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超大容量人源噬菌体抗体库的构建及禽流感病毒抗体的筛选

缩略词表第1-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-13页
第一章 前言第13-28页
 1 治疗性抗体第13-15页
 2 噬菌体展示抗体库技术第15-19页
   ·噬菌体展示抗体库第15-18页
   ·噬菌体抗体库技术面对的问题第18-19页
 3 Cre-loxP重组技术第19-22页
   ·Cre重组酶工作原理第19-20页
   ·Cre-loxP重组抗体库第20-22页
 4 高致病性禽流感第22-26页
   ·高致病性禽流感的危害第22-24页
   ·高致病性禽流感的对策第24-26页
 5 本研究的目的意义第26-28页
第二章 材料与方法第28-48页
 1 材料第28-33页
 2 方法第33-48页
   ·Cre-loxP重组系统的建立第33-36页
   ·初级人源天然抗体库的构建第36-43页
   ·大容量重组库的制备第43-44页
   ·H5型流感病毒人源抗体的筛选第44-48页
第三章 结果与分析第48-71页
 1 NS3529/F+菌株制备第48-53页
   ·噬菌体感染NS3529/F+菌株第48-49页
   ·NS3529/F+重组活性的验证第49-53页
 2 抗体库表达载体的改造第53-54页
 3 抗体库的构建及鉴定第54-62页
   ·PCR扩增人源VH和VL基因片第54-56页
   ·scFv基因片段库的组装第56-58页
   ·scFv基因与pCANTAB-5EX2载体的酶切第58页
   ·高效连接物的制备第58-59页
   ·高效电转感受态的制备第59-60页
   ·初级抗体库的构建和鉴定第60页
   ·超大容量抗体库的构建第60-62页
 4 抗体库的筛选第62-67页
   ·液相筛选和固液相交替筛选的比较第64-66页
   ·噬菌体抗体单克隆检测第66-67页
 5 H5型流感病毒人源scFv活性鉴定第67-71页
   ·HAI检测scFv活性第69页
   ·ELISA检测scFv活性第69-71页
第四章 讨论第71-77页
 1 抗体库的构建第71-74页
   ·抗体基因的来源第71-72页
   ·初级抗体库制备第72页
   ·大容量重组抗体库制备第72-74页
 2 H5型禽流感病毒人源抗体的筛选第74-77页
   ·抗HA抗体第74-75页
   ·从抗体库获得流感抗体第75-77页
第五章 小结第77-78页
参考文献第78-88页
致谢第88-89页
附录第89页

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