摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
第一章 综述-硬骨鱼类 T细胞分化及免疫球蛋白的研究现状 | 第13-29页 |
·鱼类免疫系统 | 第13-15页 |
·胸腺 | 第13页 |
·皮肤 | 第13-14页 |
·鳃 | 第14页 |
·肾 | 第14页 |
·脾 | 第14-15页 |
·肠道 | 第15页 |
·硬骨鱼类的 T 细胞研究现状 | 第15-25页 |
·CD8T 细胞 | 第15-16页 |
·CD4T 细胞 | 第16-23页 |
·T 细胞分化相关分子之间的调节规律 | 第23-25页 |
·硬骨鱼类免疫球蛋白研究现状 | 第25-28页 |
·本研究的目的 | 第28-29页 |
第二章 大西洋鳕鱼 TBK1 基因的克隆表达及启动区域结构分析 | 第29-46页 |
·前言 | 第29-30页 |
·材料与方法 | 第30-34页 |
·TBK1cDNA 序列的克隆和基因测序 | 第30页 |
·系统发育分析 | 第30-31页 |
·应用基因步移的方法对 TBK1 基因 5 侧翼序列克隆测序 | 第31-32页 |
·报告基因载体的构建 | 第32页 |
·细胞培养、转染及报告载体的活性检测 | 第32-33页 |
·大西洋鳕鱼前肾原代白细胞的培养 | 第33页 |
·Poly I:C, PMA 和β-glucan 体外刺激前肾白细胞 | 第33页 |
·Poly I:C, PMA 和β-glucan 体内刺激大西洋鳕鱼幼鱼 | 第33-34页 |
·实时定量荧光 PCR | 第34页 |
·数据分析 | 第34页 |
·结果 | 第34-43页 |
·大西洋鳕鱼 TBK1 基因特点 | 第34-37页 |
·大西洋鳕鱼 TBK1 基因 5’侧翼序列 | 第37-39页 |
·TBK1 报告基因载体活性检测结果 | 第39-40页 |
·TBK1 基因在组织中的分布 | 第40-41页 |
·大西洋鳕鱼 TBK1 在前肾、脾脏及前肾白细胞中的应答 | 第41-43页 |
·讨论 | 第43-46页 |
第三章 大西洋鳕鱼 NF-κB抑制因子(NRF)的克隆表达,亚细胞定位及组织中的分布 | 第46-55页 |
·前言 | 第46页 |
·材料与方法 | 第46-48页 |
·NRF 基因全长的鉴定及测序 | 第46-47页 |
·系统发育分析 | 第47页 |
·载体的构建 | 第47-48页 |
·细胞培养、细胞转染及绿色荧光观察 | 第48页 |
·实时定量荧光 PCR | 第48页 |
·数据分析 | 第48页 |
·结果 | 第48-53页 |
·大西洋鳕鱼 NRF 基因特点 | 第48-52页 |
·NRF 基因在组织中的分布 | 第52页 |
·NRF 基因的亚细胞定位 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53-55页 |
第四章 大西洋鳕鱼 T-box 家族转录因子 Eomes/Tbr2的分子克隆、启动区域特点及表达分析 | 第55-66页 |
·前言 | 第55页 |
·材料与方法 | 第55-58页 |
·Eomes 基因 cDNA 序列的克隆和基因测序 | 第55-56页 |
·系统发育分析 | 第56-57页 |
·应用基因步移的方法对 Eomes 基因 5’侧翼序列的克隆测序 | 第57页 |
·报告基因载体的构建 | 第57页 |
·细胞培养、转染及报告载体的活性检测 | 第57页 |
·实时定量荧光 PCR | 第57页 |
·数据分析 | 第57-58页 |
·结果 | 第58-64页 |
·大西洋鳕鱼 Eomes 基因特点 | 第58-62页 |
·大西洋鳕鱼 Eomes 基因 5’侧翼序列 | 第62-63页 |
·Eomes 报告基因载体活性检测结果 | 第63页 |
·Eomes 基因在组织中的分布 | 第63-64页 |
·讨论 | 第64-66页 |
第五章 大西洋鳕鱼转录因子 GATA-3及其剪切体的分子克隆和功能检测 | 第66-84页 |
·前言 | 第66-67页 |
·材料与方法 | 第67-70页 |
·大西洋鳕鱼 GATA-3 cDNAs 的克隆 | 第67-68页 |
·系统发育分析 | 第68页 |
·载体的构建 | 第68-69页 |
·细胞培养、细胞转染、和报告基因载体表达活性检测 | 第69页 |
·大西洋鳕鱼前肾原代白细胞的培养 | 第69页 |
·Poly I:C, PMA 和β-glucan 体外刺激前肾白细胞 | 第69-70页 |
·Poly I:C, PMA 和β-glucan 体内刺激大西洋鳕鱼幼鱼 | 第70页 |
·实时定量荧光 PCR | 第70页 |
·数据分析 | 第70页 |
·结果 | 第70-80页 |
·大西洋鳕鱼 GATA-3 cDNA 核苷酸序列和氨基酸序列 | 第70-74页 |
·GmGATA-3L 与 GmGATA-3S 细胞内定位 | 第74页 |
·GmGATA-3 与 GmGATA-3S 转录功能的检测 | 第74-77页 |
·GmGATA-3L 与 GmGATA-3S 基因 mRNA 在组织中的分布 | 第77-79页 |
·GmGATA-3L 和 GmGATA-3S 基因在体内和体外的表达 | 第79-80页 |
·讨论 | 第80-84页 |
第六章 大西洋鳕鱼 Foxp3的分子克隆,组织分布,及启动区域分析 | 第84-95页 |
·前言 | 第84页 |
·材料与方法 | 第84-86页 |
·大西洋鳕鱼 Foxp3 的克隆 | 第84-85页 |
·系统发育分析 | 第85页 |
·应用基因步移的方法对 Foxp3 基因 5’侧翼序列的克隆测序 | 第85-86页 |
·报告基因载体的构建 | 第86页 |
·细胞培养、转染及报告载体的活性检测 | 第86页 |
·实时定量荧光 PCR | 第86页 |
·数据分析 | 第86页 |
·结果 | 第86-93页 |
·大西洋鳕鱼 Foxp3 基因特点 | 第86-90页 |
·大西洋鳕鱼 Eomes 基因 5’侧翼序列 | 第90-92页 |
·Eomes 报告基因载体活性检测结果 | 第92-93页 |
·Eomes 基因在组织中的分布 | 第93页 |
·讨论 | 第93-95页 |
第七章 牙鲆免疫相关组织特征及抗体阳性细胞的免疫组化定位及流式细胞术分析 | 第95-110页 |
·前言 | 第95页 |
·材料与方法 | 第95-99页 |
·实验用鱼及材料药品 | 第95-96页 |
·组织学及免疫组织化学染色准备 | 第96页 |
·细胞化学及细胞免疫化学准备 | 第96-97页 |
·免疫化学染色 | 第97-98页 |
·牙鲆肾脏,脾脏,肠道,外周血单细胞悬液的制备 | 第98-99页 |
·流式细胞术分析 | 第99页 |
·结果 | 第99-108页 |
·外周血 | 第99-101页 |
·脾脏 | 第101页 |
·肠道 | 第101-105页 |
·肝脏 | 第105页 |
·肾脏 | 第105-108页 |
·抗体阳性细胞在组织中的分布比例 | 第108页 |
·讨论 | 第108-110页 |
参考文献 | 第110-131页 |
简写说明 | 第131-133页 |
在读期间论文发表情况 | 第133-134页 |
致谢 | 第134-135页 |