| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第15-29页 |
| 1.1 叶绿体分裂分子机制研究进展 | 第15-25页 |
| 1.1.1 叶绿体及分裂概述 | 第15-18页 |
| 1.1.2 FtsZ环 | 第18-20页 |
| 1.1.3 ARC5环 | 第20页 |
| 1.1.4 Min系统 | 第20-22页 |
| 1.1.5 PDV1&PDV2 | 第22-23页 |
| 1.1.6 ARC6 | 第23-24页 |
| 1.1.7 PARC6 | 第24-25页 |
| 1.2 本课题的研究内容和意义 | 第25-29页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第29-47页 |
| 2.1 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.2 实验材料 | 第30-34页 |
| 2.2.1 实验用菌种 | 第30页 |
| 2.2.2 载体 | 第30页 |
| 2.2.3 储液 | 第30-31页 |
| 2.2.4 蛋白纯化用缓冲液配方 | 第31-32页 |
| 2.2.5 SDS-PAGE以及Tricine-SDS-PAGE的配方 | 第32-34页 |
| 2.2.6 结晶条件筛选试剂盒 | 第34页 |
| 2.3 分子克隆 | 第34-38页 |
| 2.3.1 目的基因的扩增 | 第34-35页 |
| 2.3.2 提取质粒 | 第35页 |
| 2.3.3 DNA纯化与回收 | 第35-36页 |
| 2.3.4 载体以及目的基因的双酶切 | 第36-37页 |
| 2.3.5 连接 | 第37页 |
| 2.3.6 连接产物转化 | 第37-38页 |
| 2.3.7 克隆鉴定 | 第38页 |
| 2.4 蛋白纯化 | 第38-43页 |
| 2.4.1 蛋白的表达与超声破碎 | 第38-40页 |
| 2.4.2 蛋白亲和纯化 | 第40-41页 |
| 2.4.3 蛋白的凝胶色谱分离 | 第41-43页 |
| 2.5 蛋白质的结晶与优化 | 第43-45页 |
| 2.5.1 蛋白质结晶的原理 | 第43-44页 |
| 2.5.2 蛋白质结晶的方法与要求 | 第44-45页 |
| 2.5.3 晶体初筛 | 第45页 |
| 2.5.4 蛋白质晶体的优化 | 第45页 |
| 2.6 晶体结构的解析 | 第45-46页 |
| 2.6.1 晶体的防冻液 | 第45-46页 |
| 2.6.2 晶体相位的获得 | 第46页 |
| 2.6.3 晶体衍射数据的收集、处理以及解析结构 | 第46页 |
| 2.7 本章小结 | 第46-47页 |
| 第三章 ARC6-PDV2复合物的表达、纯化与结晶 | 第47-55页 |
| 3.1 ARC6与PDV2结合力的检测 | 第47-48页 |
| 3.2 ARC6-PDV2的表达与纯化 | 第48-49页 |
| 3.2.1 融合蛋白分分子筛图 | 第48-49页 |
| 3.2.2 融合蛋白的SDS-PAGE鉴定 | 第49页 |
| 3.3 ARC6-PDV2聚集形态的鉴定 | 第49-51页 |
| 3.3.1 融合蛋白非变性胶的检测 | 第50页 |
| 3.3.2 融合蛋白超速离心分析 | 第50-51页 |
| 3.3.3 融合蛋白pull down实验 | 第51页 |
| 3.4 ARC6-PDV2复合物蛋白的晶体筛选 | 第51-54页 |
| 3.4.1 晶体条件的筛选与晶体条件的获得 | 第51-53页 |
| 3.4.2 晶体条件的优化 | 第53-54页 |
| 3.5 本章小结 | 第54-55页 |
| 第四章 ARC6-PDV2复合物结构解析与生化性质研究 | 第55-67页 |
| 4.1 ARC6-PDV2蛋白的衍射与结构解析 | 第55-56页 |
| 4.1.1 晶体的捞取与防冻液的配制 | 第55页 |
| 4.1.2 晶体衍射与结构解析 | 第55-56页 |
| 4.2 ARC-PDV2复合物结构的分析 | 第56-59页 |
| 4.2.1 ARC-PDV2复合物结构 | 第56-57页 |
| 4.2.2 ARC-PDV2复合物结构与ARC6单体的比较 | 第57-58页 |
| 4.2.3 ARC6-PDV2复合物异源四聚体的形成 | 第58-59页 |
| 4.3 “锁钥机制” | 第59-62页 |
| 4.3.1 PDV2~（K299-G307）的C末端与ARC6之间的相互作用 | 第59-60页 |
| 4.3.2 PDV2~(282-307)与ARC6~(646-801)突变体蛋白之间相互作用体外验证 | 第60-61页 |
| 4.3.3 PDV2~(282-307)与ARC6~(646-801)突变体蛋白之间相互作用体内验证 | 第61-62页 |
| 4.3.4 锁钥机制 | 第62页 |
| 4.4 PDV2~(V285-1291)介导的与ARC6的相互作用及ARC6二聚体的形成 | 第62-64页 |
| 4.5 PDV2诱导ARC6形成二聚体的分子模型 | 第64-66页 |
| 4.5.1 PDV2诱导ARC6形成二聚体的先决条件 | 第65页 |
| 4.5.2 PDV2诱导ARC6形成二聚体的简化模型 | 第65-66页 |
| 4.6 本章小结 | 第66-67页 |
| 第五章 结果讨论与展望 | 第67-69页 |
| 5.1 实验结果的总结与讨论 | 第67页 |
| 5.2 质体分裂展望 | 第67-68页 |
| 5.3 本章小结 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第75-77页 |
| 作者与导师简介 | 第77-78页 |
| 北京化工大学硕士研究生学位论文答辩委员会决议书 | 第78-79页 |
