| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-29页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·肺癌 | 第10-13页 |
| ·肺癌发病简介 | 第10-12页 |
| ·肺癌的分类 | 第12页 |
| ·肺癌的治疗 | 第12-13页 |
| ·表皮生长因子受体 | 第13-19页 |
| ·EGFR的结构 | 第13-17页 |
| ·EGFR激活的信号通路 | 第17-19页 |
| ·信号的下调 | 第19-20页 |
| ·EGFR与肺癌 | 第20-23页 |
| ·EGFR突变 | 第21-22页 |
| ·EGFR突变的种类 | 第22-23页 |
| ·酪氨酸激酶抑制剂TKI(Tyrosine Kinase Inhibitor) | 第23-29页 |
| ·TKI简介 | 第23-24页 |
| ·针对EGFR的TKI | 第24-29页 |
| 第2章 材料与方法 | 第29-47页 |
| ·实验试剂和材料 | 第29-34页 |
| ·细胞 | 第29页 |
| ·主要试剂和材料 | 第29-33页 |
| ·主要仪器设备 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-47页 |
| ·检测细胞增殖 | 第34-35页 |
| ·PI染色检测细胞周期 | 第35页 |
| ·Annexin-V染色检测细胞凋亡 | 第35-36页 |
| ·EB/AO染色 | 第36页 |
| ·Caspase活性检测 | 第36-37页 |
| ·克隆形成实验 | 第37页 |
| ·蛋白样品的制备 | 第37页 |
| ·BCA法检测蛋白浓度 | 第37-38页 |
| ·Western blot检测 | 第38页 |
| ·细胞总RNA提取(Trizol法提取RNA) | 第38-39页 |
| ·RNA反转录成cDNA | 第39页 |
| ·PCR扩增 | 第39页 |
| ·实时定量PCR(Real Time PCR) | 第39-40页 |
| ·质粒载体构建 | 第40页 |
| ·大肠杆菌转化实验 | 第40页 |
| ·质粒小提 | 第40-41页 |
| ·DNA片段回收 | 第41页 |
| ·质粒大提 | 第41-42页 |
| ·细胞转染实验 | 第42页 |
| ·稳定株筛选 | 第42页 |
| ·耐药株的构建 | 第42-43页 |
| ·划痕试验 | 第43页 |
| ·Trans well迁移/侵袭实验 | 第43页 |
| ·细胞免疫荧光染色 | 第43-44页 |
| ·HUVEC成管实验 | 第44页 |
| ·EGFR ARRAY ASSAY | 第44-45页 |
| ·激酶活性检测 | 第45页 |
| ·SCID鼠移植瘤模型实验 | 第45-46页 |
| ·引物列表 | 第46-47页 |
| 第3章 实验结果和讨论 | 第47-94页 |
| ·化合物的筛选 | 第47-51页 |
| ·激酶活性筛选 | 第47-49页 |
| ·细胞活性筛选 | 第49-51页 |
| ·CEGF06 | 第51页 |
| ·CEGF06作用靶点的确定 | 第51-61页 |
| ·CEGF06的细胞活性 | 第52-53页 |
| ·EGFR沉默实验 | 第53-55页 |
| ·泛激酶活性检测 | 第55-56页 |
| ·CEGF06的细胞选择性 | 第56-58页 |
| ·选择性产生的原因的粗略探讨 | 第58-61页 |
| ·CEGF06对EGFR信号通路的影响 | 第61-67页 |
| ·CEGF06对各EGFR磷酸化位点的影响 | 第61-63页 |
| ·CEGF06对EGFR信号通路的影响 | 第63-66页 |
| ·CEGF06对细胞骨架的影响 | 第66-67页 |
| ·CEGF06的抗肿瘤活性 | 第67-81页 |
| ·CEGF06的抗肿瘤细胞增殖活性 | 第67-68页 |
| ·CEGF06引起细胞周期G1→S的阻滞 | 第68-70页 |
| ·CEGF06引起细胞凋亡 | 第70-75页 |
| ·CEGF06影响H1975细胞的迁移和侵袭能力 | 第75-78页 |
| ·CEGF06影响脐静脉内皮细胞的成管能力 | 第78-79页 |
| ·CEGF06能显著抑制移植瘤 | 第79-81页 |
| ·结果分析及讨论 | 第81-87页 |
| ·CEGF27/CEGF29 | 第87-94页 |
| ·CEGF27/CEGF29的体外活性 | 第87页 |
| ·CEGF27/CEGF29的激酶选择性 | 第87-89页 |
| ·CEGF27/CEGF29影响EGFR的信号通路 | 第89-90页 |
| ·CEGF27/CEG29的抗肿瘤活性 | 第90-92页 |
| ·CEGF06的小鼠移植瘤模型试验 | 第92-93页 |
| ·讨论 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 在读期间发表的论文和研究成果 | 第113页 |