摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-13页 |
第1章 引言 | 第13-29页 |
·研究背景 | 第13-14页 |
·纤维素的降解 | 第14页 |
·产纤维素酶的微生物 | 第14-17页 |
·粗壮脉纹孢菌产纤维素酶的研究进展 | 第16-17页 |
·产纤维素酶菌株的诱变选育 | 第17-20页 |
·诱变作用机理 | 第18-19页 |
·剂量的选择 | 第19页 |
·影响诱变效果的因素 | 第19页 |
·高产突变菌株的筛选 | 第19-20页 |
·纤维素酶菌种选育情况 | 第20页 |
·纤维素酶的酶系组成、作用机理及分子结构 | 第20-24页 |
·纤维素酶的组成 | 第20-21页 |
·纤维素酶的作用机理 | 第21-22页 |
·纤维素酶的结构与作用机制 | 第22-24页 |
·纤维素酶活力的测定方法 | 第24-27页 |
·纤维素酶的测定方法 | 第24-26页 |
·测定原酶液中单一组分纤维素酶活力的方法简介 | 第26-27页 |
·本实验研究的意义及主要内容 | 第27-29页 |
·研究意义 | 第27页 |
·主要研究内容 | 第27-29页 |
第2章 优良出发株的分离、纯化与鉴定 | 第29-38页 |
·材料与方法 | 第29-34页 |
·主要试剂 | 第29页 |
·主要仪器 | 第29-30页 |
·培养基 | 第30页 |
·采样 | 第30页 |
·稀释涂布分离和简易单孢子分离 | 第30页 |
·平板筛选 | 第30-31页 |
·摇瓶培养 | 第31页 |
·测定方法 | 第31-32页 |
·菌种形态特征鉴定 | 第32页 |
·显微镜下形态特征观察 | 第32-33页 |
·霉菌18Sr DNA提取 | 第33页 |
·18SrDNA的PCR扩增 | 第33-34页 |
·PCR产物序列测定及序列分析 | 第34页 |
·结果与分析 | 第34-37页 |
·葡萄糖工作曲线 | 第34页 |
·分离、纯化及筛选结果 | 第34-35页 |
·菌株NC-1-6的形态观察 | 第35页 |
·纤维素分解菌NC-1-6 18SrDNA PCR扩增和序列分析 | 第35-37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
·菌株的分离纯化 | 第37页 |
·同种不同株间纤维素酶酶活力的差异性 | 第37页 |
·菌种鉴定 | 第37-38页 |
第3章 菌株NC-1-6产酶和生长过程中的影响因素研究 | 第38-49页 |
·材料与方法 | 第38-41页 |
·主要试剂与原料 | 第38页 |
·菌种 | 第38页 |
·培养基 | 第38页 |
·主要仪器 | 第38-39页 |
·酶活测定方法 | 第39页 |
·蛋白测定方法 | 第39-40页 |
·稻草降解率的测定及计算方法 | 第40页 |
·不同稻草浓度对菌体生长和纤维素酶活力的影响 | 第40页 |
·不同初始pH值对菌体生长和纤维素酶活力的影响 | 第40页 |
·不同发酵温度对菌体生长和纤维素酶活力的影响 | 第40-41页 |
·结果与分析 | 第41-47页 |
·牛血清白蛋白工作曲线 | 第41页 |
·不同稻草浓度对菌体生长和纤维素酶活力的影响 | 第41-43页 |
·不同初始pH值对菌体生长和纤维素酶活力的影响 | 第43-45页 |
·不同温度对菌体生长和纤维素酶活力的影响 | 第45-47页 |
·讨论 | 第47-49页 |
·温度对粗壮脉纹孢菌产酶的影响 | 第47页 |
·粗壮脉纹孢菌对纤维的降解利用 | 第47页 |
·稻草浓度对产酶的影响 | 第47-48页 |
·菌体生长与产酶的关系 | 第48-49页 |
第4章 菌株NC-1-6的诱变选育 | 第49-65页 |
·材料与方法 | 第49-53页 |
·主要试剂与原料 | 第49页 |
·菌种 | 第49页 |
·培养基 | 第49-50页 |
·主要仪器 | 第50页 |
·斜面菌种的活化 | 第50页 |
·孢子出芽实验 | 第50页 |
·孢子悬液制备 | 第50-51页 |
·紫外诱变 | 第51页 |
·硫酸二乙酯诱变 | 第51页 |
·复合诱变 | 第51-52页 |
·二次平板初筛 | 第52页 |
·一次复筛 | 第52页 |
·分离纯化 | 第52页 |
·二次复筛 | 第52页 |
·酶活力测定方法 | 第52-53页 |
·突变株的传代稳定性 | 第53页 |
·突变株60D7Z53与出发株的比较 | 第53页 |
·结果与分析 | 第53-63页 |
·孢子出芽实验 | 第53-54页 |
·紫外诱变、DES诱变及复合诱变的致死率和正变率 | 第54-55页 |
·第二次平板初筛 | 第55-56页 |
·第一次复筛 | 第56-58页 |
·酶活力对数与HC的线性分析 | 第58-59页 |
·第二次复筛 | 第59-60页 |
·突变株传代稳定性 | 第60-62页 |
·突变株60D7Z53与出发株比较 | 第62-63页 |
·讨论 | 第63-65页 |
·酶活力对数与HC值间的线性关系分析 | 第63-64页 |
·单因素和复合因素的诱变机理与诱变效果 | 第64页 |
·突变株在筛选过程中衰退 | 第64-65页 |
第5章 突变株60D7Z53产酶培养基和产酶条件的优化 | 第65-82页 |
·材料与方法 | 第65-69页 |
·主要试剂与原料 | 第65页 |
·菌种 | 第65页 |
·培养基 | 第65-66页 |
·主要仪器 | 第66页 |
·斜面菌种的活化 | 第66页 |
·孢子悬液制备 | 第66页 |
·培养基组成对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响 | 第66-67页 |
·培养条件对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响 | 第67-69页 |
·测定方法 | 第69页 |
·结果与分析 | 第69-77页 |
·培养基组成对突变株60D7Z53所产纤维素酶系各酶活力的影响 | 第69-73页 |
·培养条件对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响 | 第73-77页 |
·讨论 | 第77-82页 |
·突变株60D7Z53液体发酵产酶条件的优化 | 第77页 |
·碳源对突变株60D7Z53所产纤维素酶系各酶活力的影响 | 第77-78页 |
·氮源对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响 | 第78-79页 |
·碳氮比对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响 | 第79页 |
·添加Mandels营养盐对60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响 | 第79页 |
·添加Tween80对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响 | 第79-80页 |
·培养温度对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响 | 第80页 |
·初始pH值对突变株60D7Z53所产纤维素酶酶活力的影响 | 第80页 |
·摇床转速对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响 | 第80-81页 |
·种龄和接种量对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响 | 第81-82页 |
第6章 结论及展望 | 第82-84页 |
·结论 | 第82-83页 |
·优良出发株的分离、纯化与鉴定 | 第82页 |
·菌株NC-1-6产酶和生长过程中的影响因素研究 | 第82页 |
·菌株NC-1-6的诱变选育 | 第82页 |
·突变株60D7Z53产酶培养基和产酶条件的优化 | 第82-83页 |
·进一步的工作方向 | 第83-84页 |
创新之处 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-91页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第91-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
附录 | 第93-104页 |