| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-35页 |
| 第一节 水稻稻瘟病基础研究 | 第13-19页 |
| ·稻瘟病病原真菌的生物学特征 | 第13-14页 |
| ·稻瘟病的发病条件及发生过程 | 第14-15页 |
| ·稻瘟病的症状表现 | 第15-17页 |
| ·苗瘟 | 第16页 |
| ·叶瘟 | 第16页 |
| ·节瘟 | 第16-17页 |
| ·穗颈瘟 | 第17页 |
| ·谷粒瘟 | 第17页 |
| ·稻瘟病的危害 | 第17-18页 |
| ·稻瘟病生理小种鉴定 | 第18-19页 |
| 第二节 抗稻瘟病基因研究 | 第19-30页 |
| ·稻瘟病抗性基因的分子定位 | 第19-22页 |
| ·水稻抗瘟性遗传研究 | 第22-23页 |
| ·稻瘟病抗性基因的克隆 | 第23-29页 |
| ·Pib基因的克隆 | 第24-25页 |
| ·Pi-ta基因的克隆 | 第25-26页 |
| ·Pi-2、Piz-t和Pi-9基因的克隆 | 第26-27页 |
| ·Pi-d2基因的克隆 | 第27页 |
| ·Pi-36基因的克隆 | 第27-28页 |
| ·Pi-37基因的克隆 | 第28页 |
| ·Pi-k~m基因的克隆 | 第28-29页 |
| ·Pi-5基因的克隆 | 第29页 |
| ·稻瘟病抗性的鉴定技术 | 第29-30页 |
| ·稻瘟病菌的基因组学研究 | 第30页 |
| 第三节 水稻遗传转化研究进展 | 第30-34页 |
| ·水稻转化受体系统 | 第31-32页 |
| ·原生质体再生系统 | 第31页 |
| ·愈伤组织再生系统 | 第31页 |
| ·幼嫩子房转化系统 | 第31-32页 |
| ·常用的基因转化方法 | 第32-34页 |
| ·基因枪法 | 第32页 |
| ·农杆菌介导法 | 第32-33页 |
| ·花粉管通道法 | 第33页 |
| ·PEG转化法 | 第33页 |
| ·电激法 | 第33-34页 |
| 第四节 本研究的目的和意义 | 第34-35页 |
| 第二章 植物表达载体的构建 | 第35-45页 |
| 摘要 | 第35页 |
| 1 材料和方法 | 第35-38页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·质粒与菌株 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| ·质粒抽提液 | 第35-36页 |
| ·培养基 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-38页 |
| ·CaCl_2法制备大肠肝菌感受态细胞的制备 | 第36页 |
| ·质粒提取 | 第36-37页 |
| ·酶切产物的回收(参见鼎国产品说明书) | 第37页 |
| ·连接反应与转化 | 第37页 |
| ·根癌农杆菌EHA105感受态的制备和转化 | 第37-38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-45页 |
| ·Pib基因的外显子特点 | 第38-39页 |
| ·Pib基因的酶切位点分析 | 第39页 |
| ·Pib基因及双元载体pPZP2Ha3(+/-)/pCMBIA1302的鉴定 | 第39页 |
| ·pNAR701/pNAR705的构建 | 第39-40页 |
| ·pNAR702/pNAR703的构建 | 第40-41页 |
| ·pNAR704的构建 | 第41-42页 |
| ·pNAR706的构建 | 第42-43页 |
| ·pNAR707/pNAR708的构建 | 第43-44页 |
| ·双元载体转化农杆菌EHA105 | 第44-45页 |
| 第三章 农杆菌介导的转基因水稻植株获得 | 第45-55页 |
| 摘要 | 第45页 |
| 1 材料与方法 | 第45-51页 |
| ·实验材料 | 第45-46页 |
| ·转基因受体品种 | 第45页 |
| ·质粒和菌株 | 第45页 |
| ·试剂和试剂盒 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-51页 |
| ·水稻愈伤组织的诱导、继代培养和农杆菌转化 | 第46-47页 |
| ·转基因水稻离体叶片潮霉素抗性鉴定 | 第47页 |
| ·水稻基因组DNA的提取 | 第47-48页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第48页 |
| ·转基因水稻T_0代种子的潮霉素发芽鉴定 | 第48页 |
| ·水稻叶片总DNA的提取 | 第48-49页 |
| ·转基因水稻的Southern blot鉴定 | 第49-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-55页 |
| ·转基因水稻植株的获得 | 第51-52页 |
| ·转基因水稻叶片的离体抗潮霉素鉴定 | 第52页 |
| ·转基因植株的PCR鉴定 | 第52-53页 |
| ·转基因T_0代种子的潮霉素发芽鉴定 | 第53-54页 |
| ·转基因植株的Southern blot | 第54-55页 |
| 第四章 转基因植株分析及抗病性鉴定 | 第55-65页 |
| 摘要 | 第55页 |
| 1 材料与方法 | 第55-59页 |
| ·实验材料 | 第55-56页 |
| ·试剂和仪器 | 第55页 |
| ·缓冲液与培养基 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-59页 |
| ·水稻总RNA的提取 | 第56页 |
| ·水稻的Northern blot鉴定 | 第56-57页 |
| ·T_1代转基因植株的荧光定量分析 | 第57-58页 |
| ·转基因植株离体叶片的接菌鉴定 | 第58页 |
| ·T_1和T_2代转基因植株苗期的稻瘟病抗性鉴定 | 第58-59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-63页 |
| ·转基因植株的Northern blot分析 | 第59页 |
| ·T_1转基因植株的实时荧光定量PCR分析 | 第59-63页 |
| ·实时荧光定量PCR条件的优化选择 | 第59-60页 |
| ·T_1代转基因植株的实时荧光定量分析 | 第60-61页 |
| ·T_1转基因植株的分蘖期离体叶片抗瘟性鉴定 | 第61-62页 |
| ·T_1和T_2代转基因植株苗期的抗瘟性鉴定 | 第62-63页 |
| 3. 讨论 | 第63-65页 |
| 全文总结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 附录 | 第72-75页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |