摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
引言 | 第11-17页 |
1、金鱼简介 | 第11页 |
2、雌核发育 | 第11-12页 |
·雌核发育的原理 | 第11-12页 |
·雌核发育的方法 | 第12页 |
3、鱼类性别决定和性别分化 | 第12-15页 |
·鱼类性别决定的遗传因素 | 第13页 |
·环境因子与性别分化 | 第13-14页 |
·外源性激素 | 第14-15页 |
4、芳香化酶 | 第15-16页 |
5、DMRT 基因 | 第16页 |
6、研究目的和意义 | 第16-17页 |
第一章 金鱼雌核发育及鉴定 | 第17-26页 |
1 材料 | 第17-18页 |
·实验材料与试剂 | 第17页 |
·实验仪器 | 第17-18页 |
2 方法 | 第18-20页 |
·实验鱼的处理 | 第18页 |
·精子的处理和观察 | 第18页 |
·金鱼精子灭活与染色体加倍 | 第18页 |
·金鱼胚胎细胞培养 | 第18-19页 |
·染色体制片 | 第19页 |
·胚胎发育过程观察 | 第19-20页 |
3 结果 | 第20-25页 |
·精子的处理和观察结果 | 第20-21页 |
·单倍体对照组形态学结果 | 第21页 |
·雌核发育金鱼胚胎及仔鱼发育过程 | 第21-24页 |
·雌核发育金鱼胚胎细胞核型分析 | 第24-25页 |
4 讨论 | 第25-26页 |
第二章 金鱼 Cyp19a 基因分子特征和表达分析 | 第26-43页 |
1 材料 | 第26-28页 |
·实验用鱼 | 第26页 |
·试验试剂 | 第26-27页 |
·试验仪器 | 第27-28页 |
2 方法 | 第28-33页 |
·RNA 的提取与鉴定 | 第28页 |
·金鱼基因组 DNA 提取 | 第28页 |
·金鱼 Cyp19a 基因全长克隆 | 第28-30页 |
·金鱼 Cyp19a 基因启动子序列和功能分析 | 第30-32页 |
·实时荧光定量 PCR | 第32页 |
·石蜡切片制作及 HE 染色 | 第32-33页 |
·免疫组化 | 第33页 |
3 结果 | 第33-40页 |
·基因全长克隆 | 第33-38页 |
·Cyp19a 基因启动子活性检测 | 第38-39页 |
·Cyp19a 基因表达量分析 | 第39页 |
·Cyp19a 免疫组织化学定位 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-43页 |
第三章 金鱼 Dmrt2 基因表达分析 | 第43-52页 |
1 材料 | 第43页 |
2 方法 | 第43-45页 |
·金鱼 Dmrt2a 基因全长的扩增 | 第43-44页 |
·Dmrt2a 基因序列分析 | 第44-45页 |
·实时荧光定量 PCR | 第45页 |
3 结果 | 第45-49页 |
·Dmrt2a 基因全长的扩增及结构分析 | 第45-46页 |
·Dmrt2a 和 Dmrt2b 序列比对及进化树构建 | 第46-48页 |
·Dmrt2a 和 Dmrt2b 表达量分析 | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
结语 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
附录 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |