摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
引言 | 第11-13页 |
上篇 文献综述 | 第13-35页 |
第一章 植物病害植物病原细菌的检测技术研究进展 | 第13-24页 |
1.传统检测方法 | 第13页 |
2.免疫学检测方法 | 第13-16页 |
·酶联免疫吸附测定(EnzymeLingkedImmunosorbentAssay,ELISA) | 第14页 |
·直接琼脂双扩散(DirectDoubleDiffusion,DDD) | 第14页 |
·免疫放射分析法(ImmunoradiometricAssay,IRMA) | 第14页 |
·免疫荧光分析法(Immunofluorescence,IF) | 第14-15页 |
·免疫荧光菌落染色(ImmunofluoresenceColonyStaining,IFC) | 第15页 |
·免疫吸附免疫荧光(ImmunosorbentImmunofluorescene,ISIF) | 第15页 |
·免疫分离法(Immuno-isolation,IIS) | 第15页 |
·免疫亲和分离(ImmunoadsorptionIsolation,IAI) | 第15-16页 |
3.分子生物学检测方法 | 第16-24页 |
·核酸探针杂交技术及聚合酶链式反应(PCR)技术 | 第16-20页 |
·免疫学和PCR技术相结合的检测方法 | 第20页 |
·实时荧光定量PCR(Real-timeQuantitativePCR)检测技术 | 第20-23页 |
·其它PCR检测方法 | 第23-24页 |
第二章 植物病原细菌遗传多样性的分析方法 | 第24-30页 |
1.RAPD基因组指纹技术 | 第24-25页 |
2.限制性酶切片段长度多态性分析(restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP) | 第25-26页 |
3.扩增片段长度多样性(amplifiedfragmentlengthpolymorphism,AFLP)AFLP技术 | 第26-27页 |
4.rep-PCR技术 | 第27-28页 |
5.扩增核糖体DNA限制性酶切分析(amplifiedribosomalDNArestrictionanalysis,ARDRA);ITS图谱分析方法;tDNA-PCR | 第28-30页 |
第三章 哈密瓜果斑病菌的危害、生物学和控制 | 第30-35页 |
1.寄主范围与分布 | 第30页 |
2.危害与症状特点: | 第30-32页 |
3.防治 | 第32-34页 |
·加强进口检疫,杜绝带菌种子进入我国和传播蔓延 | 第32页 |
·合理的灌溉方式 | 第32-33页 |
·选育和种植抗病品种 | 第33页 |
·药剂防治 | 第33-34页 |
4.研究现状 | 第34-35页 |
下篇 研究内容 | 第35-67页 |
第一章 哈密瓜细菌性果斑病菌检测技术研究 | 第36-50页 |
1.材料与方法 | 第37-45页 |
·供试菌株 | 第37-40页 |
·基因组DNA的提取和菌体的制备 | 第40-42页 |
·hrpB_2基因的扩增 | 第42-43页 |
·大肠杆菌热激感受态的制备和转化 | 第43-44页 |
·测序 | 第44页 |
·哈密瓜果斑病菌专一性引物的设计、合成、检测 | 第44页 |
·果斑菌菌体PCR | 第44页 |
·模拟种子带菌菌体PCR检测 | 第44-45页 |
·对市场哈密瓜种子的检测 | 第45页 |
2.结果 | 第45-49页 |
·果斑病菌hrpB_2部分基因的序列分析 | 第45页 |
·哈密瓜果斑病菌引物专一性测定 | 第45-47页 |
·哈密瓜果斑病菌菌体PCR结果 | 第47页 |
·模拟种子带菌菌体PCR检测结果 | 第47页 |
·对市场哈密瓜种子的检测 | 第47-49页 |
3.讨论 | 第49-50页 |
第二章 哈密瓜细菌果斑病菌的遗传多样性分析 | 第50-67页 |
1.材料与方法 | 第51-53页 |
·供试菌株及培养条件 | 第51-53页 |
·DNA提取和纯化 | 第53页 |
·引物序列及合成 | 第53页 |
·PCR扩增 | 第53页 |
·扩增产物的检测和分析 | 第53页 |
2.结果 | 第53-58页 |
3.讨论 | 第58-67页 |
附录一 第四章 风信子黄腐病菌检测技术研究 | 第67-76页 |
1.材料和方法 | 第68-71页 |
·菌株及样品 | 第68页 |
·实验材料 | 第68页 |
·特异性引物的设计 | 第68-70页 |
·PCR检测方法 | 第70页 |
·抗血清的制备 | 第70页 |
·间接免疫荧光染色技术 | 第70-71页 |
·人工接种样品的检测 | 第71页 |
2 结果 | 第71-75页 |
·PCR反应 | 第71-72页 |
·检测的灵敏度 | 第72-73页 |
·人工接种样品的PCR检测 | 第73页 |
·风信子黄腐病菌的免疫荧光检测的专化性和灵敏度检测 | 第73-74页 |
·人工接种样品的免疫荧光检测 | 第74-75页 |
3.结论与讨论 | 第75-76页 |
附录二 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-87页 |
致谢 | 第87页 |