| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-26页 |
| ·维生素B_(12)简介 | 第10-15页 |
| ·维生素B_(12)的分子结构 | 第10-11页 |
| ·维生素B_(12)的生理作用 | 第11-12页 |
| ·维生素B_(12)的吸收代谢 | 第12-13页 |
| ·维生素B_(12)的应用与前景 | 第13-15页 |
| ·维生素B_(12)的发现过程与来源 | 第15-16页 |
| ·维生素B_(12)的发现过程 | 第15页 |
| ·维生素B_(12)的来源 | 第15-16页 |
| ·维生素B_(12)的生产菌种及发酵生产 | 第16-19页 |
| ·维生素B_(12)的生产菌种 | 第16-17页 |
| ·维生素B_(12)发酵生产 | 第17-19页 |
| ·维生素B_(12)的生物合成途径 | 第19-20页 |
| ·费氏丙酸杆菌维生素B_(12)的生物合成 | 第20-23页 |
| ·维生素B_(12)厌氧合成过程 | 第21-23页 |
| ·维生素B_(12)生物合成相关基因 | 第23页 |
| ·国内外的研究进展 | 第23-24页 |
| ·维生素B_(12)发酵生产的发展方向 | 第24页 |
| ·本论文的研究意义及主要工作 | 第24-26页 |
| 2 遗传互补法筛选P. freudenreichii未知的CobIII领域的基因 | 第26-36页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·材料和方法 | 第26-31页 |
| ·实验材料和仪器 | 第26-29页 |
| ·S. typhimurium感受态细胞的制备和检测 | 第29页 |
| ·遗传互补法筛选P. freudenreichii的CobIII领域的基因 | 第29-31页 |
| ·同源性检索 | 第31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-36页 |
| ·遗传互补法筛选P. freudenreichii CobIII领域的基因 | 第31页 |
| ·P4的碱基序列分析 | 第31-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 3 P. freudenreichii cobD上游基因的克隆和解析 | 第36-58页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·材料与方法 | 第36-46页 |
| ·实验材料与仪器 | 第36-39页 |
| ·准备工作 | 第39-40页 |
| ·丙酸菌染色体DNA的提取 | 第40-41页 |
| ·使用Cassette的LA PCR扩增反应 | 第41-42页 |
| ·目的片段的回收纯化和连接 | 第42-43页 |
| ·大肠杆菌受体细胞的制备 | 第43-44页 |
| ·蓝白斑筛选 | 第44页 |
| ·质粒的提取和酶切检测 | 第44-46页 |
| ·实验结果与讨论 | 第46-58页 |
| ·使用Cassette的LA PCR技术克隆cobD的上游基因 | 第46-49页 |
| ·碱基序列分析 | 第49-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 附录 A P4的碱基序列 | 第63-66页 |
| 附录 B P3的碱基序列 | 第66-68页 |
| 附录 C P7的碱基序列 | 第68-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
