| 缩略词表 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 前言 | 第14-19页 |
| 第一章 A/xinjiang/1/2006(H5N1)株HA基因突变及8质粒系统建立 | 第19-33页 |
| 1 材料与方法 | 第20-27页 |
| ·病毒和菌种 | 第20页 |
| ·8 质粒病毒拯救系统 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第20页 |
| ·常用溶液的配置 | 第20-21页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态制备 | 第21页 |
| ·引物的设计与合成 | 第21-22页 |
| ·病毒总RNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·获取A/xinjiang/1/2006(H5N1)HA 、NA 基因 | 第23-24页 |
| ·pHW2000 的质粒图谱 | 第24-25页 |
| ·pHW2000-HA/NA重组转录/表达载体的构建 | 第25-27页 |
| 2. 结果 | 第27-29页 |
| ·基因修饰后HA蛋白结构三维预测 | 第27页 |
| ·pHW2000-HA/NA重组质粒的鉴定 | 第27-28页 |
| ·pHW2000-HA/NA 重组质粒测序结果 | 第28-29页 |
| ·流感病毒拯救8 质粒系统PCR 鉴定 | 第29页 |
| 3. 讨论 | 第29-32页 |
| 4. 结论 | 第32-33页 |
| 第二章 H5N1/xijinang/1/2006-RG 重配病毒株的拯救及初步鉴定 | 第33-50页 |
| 1 材料和方法 | 第34-41页 |
| ·细胞、鸡胚和血清 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第34页 |
| ·拯救系统8 质粒提取 | 第34-35页 |
| ·转录/表达载体的工作原理 | 第35页 |
| ·流感病毒反向遗传操作技术的路线 | 第35-36页 |
| ·HA 、NA 单基因功能验证 | 第36-37页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 重配流感病毒株的拯救 | 第37页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG重配病毒血凝效价HA）测定 | 第37-38页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG重配病毒血凝抑制试（HI） | 第38-39页 |
| ·RT-PCR 验证拯救的重配病毒 | 第39页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG重配病毒蔗糖梯度离心纯化 | 第39页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG重配病毒的SDS-PAGE | 第39-41页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 重配病毒感染MDCK 细胞的病变观察 | 第41页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 重配病毒IFA 鉴定 | 第41页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 重配病毒的电镜观察 | 第41页 |
| 2 结果 | 第41-46页 |
| ·HA、NA 单基因功能验证结果 | 第41-42页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 病毒血凝滴度 | 第42页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 病毒血抑(HI)结果 | 第42页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 重配病毒RT-PCR 鉴定结果 | 第42-43页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG HA/NA 序列分析 | 第43-44页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 重配病毒的SDS-PAGE | 第44页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 重配病毒IFA 鉴定 | 第44-45页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 重配病毒感染MDCK 的细胞病变（CPE） | 第45页 |
| ·电镜观察H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 病毒行态 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-49页 |
| 4 结论 | 第49-50页 |
| 第三章人用禽流感H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 疫苗侯选株的初步评价 | 第50-56页 |
| 1 材料和方法 | 第50-52页 |
| ·细胞、鸡胚和血清 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·实验动物 | 第50-51页 |
| ·病毒接种培养 | 第51页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 尿囊液收获 | 第51页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 疫苗侯选株稳定性研究 | 第51-52页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 疫苗侯选株的免疫原性的初步研究 | 第52页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 疫苗侯选株的安全性初步评价 | 第52页 |
| 2 结果 | 第52-54页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 疫苗侯选株稳定性检测结果 | 第52-53页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 疫苗侯选株免疫原性检测结果 | 第53-54页 |
| ·H5N1/A/xinjiang/1/2006-RG 疫苗侯选株安全性试验结果 | 第54页 |
| 3 讨论 | 第54-56页 |
| 4 结论 | 第56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 全文小结 | 第60-62页 |
| 附录 | 第62-65页 |
| 综述一 H5N1 禽流感疫苗的研究进展 | 第65-74页 |
| 综述二 反向遗传操作技术在流感病毒中的应用研究 | 第74-82页 |
| 论著人用禽流感裂解疫苗生产工艺的研究 | 第82-87页 |
| 个人简历 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
