| 中文摘要 | 第1-14页 |
| 英文摘要 | 第14-16页 |
| 1 文献综述 | 第16-34页 |
| ·影响母猪繁殖力的因素 | 第16-17页 |
| ·遗传因素 | 第16页 |
| ·营养因素 | 第16-17页 |
| ·环境因素 | 第17页 |
| ·管理因素 | 第17页 |
| ·疾病因素 | 第17页 |
| ·猪繁殖性状候选基因的研究进展 | 第17-19页 |
| ·雌激素受体基因 | 第18页 |
| ·卵泡刺激素基因β亚基 | 第18-19页 |
| ·催乳素受体基因 | 第19页 |
| ·其他与繁殖性状相关的候选基因的研究情况 | 第19页 |
| ·视黄醇结合蛋白基因的研究进展 | 第19-26页 |
| ·视黄醇结合蛋白基因的结构及染色体定位 | 第20-22页 |
| ·视黄醇结合蛋白基因的作用机理 | 第22-23页 |
| ·视黄醇结合蛋白基因的转录情况和发育性表达 | 第23-25页 |
| ·视黄醇结合蛋白基因与家畜生产性能的关系 | 第25-26页 |
| ·视黄醇结合蛋白基因的临床意义 | 第26页 |
| ·视黄酸受体和视黄素X受体的研究进展 | 第26-32页 |
| ·核受体超家族及其辅调因子的研究进展 | 第26-29页 |
| ·视黄酸受体的研究进展 | 第29-31页 |
| ·视黄酸X受体的研究进展 | 第31-32页 |
| ·视黄酸受体和视黄素X受体对猪繁殖性状的影响 | 第32页 |
| ·甲状腺素运载蛋白的研究进展 | 第32-33页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 2 研究内容 | 第34-108页 |
| 试验一 猪的RBP4基因及RARs、RXRs和TTR基因的转录情况 | 第34-61页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·实验动物 | 第34-35页 |
| ·组织样品 | 第35页 |
| ·药品和酶 | 第35页 |
| ·仪器设备 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-39页 |
| ·总RNA提取 | 第35-36页 |
| ·总RNA质量检测 | 第36页 |
| ·引物设计与合成 | 第36-37页 |
| ·反转录 | 第37-38页 |
| ·PCR扩增体系及反应条件 | 第38页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第38页 |
| ·半定量RT-PCR反应中循环参数的确定 | 第38-39页 |
| ·半定量RT-PCR分析 | 第39页 |
| ·数据分析 | 第39页 |
| ·实验结果 | 第39-54页 |
| ·RBP4基因的时空转录情况 | 第39-41页 |
| ·RARs和RXRs基因的时空转录情况 | 第41-50页 |
| ·TTR基因的时空转录情况 | 第50-51页 |
| ·半定量RT-PCR检测RBP4基因的转录情况 | 第51-54页 |
| ·讨论 | 第54-60页 |
| ·RT-PCR方法的构建 | 第54页 |
| ·不同日龄大白猪的RBP4基因的转录情况 | 第54-55页 |
| ·不同日龄大白猪的RARs基因的转录情况及与RBP4的关系 | 第55-57页 |
| ·不同日龄大白猪RXRs基因的转录情况与及与RBP4的关系 | 第57-59页 |
| ·不同日龄大白猪的TTR基因的转录情况及与RBP4的关系 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 实验二 成纤维细胞系中添加VA诱导RBP4基因及RARs、RXRs和TTR基因转录变化情况研究 | 第61-82页 |
| ·实验材料 | 第61-63页 |
| ·大白猪的成纤维细胞系 | 第61页 |
| ·主要药品及培养皿 | 第61页 |
| ·主要溶液的配制 | 第61-62页 |
| ·主要仪器 | 第62页 |
| ·实验方法 | 第62-63页 |
| ·实验结果 | 第63-78页 |
| ·添加诱导物后细胞生长情况 | 第63-64页 |
| ·PCR扩增循环参数的确定 | 第64-67页 |
| ·添加不同浓度的VA后RBP4基因、RARs、RXRs和TTR基因转录变化情况 | 第67-78页 |
| ·讨论 | 第78-81页 |
| ·VA对猪的繁殖性状的影响 | 第78-79页 |
| ·添加VA后对目的基因诱导转录情况 | 第79-81页 |
| ·小结 | 第81-82页 |
| 试验三 猪血清中视黄醇结合蛋白和维生素A含量的测定与分析 | 第82-90页 |
| ·实验材料 | 第82-84页 |
| ·实验动物 | 第82页 |
| ·实验药品 | 第82页 |
| ·主要仪器设备 | 第82-83页 |
| ·实验方法 | 第83-84页 |
| ·实验结果 | 第84-87页 |
| ·血清中RBP和VA的含量 | 第84页 |
| ·血清中RBP含量和VA含量的相关性分析 | 第84-85页 |
| ·血清中RBP和VA含量的高低与1月龄体重的关系 | 第85-87页 |
| ·讨论 | 第87-89页 |
| ·ELISA技术的特点 | 第87页 |
| ·HPLC技术的特点 | 第87-88页 |
| ·血清中RBP和VA含量的测定及与1月龄体重的关系 | 第88-89页 |
| ·小结 | 第89-90页 |
| 实验四 猪RBP4基因成熟肽在毕赤酵母中的表达 | 第90-108页 |
| ·实验材料 | 第90-92页 |
| ·组织样 | 第90页 |
| ·主要试剂 | 第90-91页 |
| ·常用储备液及缓冲液的配制 | 第91-92页 |
| ·培养基 | 第92页 |
| ·主要仪器设备 | 第92页 |
| ·实验方法 | 第92-98页 |
| ·RNA的提取 | 第92-93页 |
| ·引物的设计与合成 | 第93页 |
| ·猪的RBP4基因成熟肽的cDNA序列扩增 | 第93页 |
| ·PCR产物的克隆测序 | 第93页 |
| ·RBP4基因转录片段的获得 | 第93-94页 |
| ·pPICZαC载体质粒DNA的处理 | 第94页 |
| ·构建转录载体pPICZαC-RBP4 | 第94页 |
| ·转化 | 第94页 |
| ·测序 | 第94页 |
| ·富集质粒 | 第94-95页 |
| ·线性化重组质粒 | 第95页 |
| ·线性化重组质粒的纯化 | 第95页 |
| ·制备酵母感受态 | 第95页 |
| ·线性化重组质粒导入酵母细胞 | 第95-96页 |
| ·酵母基因组提取 | 第96页 |
| ·PCR鉴定 | 第96页 |
| ·Mut表型鉴定 | 第96页 |
| ·甲醇诱导转录 | 第96-97页 |
| ·采用TCA法浓缩上清中的蛋白 | 第97页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第97页 |
| ·转膜 | 第97-98页 |
| ·免疫反应 | 第98页 |
| ·实验结果 | 第98-104页 |
| ·猪RBP4基因的RT-PCR扩增 | 第98-99页 |
| ·重组克隆质粒PMD18-T-RBP4的鉴定 | 第99页 |
| ·猪RBP4基因序列的测定 | 第99页 |
| ·表达载体构建流程图 | 第99页 |
| ·pPICZαC质粒及PCR产物的双酶切和回收 | 第99-100页 |
| ·重组质粒pPICZαC-RBP4的鉴定 | 第100-102页 |
| ·Mut表型鉴定 | 第102页 |
| ·PCR鉴定 | 第102-103页 |
| ·目的蛋白的Western-Blot检测 | 第103-104页 |
| ·讨论 | 第104-107页 |
| ·酵母转录系统的优越性 | 第104页 |
| ·目的基因对系统的适应性 | 第104-105页 |
| ·pPICZαC载体情况 | 第105页 |
| ·重组质粒的构建结果分析 | 第105-106页 |
| ·重组质粒在酵母细胞中的表达 | 第106-107页 |
| ·小结 | 第107-108页 |
| 3 结论 | 第108-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-121页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第121页 |
