中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-7页 |
名词缩写 | 第7-8页 |
第一部分 引言 | 第8-17页 |
一 铁效率遗传方式研究 | 第9页 |
二 酵母铁吸收转运相关基因的克隆 | 第9-10页 |
三 植物铁吸收转运相关基因的克隆 | 第10-14页 |
四 蛋白质分析在植物铁效率研究中的应用 | 第14-15页 |
五 重组DNA技术在植物铁效率研究中的应用 | 第15-17页 |
第二部分 实验材料和试剂 | 第17-20页 |
第三部分 实验方法和过程 | 第20-32页 |
一 基因的结构序列分析 | 第20页 |
二 重组质粒的构建 | 第20-27页 |
1 原核表达重组质粒pGEX-fdr1的构建 | 第20-23页 |
2 植物转化重组质粒pBF的构建 | 第23-25页 |
3 原核表达重组质粒pET-fdr2的构建 | 第25-26页 |
4 植物转化重组质粒pBH的构建 | 第26-27页 |
三 农杆菌的转化 | 第27-29页 |
四 叶盘法转化烟草 | 第29页 |
五 转基因烟草的PCR鉴定 | 第29-30页 |
六 转基因烟草的Southern杂交鉴定 | 第30-32页 |
第四部分 结果和讨论 | 第32-49页 |
一 Fdr片段的结构分析 | 第32-37页 |
1 Fdr片段的来源 | 第32页 |
2 基因fdr1序列分析 | 第32-34页 |
3 基因fdr2序列分析 | 第34-37页 |
二 基因fdr1和fdr2功能初步鉴定 | 第37-49页 |
1 PCR扩增目的片段 | 第37页 |
2 原核表达质粒的构建与鉴定 | 第37-39页 |
2.1 重组质粒pGEX-fdr1的构建与鉴定 | 第37-38页 |
2.2 重组质粒pET-fdr2的构建与鉴定 | 第38-39页 |
3 植物表达质粒的构建与鉴定 | 第39-40页 |
3.1 重组质粒pBF的构建与鉴定 | 第39-40页 |
3.2 重组质粒pBH的构建与鉴定 | 第40页 |
4 利用冻融法将pBF和pBH转入到农杆菌LBA4404中 | 第40-41页 |
5 烟草的遗传转化和转基因植株的培育 | 第41页 |
6 转基因植株的检测 | 第41-42页 |
7 fdr2片段的Southern杂交检测 | 第42-49页 |
第五部分 结论与展望 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
附录 | 第55-67页 |