| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-18页 |
| 1 腺病毒治疗载体 | 第10-13页 |
| ·腺病毒的一般生物学特性 | 第11页 |
| ·腺病毒的结构与功能 | 第11-12页 |
| ·腺病毒载体的发展 | 第12-13页 |
| 2 腺病毒载体的靶向性改造 | 第13-16页 |
| ·感染水平上的靶向 | 第13-15页 |
| ·转录水平上的靶向 | 第15-16页 |
| 3 腺病毒载体临床应用 | 第16-18页 |
| 第二章 Ad-5 knob 蛋白的基因工程表达 | 第18-31页 |
| 1 材料和方法 | 第18-25页 |
| ·材料 | 第18-20页 |
| ·方法 | 第20-25页 |
| ·重组原核表达载体的pET-28a/knob 构建及鉴定 | 第20-23页 |
| ·knob蛋白的原核表达 | 第23-25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-29页 |
| ·knob 蛋白表达载体的构建 | 第25-27页 |
| ·knob 蛋白的表达、纯化 | 第27-29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 knob 单克隆抗体的构建及初步鉴定 | 第31-41页 |
| 1 材料和方法 | 第31-37页 |
| ·材料 | 第31-33页 |
| ·方法 | 第33-37页 |
| ·动物免疫 | 第33页 |
| ·制备单克隆抗体细胞株 | 第33-34页 |
| ·克隆化选择阳性克隆 | 第34-35页 |
| ·间接ELISA | 第35页 |
| ·阳性克隆的扩大培养及冻存 | 第35页 |
| ·腹水制备及抗体效价测定 | 第35页 |
| ·腹水的纯化 | 第35-36页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第36页 |
| ·腹水效价的测定 | 第36页 |
| ·采用Sigma鼠单克隆抗体分型试剂盒检测 | 第36页 |
| ·克隆抗体的特异性鉴定 | 第36-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-39页 |
| ·鼠抗knob 杂交瘤细胞株的建立 | 第37页 |
| ·单克隆抗体的效价 | 第37-38页 |
| ·单克隆抗体蛋白浓度的测定 | 第38页 |
| ·单克隆抗体亚型的测定 | 第38页 |
| ·单克隆抗体活性的初步鉴定 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 柯萨奇腺病毒受体（CAR）在昆虫细胞中的表达及初步鉴定 | 第41-57页 |
| 1 材料和方法 | 第41-48页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-48页 |
| ·pENTR/D-Top-CAR 质粒的构建 | 第42-45页 |
| ·通过Gateway LR 重组反应构建杆状病毒表达质粒 | 第45-46页 |
| ·杆状病毒转染Sf9 细胞 | 第46页 |
| ·病毒液的扩增 | 第46-47页 |
| ·菌斑实验 | 第47-48页 |
| ·表达和分析重组蛋白 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-55页 |
| ·pENTR/D-TOPO-CAR 质粒的构建 | 第48-51页 |
| ·LR 重组反应构建含ex-CAR 基因的BaculoDirctTM Linear DNA | 第51-52页 |
| ·ex-CAR 重组蛋白的表达及初步鉴定 | 第52-55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第61页 |
