摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-27页 |
·霉形体概述 | 第12页 |
·霉形体的细胞生物学特征 | 第12-13页 |
·菌体及菌落形态 | 第12页 |
·运动性 | 第12-13页 |
·细胞结构 | 第13页 |
·营养特征 | 第13页 |
·生态学特征 | 第13页 |
·鸡毒霉形体病的研究 | 第13-21页 |
·病原学 | 第14-15页 |
·流行病学 | 第15-16页 |
·临床病理学 | 第16页 |
·致病机理 | 第16页 |
·免疫机制 | 第16-17页 |
·诊断方法研究 | 第17-18页 |
·治疗与控制 | 第18-20页 |
·建立MG阴性鸡群 | 第20-21页 |
·鸡毒霉形体蛋白的研究 | 第21-24页 |
·鸡毒霉形体膜蛋白的研究 | 第21-23页 |
·关于鸡毒霉形体黏附蛋白的研究 | 第23-24页 |
·单克隆抗体技术及应用 | 第24-27页 |
·单克隆抗体制备的原理 | 第24页 |
·单克隆抗体的应用 | 第24-27页 |
2 研究的目的及意义 | 第27页 |
3 实验材料与方法 | 第27-41页 |
·实验材料 | 第27-31页 |
·主要仪器 | 第27-28页 |
·主要试剂 | 第28页 |
·主要溶液的配制 | 第28-31页 |
·实验动物,细胞及菌株来源 | 第31页 |
·主要方法 | 第31-41页 |
·MG-S_6的复苏、纯化及扩大培养 | 第31页 |
·免疫及包被用抗原的制备 | 第31-32页 |
·抗原的乳化 | 第32页 |
·BALB/c小鼠的免疫 | 第32页 |
·BALB/c小鼠的抗体检测 | 第32-33页 |
·SP2/0骨髓瘤的复苏 | 第33-34页 |
·细胞融合与培养 | 第34-36页 |
·阳性孔的筛选 | 第36-37页 |
·杂交瘤细胞的克隆 | 第37页 |
·小鼠腹水法生产单克隆抗体 | 第37页 |
·细胞的冻存与复苏 | 第37-38页 |
·单抗杂交瘤细胞株培养上清及腹水效价的测定 | 第38页 |
·杂交瘤细胞染色体数的检测 | 第38页 |
·单抗亲和力测定 | 第38-39页 |
·MG-S_6的CCU测定 | 第39页 |
·代谢抑制实验 | 第39-40页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第40页 |
·Western blot | 第40-41页 |
4 实验结果 | 第41-52页 |
·纯化后MG-S_6在FM-4固体培养基上培养时的菌落形态观察 | 第41页 |
·免疫小鼠血清效价的测定 | 第41-44页 |
·最佳包被浓度的选择 | 第41-43页 |
·免疫小鼠血清效价的测定 | 第43-44页 |
·免疫脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞的融合 | 第44-45页 |
·抗杂交瘤细胞株培养上清及腹水效价的测定结果 | 第45页 |
·杂交瘤细胞染色体计数结果 | 第45-47页 |
·抗亲和力测定结果 | 第47-50页 |
·MG-S_6的CCU测定结果 | 第50页 |
·MG-S_6代谢抑制试验结果 | 第50-52页 |
·Western blot免疫印迹结果 | 第52页 |
5 讨论 | 第52-59页 |
·抗原制备 | 第52-53页 |
·动物的免疫 | 第53-54页 |
·小鼠骨髓瘤细胞的培养 | 第54页 |
·细胞融合 | 第54-55页 |
·阳性克隆的筛选 | 第55-56页 |
·杂交瘤细胞的克隆化 | 第56页 |
·单克隆抗体制备过程中污染的控制 | 第56-57页 |
·抗生素的应用 | 第56页 |
·细菌和真菌污染的处理 | 第56-57页 |
·培养细胞支原体污染的检测和处理 | 第57页 |
·MG-S_6的CCU的测定 | 第57页 |
·单抗对MG-S_6的代谢抑制试验 | 第57-58页 |
·SDS-PAGE及Western blot | 第58页 |
·代谢抑制性单抗与MG保护性抗原的关联 | 第58-59页 |
6 小结 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
致谢 | 第66页 |