藏药红景天中查尔酮合成酶基因的克隆与分析
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-29页 |
| ·红景天属植物概述 | 第12-20页 |
| ·红景天属植物的药用历史 | 第12页 |
| ·红景天属植物的生态学研究 | 第12-13页 |
| ·红景天属植物的分类 | 第13页 |
| ·红景天属植物的化学成分和药理作用研究 | 第13-18页 |
| ·红景天的应用概况 | 第18-19页 |
| ·红景天濒危原因的分析 | 第19-20页 |
| ·黄酮类化合物代谢工程研究进展 | 第20-24页 |
| ·黄酮类化合物的结构及类别 | 第20-22页 |
| ·黄酮类化合物的生物功能和鉴定分析 | 第22-23页 |
| ·黄酮类化合物的生物合成基本途径 | 第23-24页 |
| ·植物CHS 研究现状 | 第24-27页 |
| ·CHS 分子生物学研究 | 第24-26页 |
| ·CHS 与植物生理代谢 | 第26-27页 |
| ·立题依据和主要内容 | 第27-29页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第29-41页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·红景天总DNA 的提取 | 第29-31页 |
| ·总DNA 的提取方法 | 第29-30页 |
| ·DNA 的检测及稀释 | 第30页 |
| ·RNA 的提取 | 第30-31页 |
| ·CHS 基因的克隆及测序 | 第31-36页 |
| ·引物的设计与合成 | 第31-32页 |
| ·红景天CHS 基因保守区域的PCR 扩增 | 第32页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第32页 |
| ·SON-PCR 法扩增全长 | 第32-34页 |
| ·cDNA 的PCR 扩增 | 第34页 |
| ·PCR 扩增片段回收、克隆及测序 | 第34-36页 |
| ·表达载体的构建 | 第36-38页 |
| ·红景天的组织培养 | 第38-39页 |
| ·培养条件 | 第38页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第38-39页 |
| ·愈伤组织的分化 | 第39页 |
| ·总黄酮的含量测定 | 第39-41页 |
| ·仪器与试药 | 第39-41页 |
| 第三章 结果和分析 | 第41-55页 |
| ·CHS 基因的保守区PCR 扩增 | 第41-43页 |
| ·CHS 基因的SON-PCR 全长扩增 | 第43-44页 |
| ·CHS 基因5’端的扩增 | 第43页 |
| ·CHS 基因3’端的扩增 | 第43-44页 |
| ·红景天基因DNA 全序列分析 | 第44-47页 |
| ·cDNA 的扩增 | 第47-49页 |
| ·序列对比与系统树分析 | 第49-51页 |
| ·红景天的组织培养 | 第51-52页 |
| ·总黄酮的含量测定 | 第52-54页 |
| ·芦丁标准曲线的制备 | 第52-53页 |
| ·仪器精密度测量 | 第53页 |
| ·样品的测定 | 第53页 |
| ·稳定性 | 第53-54页 |
| ·表达载体的构建与鉴定 | 第54-55页 |
| 第四章 讨论 | 第55-60页 |
| ·多糖类及多酚类药用植物DNA 和RNA 的提取 | 第55-56页 |
| ·染色体步移及SON-PCR 技术 | 第56-57页 |
| ·红景天CHS 基因的克隆 | 第57-58页 |
| ·克隆CHS 基因的意义 | 第58-59页 |
| ·红景天CHS 基因表达与黄酮的积累 | 第59页 |
| ·未来的工作及工作展望 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 硕士期间取得的研究成果 | 第66-67页 |