中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-12页 |
简写及缩略语 | 第12-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-42页 |
1. 动物细胞的体外培养的研究进展 | 第13-16页 |
·动物细胞的体外培养研究简史 | 第13-14页 |
·动物细胞体外生长的特点 | 第14-16页 |
2. 影响动物细胞体外培养的主要因素 | 第16-18页 |
·基础培养液对细胞生长的影响 | 第16页 |
·血清质量与浓度对细胞生长的影响 | 第16-17页 |
·其他添加成分 | 第17-18页 |
·有机物的补充 | 第17页 |
·生长因子 | 第17页 |
·促贴壁粘附剂 | 第17页 |
·抗生素 | 第17-18页 |
·pH值对细胞生长的影响 | 第18页 |
·温度对细胞生长的影响 | 第18页 |
3. 胚胎成纤维细胞的体外培养 | 第18-28页 |
·胚胎成纤维细胞作为饲养层细胞的研究动态 | 第19页 |
·胚胎成纤维细胞与细胞因子 | 第19-22页 |
·白血病抑制因子 | 第19-20页 |
·成纤维细胞生长因子 | 第20-21页 |
·胰岛素样生长因子 | 第21-22页 |
·表皮生长因子 | 第22页 |
·胚胎成纤维细胞体外培养的主要技术环节 | 第22-26页 |
·原代细胞的分离培养 | 第22-23页 |
·细胞的传代 | 第23-24页 |
·细胞的冷冻与解冻 | 第24-26页 |
·细胞的污染问题 | 第26-28页 |
·污染物的种类及检测 | 第26-27页 |
·细胞污染的预防 | 第27-28页 |
4. 体外培养的小鼠胚胎成纤维细胞生长特性 | 第28-35页 |
·胚胎成纤维细胞的形态学 | 第28-29页 |
·胚胎成纤维细胞的活力检测 | 第29-31页 |
·细胞活力检测方法 | 第29-30页 |
·MTT法简介 | 第30-31页 |
·胚胎成纤维细胞的生长曲线 | 第31-32页 |
·胚胎成纤维细胞细胞骨架观察 | 第32-35页 |
·细胞骨架的基本成分及功能 | 第32-34页 |
·细胞骨架的观察方法 | 第34-35页 |
参考文献 | 第35-42页 |
第二部分 试验研究 | 第42-70页 |
引言 | 第42-43页 |
1. 材料与方法 | 第43-51页 |
·材料 | 第44-47页 |
·实验动物及细胞准备 | 第44页 |
·主要仪器设备 | 第44-45页 |
·主要试剂和药品 | 第45-46页 |
·主要试剂的配制 | 第46-47页 |
·方法 | 第47-50页 |
·STO细胞的解冻 | 第47-48页 |
·MEF细胞的分离培养 | 第48页 |
·胚胎成纤维细胞的传代培养 | 第48页 |
·胚胎成纤维细胞的冷冻 | 第48-49页 |
·台盼兰染色计数 | 第49页 |
·四唑盐(MTT)比色法测定细胞活力 | 第49页 |
·小鼠胚胎成纤维细胞的免疫荧光染色 | 第49-50页 |
·实验设计 | 第50-51页 |
·不同冷冻保存方法对小鼠胚胎成纤维细胞的影响 | 第50页 |
·连续传代对小鼠胚胎成纤维细胞的影响 | 第50-51页 |
·数据分析 | 第51页 |
2. 结果 | 第51-62页 |
·MEF细胞解冻后的结果 | 第51-52页 |
·STO细胞解冻后的回收率与存活率 | 第52-53页 |
·连续传代过程中细胞生长情况的观察比较 | 第53-54页 |
·连续传代对胚胎成纤维细胞细胞活力以及生长曲线的影响 | 第54-57页 |
·连续传代对胚胎成纤维细胞的细胞骨架造成的影响 | 第57-62页 |
3. 讨论 | 第62-66页 |
·小鼠胚胎日龄与胚胎成纤维细胞的关系 | 第62页 |
·冷冻速率对成纤维细胞冷冻效果的影响 | 第62-63页 |
·小鼠胚胎成纤维细胞衰老过程中形态学上的变化 | 第63页 |
·细胞活力在传代过程中的变化 | 第63-64页 |
·细胞骨架在传代过程中的变化 | 第64-66页 |
全文总结 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-70页 |
致谢 | 第70页 |