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高产纤维素酶菌株的分离鉴定、诱变选育及产酶条件的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-13页
第1章 引言第13-29页
   ·研究背景第13-14页
   ·纤维素的降解第14页
   ·产纤维素酶的微生物第14-17页
     ·粗壮脉纹孢菌产纤维素酶的研究进展第16-17页
   ·产纤维素酶菌株的诱变选育第17-20页
     ·诱变作用机理第18-19页
     ·剂量的选择第19页
     ·影响诱变效果的因素第19页
     ·高产突变菌株的筛选第19-20页
     ·纤维素酶菌种选育情况第20页
   ·纤维素酶的酶系组成、作用机理及分子结构第20-24页
     ·纤维素酶的组成第20-21页
     ·纤维素酶的作用机理第21-22页
     ·纤维素酶的结构与作用机制第22-24页
   ·纤维素酶活力的测定方法第24-27页
     ·纤维素酶的测定方法第24-26页
     ·测定原酶液中单一组分纤维素酶活力的方法简介第26-27页
   ·本实验研究的意义及主要内容第27-29页
     ·研究意义第27页
     ·主要研究内容第27-29页
第2章 优良出发株的分离、纯化与鉴定第29-38页
   ·材料与方法第29-34页
     ·主要试剂第29页
     ·主要仪器第29-30页
     ·培养基第30页
     ·采样第30页
     ·稀释涂布分离和简易单孢子分离第30页
     ·平板筛选第30-31页
     ·摇瓶培养第31页
     ·测定方法第31-32页
     ·菌种形态特征鉴定第32页
     ·显微镜下形态特征观察第32-33页
     ·霉菌18Sr DNA提取第33页
     ·18SrDNA的PCR扩增第33-34页
     ·PCR产物序列测定及序列分析第34页
   ·结果与分析第34-37页
     ·葡萄糖工作曲线第34页
     ·分离、纯化及筛选结果第34-35页
     ·菌株NC-1-6的形态观察第35页
     ·纤维素分解菌NC-1-6 18SrDNA PCR扩增和序列分析第35-37页
   ·讨论第37-38页
     ·菌株的分离纯化第37页
     ·同种不同株间纤维素酶酶活力的差异性第37页
     ·菌种鉴定第37-38页
第3章 菌株NC-1-6产酶和生长过程中的影响因素研究第38-49页
   ·材料与方法第38-41页
     ·主要试剂与原料第38页
     ·菌种第38页
     ·培养基第38页
     ·主要仪器第38-39页
     ·酶活测定方法第39页
     ·蛋白测定方法第39-40页
     ·稻草降解率的测定及计算方法第40页
     ·不同稻草浓度对菌体生长和纤维素酶活力的影响第40页
     ·不同初始pH值对菌体生长和纤维素酶活力的影响第40页
     ·不同发酵温度对菌体生长和纤维素酶活力的影响第40-41页
   ·结果与分析第41-47页
     ·牛血清白蛋白工作曲线第41页
     ·不同稻草浓度对菌体生长和纤维素酶活力的影响第41-43页
     ·不同初始pH值对菌体生长和纤维素酶活力的影响第43-45页
     ·不同温度对菌体生长和纤维素酶活力的影响第45-47页
   ·讨论第47-49页
     ·温度对粗壮脉纹孢菌产酶的影响第47页
     ·粗壮脉纹孢菌对纤维的降解利用第47页
     ·稻草浓度对产酶的影响第47-48页
     ·菌体生长与产酶的关系第48-49页
第4章 菌株NC-1-6的诱变选育第49-65页
   ·材料与方法第49-53页
     ·主要试剂与原料第49页
     ·菌种第49页
     ·培养基第49-50页
     ·主要仪器第50页
     ·斜面菌种的活化第50页
     ·孢子出芽实验第50页
     ·孢子悬液制备第50-51页
     ·紫外诱变第51页
     ·硫酸二乙酯诱变第51页
     ·复合诱变第51-52页
     ·二次平板初筛第52页
     ·一次复筛第52页
     ·分离纯化第52页
     ·二次复筛第52页
     ·酶活力测定方法第52-53页
     ·突变株的传代稳定性第53页
     ·突变株60D7Z53与出发株的比较第53页
   ·结果与分析第53-63页
     ·孢子出芽实验第53-54页
     ·紫外诱变、DES诱变及复合诱变的致死率和正变率第54-55页
     ·第二次平板初筛第55-56页
     ·第一次复筛第56-58页
     ·酶活力对数与HC的线性分析第58-59页
     ·第二次复筛第59-60页
     ·突变株传代稳定性第60-62页
     ·突变株60D7Z53与出发株比较第62-63页
   ·讨论第63-65页
     ·酶活力对数与HC值间的线性关系分析第63-64页
     ·单因素和复合因素的诱变机理与诱变效果第64页
     ·突变株在筛选过程中衰退第64-65页
第5章 突变株60D7Z53产酶培养基和产酶条件的优化第65-82页
   ·材料与方法第65-69页
     ·主要试剂与原料第65页
     ·菌种第65页
     ·培养基第65-66页
     ·主要仪器第66页
     ·斜面菌种的活化第66页
     ·孢子悬液制备第66页
     ·培养基组成对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响第66-67页
     ·培养条件对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响第67-69页
     ·测定方法第69页
   ·结果与分析第69-77页
     ·培养基组成对突变株60D7Z53所产纤维素酶系各酶活力的影响第69-73页
     ·培养条件对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响第73-77页
   ·讨论第77-82页
     ·突变株60D7Z53液体发酵产酶条件的优化第77页
     ·碳源对突变株60D7Z53所产纤维素酶系各酶活力的影响第77-78页
     ·氮源对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响第78-79页
     ·碳氮比对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响第79页
     ·添加Mandels营养盐对60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响第79页
     ·添加Tween80对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响第79-80页
     ·培养温度对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响第80页
     ·初始pH值对突变株60D7Z53所产纤维素酶酶活力的影响第80页
     ·摇床转速对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响第80-81页
     ·种龄和接种量对突变株60D7Z53所产纤维素酶系酶活力的影响第81-82页
第6章 结论及展望第82-84页
   ·结论第82-83页
     ·优良出发株的分离、纯化与鉴定第82页
     ·菌株NC-1-6产酶和生长过程中的影响因素研究第82页
     ·菌株NC-1-6的诱变选育第82页
     ·突变株60D7Z53产酶培养基和产酶条件的优化第82-83页
   ·进一步的工作方向第83-84页
创新之处第84-85页
参考文献第85-91页
攻读学位期间的研究成果第91-92页
致谢第92-93页
附录第93-104页

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