18-19页 |
·调节免疫系统 | 第18-19页 |
·抗肿瘤作用 | 第19页 |
·降血脂及降血压作用 | 第19页 |
·镇静及激素样作用 | 第19页 |
·开发与应用 | 第19页 |
2. 食用菌中的拮抗反应 | 第19-20页 |
3. 分子标记及其在食用菌中的应用 | 第20-26页 |
·随机扩增多态DNA(RAPD) | 第20-21页 |
·相关序列扩增多态性(SRAP) | 第21-22页 |
·靶位区域扩增多态性(TRAP) | 第22-23页 |
·简单重复序列间扩增(ISSR) | 第23页 |
·目标起始密码子多态性(SCOT) | 第23页 |
·特征性片段扩增区域(SCAR) | 第23-24页 |
·内转录间隔区(ITS) | 第24-25页 |
·分子标记在冬虫夏草菌研究中的应用 | 第25-26页 |
4. 研究目的与意义 | 第26-27页 |
第二章 北冬虫夏草菌株的拮抗试验 | 第27-32页 |
1. 材料与方法 | 第27页 |
·供试菌株 | 第27页 |
·平板培养基 | 第27页 |
·试验方法 | 第27页 |
2. 结果与分析 | 第27-28页 |
3. 小结与讨论 | 第28-32页 |
第三章 北冬虫夏草基因组DNA的提取 | 第32-40页 |
1. 材料与方法 | 第32-36页 |
·供试菌株 | 第32页 |
·培养基 | 第32页 |
·试管斜面培养基 | 第32页 |
·液体PDA培养基 | 第32页 |
·主要试剂与仪器、设备 | 第32-33页 |
·方法 | 第33-36页 |
·菌丝培养 | 第33页 |
·DNA提取方法 | 第33-35页 |
·DNA质量检测 | 第35-36页 |
2. 结果与分析 | 第36-38页 |
·样品DNA的紫外吸收值比较 | 第36页 |
·电泳检测结果 | 第36-37页 |
·PCR扩增检测 | 第37页 |
·酶切效果分析 | 第37-38页 |
3. 小结与讨论 | 第38-40页 |
第四章 北冬虫夏草SRAP分析 | 第40-48页 |
1. 材料与方法 | 第40-42页 |
·供试菌株 | 第40页 |
·培养基 | 第40页 |
·试管斜面培养基 | 第40页 |
·液体PDA培养基 | 第40页 |
·主要仪器与试剂 | 第40页 |
·试验方法 | 第40-42页 |
·菌丝培养 | 第40页 |
·DNA的提取与检测 | 第40页 |
·SRAP反应体系优化 | 第40-41页 |
·SRAP引物的筛选 | 第41页 |
·PCR产物的电泳检测 | 第41-42页 |
·数据统计与分析 | 第42页 |
2. 结果与分析 | 第42-45页 |
·DNA质量检测结果 | 第42页 |
·SRAP反应体系的优化 | 第42-44页 |
·Mg~(2+)浓度对SRAP扩增的影响 | 第42-43页 |
·Taq DNA聚合酶的用量对SRAP扩增的影响 | 第43页 |
·dNTPs浓度对SRAP扩增的影响 | 第43页 |
·引物浓度对SRAP扩增的影响 | 第43-44页 |
·模板DNA用量对SRAP扩增的影响 | 第44页 |
·SRAP引物的筛选 | 第44页 |
·SRAP扩增 | 第44页 |
·样品的相似系数及UPGMA聚类分析 | 第44-45页 |
3. 小结与讨论 | 第45-48页 |
第五章 北冬虫夏草ISSR分析 | 第48-54页 |
1. 材料与方法 | 第48-49页 |
·供试菌株 | 第48页 |
·培养基 | 第48页 |
·试管斜面培养基 | 第48页 |
·液体PDA培养基 | 第48页 |
·主要仪器与试剂 | 第48页 |
·试验方法 | 第48-49页 |
·菌丝培养 | 第48页 |
·DNA的提取和检测 | 第48页 |
·ISSR反应体系优化 | 第48页 |
·ISSR引物的筛选 | 第48-49页 |
·PCR产物的电泳检测 | 第49页 |
·数据统计与分析 | 第49页 |
2. 结果与分析 | 第49-51页 |
·DNA质量检测 | 第49页 |
·ISSR反应体系的优化 | 第49-50页 |
·扩增程序的选择 | 第49页 |
·PCR反应体系的优化 | 第49-50页 |
·ISSR引物的筛选 | 第50页 |
·ISSR扩增 | 第50页 |
·样品的相似系数及UPGMA聚类分析 | 第50-51页 |
3. 小结与讨论 | 第51-54页 |
第六章 北冬虫夏草SCoT分析 | 第54-58页 |
1. 材料与方法 | 第54-56页 |
·供试菌株 | 第54页 |
·培养基 | 第54页 |
·试管斜面培养基 | 第54页 |
·液体PDA培养基 | 第54页 |
·主要仪器与试剂 | 第54页 |
·试验方法 | 第54-56页 |
·菌丝培养 | 第54页 |
·DNA的提取 | 第54页 |
·SCoT反应体系优化 | 第54-55页 |
·SCoT引物的筛选 | 第55-56页 |
·PCR产物的检测 | 第56页 |
·数据统计与分析 | 第56页 |
2. 结果与分析 | 第56-57页 |
·DNA质量检测 | 第56页 |
·SCoT反应体系的优化 | 第56-57页 |
·SCoT引物的筛选 | 第57页 |
3. 小结与讨论 | 第57-58页 |
第七章 北冬虫夏草ITS分析 | 第58-64页 |
1. 材料与方法 | 第58-59页 |
·供试菌株 | 第58页 |
·培养基 | 第58页 |
·试管斜面培养基 | 第58页 |
·液体PDA培养基 | 第58页 |
·主要仪器与试剂 | 第58页 |
·试验方法 | 第58-59页 |
·菌丝培养 | 第58页 |
·DNA的提取 | 第58页 |
·ITS反应体系 | 第58页 |
·ITS引物 | 第58-59页 |
·PCR产物的检测 | 第59页 |
·ITS片段的纯化、克隆与测序 | 第59页 |
·ITS序列分析与系统树的构建 | 第59页 |
2. 结果与分析 | 第59-62页 |
·DNA质量检测 | 第59页 |
·ITS片段的检测 | 第59-60页 |
·ITS克隆片段的菌液检测 | 第60页 |
·ITS测序结果及差异对比 | 第60页 |
·ITS序列的Blastn及初步鉴定结果 | 第60-62页 |
·ITS序列的系统发育学分析 | 第62页 |
3. 小结与讨论 | 第62-64页 |
总结、创新与展望 | 第64-68页 |
1. 拮抗试验与分子标记 | 第64页 |
2. 高质量DNA的提取 | 第64页 |
3. SRAP、ISSR、SCoT、ITS四种分子标记的比较分析 | 第64-66页 |
4. 创新点 | 第66页 |
5. 展望 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
附录A SRAP扩增图谱 | 第74-77页 |
附录B ISSR扩增图谱 | 第77-80页 |
附录C ITS序列 | 第80-89页 |
致谢 | 第89-91页 |
作者简介 | 第91页 |