缩略词表 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一章 前言 | 第13-28页 |
1 治疗性抗体 | 第13-15页 |
2 噬菌体展示抗体库技术 | 第15-19页 |
·噬菌体展示抗体库 | 第15-18页 |
·噬菌体抗体库技术面对的问题 | 第18-19页 |
3 Cre-loxP重组技术 | 第19-22页 |
·Cre重组酶工作原理 | 第19-20页 |
·Cre-loxP重组抗体库 | 第20-22页 |
4 高致病性禽流感 | 第22-26页 |
·高致病性禽流感的危害 | 第22-24页 |
·高致病性禽流感的对策 | 第24-26页 |
5 本研究的目的意义 | 第26-28页 |
第二章 材料与方法 | 第28-48页 |
1 材料 | 第28-33页 |
2 方法 | 第33-48页 |
·Cre-loxP重组系统的建立 | 第33-36页 |
·初级人源天然抗体库的构建 | 第36-43页 |
·大容量重组库的制备 | 第43-44页 |
·H5型流感病毒人源抗体的筛选 | 第44-48页 |
第三章 结果与分析 | 第48-71页 |
1 NS3529/F+菌株制备 | 第48-53页 |
·噬菌体感染NS3529/F+菌株 | 第48-49页 |
·NS3529/F+重组活性的验证 | 第49-53页 |
2 抗体库表达载体的改造 | 第53-54页 |
3 抗体库的构建及鉴定 | 第54-62页 |
·PCR扩增人源VH和VL基因片 | 第54-56页 |
·scFv基因片段库的组装 | 第56-58页 |
·scFv基因与pCANTAB-5EX2载体的酶切 | 第58页 |
·高效连接物的制备 | 第58-59页 |
·高效电转感受态的制备 | 第59-60页 |
·初级抗体库的构建和鉴定 | 第60页 |
·超大容量抗体库的构建 | 第60-62页 |
4 抗体库的筛选 | 第62-67页 |
·液相筛选和固液相交替筛选的比较 | 第64-66页 |
·噬菌体抗体单克隆检测 | 第66-67页 |
5 H5型流感病毒人源scFv活性鉴定 | 第67-71页 |
·HAI检测scFv活性 | 第69页 |
·ELISA检测scFv活性 | 第69-71页 |
第四章 讨论 | 第71-77页 |
1 抗体库的构建 | 第71-74页 |
·抗体基因的来源 | 第71-72页 |
·初级抗体库制备 | 第72页 |
·大容量重组抗体库制备 | 第72-74页 |
2 H5型禽流感病毒人源抗体的筛选 | 第74-77页 |
·抗HA抗体 | 第74-75页 |
·从抗体库获得流感抗体 | 第75-77页 |
第五章 小结 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
附录 | 第89页 |