摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
目录 | 第10-12页 |
前言 | 第12-15页 |
参考文献 | 第13-15页 |
第一部分 文献综述 | 第15-28页 |
一、表观遗传修饰对哺乳动物早期胚胎发育及克隆胚胎发育的影响 | 第15-20页 |
1. 表观遗传修饰及其机制 | 第15-17页 |
·DNA甲基化 | 第15页 |
·组蛋白修饰作用 | 第15-17页 |
·甲基化修饰 | 第16页 |
·乙酰化修饰 | 第16页 |
·甲基化修饰与乙酰化修饰的关系 | 第16-17页 |
·基因印记作用 | 第17页 |
·X染色体失活 | 第17页 |
2. 表观遗传修饰与胚胎早期发育 | 第17-19页 |
·受精卵中的DNA甲基化与去甲基化 | 第17-18页 |
·组蛋白乙酰化修饰及其在合子基因激活、染色质结构重组中的作用 | 第18-19页 |
·组蛋白乙酰化修饰 | 第18页 |
·合子及胚胎基因组激活(zygotic/embryonic gene activation,ZGA & EGA) | 第18-19页 |
·染色质重组(chromatin remodeling) | 第19页 |
3. 表观遗传修饰与克隆胚胎发育 | 第19-20页 |
二、转录因子HDAC2在早期胚胎发育过程中的表达调控 | 第20-21页 |
1. HDAC的功能和分类 | 第20-21页 |
2. 组蛋白乙酰化与胚胎发生发育 | 第21页 |
三、RNAi原理及在哺乳动物早期胚胎发育研究中的应用 | 第21-24页 |
1. RNAi的作用机制 | 第22页 |
2. 哺乳动物中的RNAi应用 | 第22-24页 |
·哺乳动物细胞水平的RNAi | 第22-23页 |
·哺乳动物卵母细胞中的RNAi | 第23-24页 |
参考文献 | 第24-28页 |
第二部分 研究论文 | 第28-75页 |
一、HDAC2干扰载体的构建与细胞水平上的效应检测 | 第28-61页 |
摘要 | 第28页 |
引言 | 第28-29页 |
1 材料与方法 | 第29-40页 |
2 结果 | 第40-56页 |
·pSilencer3.0-H1-shRNA的酶切鉴定 | 第40页 |
·表达载体pCDsRed2-shRNA的酶切鉴定 | 第40-42页 |
·表达载体pCDsRed2-shRNA的测序结果 | 第42-44页 |
·脂质体转染小鼠胎儿成纤维细胞及筛选 | 第44-45页 |
·实时定量PCR引物及模板质量检测 | 第45-48页 |
·SYBR Green荧光定量PCR法检测HDAC2干扰效率 | 第48-50页 |
·HDAC2干扰载体转染MEF细胞后组蛋白修饰变化 | 第50-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-61页 |
二、干扰HDAC2表达对小鼠早期胚胎发育的影响 | 第61-75页 |
摘要 | 第61页 |
引言 | 第61-62页 |
1 材料与方法 | 第62-64页 |
2 结果 | 第64-72页 |
·原核注射后的小鼠胚胎发育 | 第64-65页 |
·干扰载体对小鼠早期胚胎hdac2 mRNA表达的影响 | 第65-66页 |
·原核注射hdac2干扰载体后胚胎组蛋白修饰变化情况 | 第66-72页 |
3 讨论 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-75页 |
攻读硕士期间发表及待发表的论文 | 第75页 |
致谢 | 第75页 |