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哈密瓜细菌性果斑病菌的分子检测及群体遗传分析

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
引言第11-13页
上篇 文献综述第13-35页
 第一章 植物病害植物病原细菌的检测技术研究进展第13-24页
  1.传统检测方法第13页
  2.免疫学检测方法第13-16页
   ·酶联免疫吸附测定(EnzymeLingkedImmunosorbentAssay,ELISA)第14页
   ·直接琼脂双扩散(DirectDoubleDiffusion,DDD)第14页
   ·免疫放射分析法(ImmunoradiometricAssay,IRMA)第14页
   ·免疫荧光分析法(Immunofluorescence,IF)第14-15页
   ·免疫荧光菌落染色(ImmunofluoresenceColonyStaining,IFC)第15页
   ·免疫吸附免疫荧光(ImmunosorbentImmunofluorescene,ISIF)第15页
   ·免疫分离法(Immuno-isolation,IIS)第15页
   ·免疫亲和分离(ImmunoadsorptionIsolation,IAI)第15-16页
  3.分子生物学检测方法第16-24页
   ·核酸探针杂交技术及聚合酶链式反应(PCR)技术第16-20页
   ·免疫学和PCR技术相结合的检测方法第20页
   ·实时荧光定量PCR(Real-timeQuantitativePCR)检测技术第20-23页
   ·其它PCR检测方法第23-24页
 第二章 植物病原细菌遗传多样性的分析方法第24-30页
  1.RAPD基因组指纹技术第24-25页
  2.限制性酶切片段长度多态性分析(restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP)第25-26页
  3.扩增片段长度多样性(amplifiedfragmentlengthpolymorphism,AFLP)AFLP技术第26-27页
  4.rep-PCR技术第27-28页
  5.扩增核糖体DNA限制性酶切分析(amplifiedribosomalDNArestrictionanalysis,ARDRA);ITS图谱分析方法;tDNA-PCR第28-30页
 第三章 哈密瓜果斑病菌的危害、生物学和控制第30-35页
  1.寄主范围与分布第30页
  2.危害与症状特点:第30-32页
  3.防治第32-34页
   ·加强进口检疫,杜绝带菌种子进入我国和传播蔓延第32页
   ·合理的灌溉方式第32-33页
   ·选育和种植抗病品种第33页
   ·药剂防治第33-34页
  4.研究现状第34-35页
下篇 研究内容第35-67页
 第一章 哈密瓜细菌性果斑病菌检测技术研究第36-50页
  1.材料与方法第37-45页
   ·供试菌株第37-40页
   ·基因组DNA的提取和菌体的制备第40-42页
   ·hrpB_2基因的扩增第42-43页
   ·大肠杆菌热激感受态的制备和转化第43-44页
   ·测序第44页
   ·哈密瓜果斑病菌专一性引物的设计、合成、检测第44页
   ·果斑菌菌体PCR第44页
   ·模拟种子带菌菌体PCR检测第44-45页
   ·对市场哈密瓜种子的检测第45页
  2.结果第45-49页
   ·果斑病菌hrpB_2部分基因的序列分析第45页
   ·哈密瓜果斑病菌引物专一性测定第45-47页
   ·哈密瓜果斑病菌菌体PCR结果第47页
   ·模拟种子带菌菌体PCR检测结果第47页
   ·对市场哈密瓜种子的检测第47-49页
  3.讨论第49-50页
 第二章 哈密瓜细菌果斑病菌的遗传多样性分析第50-67页
  1.材料与方法第51-53页
   ·供试菌株及培养条件第51-53页
   ·DNA提取和纯化第53页
   ·引物序列及合成第53页
   ·PCR扩增第53页
   ·扩增产物的检测和分析第53页
  2.结果第53-58页
  3.讨论第58-67页
附录一 第四章 风信子黄腐病菌检测技术研究第67-76页
 1.材料和方法第68-71页
   ·菌株及样品第68页
   ·实验材料第68页
   ·特异性引物的设计第68-70页
   ·PCR检测方法第70页
   ·抗血清的制备第70页
   ·间接免疫荧光染色技术第70-71页
   ·人工接种样品的检测第71页
 2 结果第71-75页
   ·PCR反应第71-72页
   ·检测的灵敏度第72-73页
   ·人工接种样品的PCR检测第73页
   ·风信子黄腐病菌的免疫荧光检测的专化性和灵敏度检测第73-74页
   ·人工接种样品的免疫荧光检测第74-75页
 3.结论与讨论第75-76页
附录二第76-77页
参考文献第77-87页
致谢第87页

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