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小鼠胚胎成纤维细胞体外培养与生长特性的研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-12页
简写及缩略语第12-13页
第一部分 文献综述第13-42页
 1. 动物细胞的体外培养的研究进展第13-16页
   ·动物细胞的体外培养研究简史第13-14页
   ·动物细胞体外生长的特点第14-16页
 2. 影响动物细胞体外培养的主要因素第16-18页
   ·基础培养液对细胞生长的影响第16页
   ·血清质量与浓度对细胞生长的影响第16-17页
   ·其他添加成分第17-18页
     ·有机物的补充第17页
     ·生长因子第17页
     ·促贴壁粘附剂第17页
     ·抗生素第17-18页
   ·pH值对细胞生长的影响第18页
   ·温度对细胞生长的影响第18页
 3. 胚胎成纤维细胞的体外培养第18-28页
   ·胚胎成纤维细胞作为饲养层细胞的研究动态第19页
   ·胚胎成纤维细胞与细胞因子第19-22页
     ·白血病抑制因子第19-20页
     ·成纤维细胞生长因子第20-21页
     ·胰岛素样生长因子第21-22页
     ·表皮生长因子第22页
   ·胚胎成纤维细胞体外培养的主要技术环节第22-26页
     ·原代细胞的分离培养第22-23页
     ·细胞的传代第23-24页
     ·细胞的冷冻与解冻第24-26页
   ·细胞的污染问题第26-28页
     ·污染物的种类及检测第26-27页
     ·细胞污染的预防第27-28页
 4. 体外培养的小鼠胚胎成纤维细胞生长特性第28-35页
   ·胚胎成纤维细胞的形态学第28-29页
   ·胚胎成纤维细胞的活力检测第29-31页
     ·细胞活力检测方法第29-30页
     ·MTT法简介第30-31页
   ·胚胎成纤维细胞的生长曲线第31-32页
   ·胚胎成纤维细胞细胞骨架观察第32-35页
     ·细胞骨架的基本成分及功能第32-34页
     ·细胞骨架的观察方法第34-35页
 参考文献第35-42页
第二部分 试验研究第42-70页
 引言第42-43页
 1. 材料与方法第43-51页
   ·材料第44-47页
     ·实验动物及细胞准备第44页
     ·主要仪器设备第44-45页
     ·主要试剂和药品第45-46页
     ·主要试剂的配制第46-47页
   ·方法第47-50页
     ·STO细胞的解冻第47-48页
     ·MEF细胞的分离培养第48页
     ·胚胎成纤维细胞的传代培养第48页
     ·胚胎成纤维细胞的冷冻第48-49页
     ·台盼兰染色计数第49页
     ·四唑盐(MTT)比色法测定细胞活力第49页
     ·小鼠胚胎成纤维细胞的免疫荧光染色第49-50页
   ·实验设计第50-51页
     ·不同冷冻保存方法对小鼠胚胎成纤维细胞的影响第50页
     ·连续传代对小鼠胚胎成纤维细胞的影响第50-51页
   ·数据分析第51页
 2. 结果第51-62页
   ·MEF细胞解冻后的结果第51-52页
   ·STO细胞解冻后的回收率与存活率第52-53页
   ·连续传代过程中细胞生长情况的观察比较第53-54页
   ·连续传代对胚胎成纤维细胞细胞活力以及生长曲线的影响第54-57页
   ·连续传代对胚胎成纤维细胞的细胞骨架造成的影响第57-62页
 3. 讨论第62-66页
   ·小鼠胚胎日龄与胚胎成纤维细胞的关系第62页
   ·冷冻速率对成纤维细胞冷冻效果的影响第62-63页
   ·小鼠胚胎成纤维细胞衰老过程中形态学上的变化第63页
   ·细胞活力在传代过程中的变化第63-64页
   ·细胞骨架在传代过程中的变化第64-66页
 全文总结第66-67页
 参考文献第67-70页
致谢第70页

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