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鸡毒霉形体代谢抑制性单克隆抗体的研制及初步应用

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表第11-12页
1 文献综述第12-27页
   ·霉形体概述第12页
   ·霉形体的细胞生物学特征第12-13页
     ·菌体及菌落形态第12页
     ·运动性第12-13页
     ·细胞结构第13页
     ·营养特征第13页
     ·生态学特征第13页
   ·鸡毒霉形体病的研究第13-21页
     ·病原学第14-15页
     ·流行病学第15-16页
     ·临床病理学第16页
     ·致病机理第16页
     ·免疫机制第16-17页
     ·诊断方法研究第17-18页
     ·治疗与控制第18-20页
     ·建立MG阴性鸡群第20-21页
   ·鸡毒霉形体蛋白的研究第21-24页
     ·鸡毒霉形体膜蛋白的研究第21-23页
     ·关于鸡毒霉形体黏附蛋白的研究第23-24页
   ·单克隆抗体技术及应用第24-27页
     ·单克隆抗体制备的原理第24页
     ·单克隆抗体的应用第24-27页
2 研究的目的及意义第27页
3 实验材料与方法第27-41页
   ·实验材料第27-31页
     ·主要仪器第27-28页
     ·主要试剂第28页
     ·主要溶液的配制第28-31页
     ·实验动物,细胞及菌株来源第31页
   ·主要方法第31-41页
     ·MG-S_6的复苏、纯化及扩大培养第31页
     ·免疫及包被用抗原的制备第31-32页
     ·抗原的乳化第32页
     ·BALB/c小鼠的免疫第32页
     ·BALB/c小鼠的抗体检测第32-33页
     ·SP2/0骨髓瘤的复苏第33-34页
     ·细胞融合与培养第34-36页
     ·阳性孔的筛选第36-37页
     ·杂交瘤细胞的克隆第37页
     ·小鼠腹水法生产单克隆抗体第37页
     ·细胞的冻存与复苏第37-38页
     ·单抗杂交瘤细胞株培养上清及腹水效价的测定第38页
     ·杂交瘤细胞染色体数的检测第38页
     ·单抗亲和力测定第38-39页
     ·MG-S_6的CCU测定第39页
     ·代谢抑制实验第39-40页
     ·SDS-PAGE电泳第40页
     ·Western blot第40-41页
4 实验结果第41-52页
   ·纯化后MG-S_6在FM-4固体培养基上培养时的菌落形态观察第41页
   ·免疫小鼠血清效价的测定第41-44页
     ·最佳包被浓度的选择第41-43页
     ·免疫小鼠血清效价的测定第43-44页
   ·免疫脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞的融合第44-45页
   ·抗杂交瘤细胞株培养上清及腹水效价的测定结果第45页
   ·杂交瘤细胞染色体计数结果第45-47页
   ·抗亲和力测定结果第47-50页
   ·MG-S_6的CCU测定结果第50页
   ·MG-S_6代谢抑制试验结果第50-52页
   ·Western blot免疫印迹结果第52页
5 讨论第52-59页
   ·抗原制备第52-53页
   ·动物的免疫第53-54页
   ·小鼠骨髓瘤细胞的培养第54页
   ·细胞融合第54-55页
   ·阳性克隆的筛选第55-56页
   ·杂交瘤细胞的克隆化第56页
   ·单克隆抗体制备过程中污染的控制第56-57页
     ·抗生素的应用第56页
     ·细菌和真菌污染的处理第56-57页
     ·培养细胞支原体污染的检测和处理第57页
   ·MG-S_6的CCU的测定第57页
   ·单抗对MG-S_6的代谢抑制试验第57-58页
   ·SDS-PAGE及Western blot第58页
   ·代谢抑制性单抗与MG保护性抗原的关联第58-59页
6 小结第59-60页
参考文献第60-66页
致谢第66页

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