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固定化脂肪酶拆分手性化合物

第一章 文献综述第1-30页
   ·引言第13-15页
   ·脂肪酶的分离与纯化第15-20页
     ·脂肪酶简介第15-16页
     ·脂肪酶的纯化方法第16-18页
     ·脂肪酶纯化的研究进展第18-20页
   ·脂肪酶的手性拆分第20-26页
     ·脂肪酶的结构与催化机理第20-21页
     ·脂肪酶的手性拆分机理第21-23页
     ·脂肪酶手性拆分存在的问题第23页
     ·提高脂肪酶对映选择性的研究进展第23-26页
       ·体外分子定向进化第23-24页
       ·底物工程第24页
       ·溶剂工程第24页
       ·两次拆分法第24页
       ·动态动力学拆分第24-25页
       ·酶的固定化第25页
       ·生物印迹第25-26页
   ·分子印迹固定化脂肪酶第26-29页
     ·酶的固定化概述第26-27页
     ·溶胶-凝胶固定化酶的特点第27-28页
     ·分子印迹固定化脂肪酶的原理及研究进展第28-29页
   ·本文的研究意义及研究方案第29-30页
第二章 脂肪酶的纯化与性质研究第30-44页
   ·引言第30页
   ·材料与方法第30-35页
     ·材料第30-31页
       ·菌株第30页
       ·试剂第30-31页
       ·仪器与设备第31页
     ·实验方法第31-35页
       ·粗酶粉的制备第31页
       ·离子交换层析法纯化脂肪酶第31页
       ·疏水层析法纯化脂肪酶第31页
       ·脂肪酶活力的测定第31-32页
       ·蛋白质浓度的测定第32-33页
       ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第33页
       ·等电聚焦凝胶电泳第33页
       ·双向SDS-PAGE电泳第33页
       ·考马斯亮蓝染色第33页
       ·Rhodanime B活性染色第33-34页
       ·脂肪酶最适反应温度的测定第34页
       ·脂肪酶最适反应pH值的测定第34页
       ·脂肪酶温度稳定性的测定第34页
       ·脂肪酶pH稳定性的测定第34页
       ·金属离子影响因素的测定第34-35页
       ·表面活性剂和酶抑制剂影响因素的测定第35页
   ·实验结果与讨论第35-43页
     ·脂肪酶的纯化第35-37页
       ·离子交换层析法纯化脂肪酶第35-36页
       ·疏水层析法纯化脂肪酶第36页
       ·脂肪酶的纯化倍数和比活性第36-37页
     ·脂肪酶蛋白分子量的测定第37-38页
     ·脂肪酶同工酶的测定第38-39页
     ·脂肪酶性质的研究第39-43页
       ·脂肪酶的最适反应温度第39页
       ·脂肪酶的最适反应pH值第39-40页
       ·脂肪酶的温度稳定性第40-41页
       ·脂肪酶的pH稳定性第41页
       ·金属离子对脂肪酶活性的影响第41-42页
       ·表面活性剂和酶抑制剂对脂肪酶活性的影响第42-43页
   ·小结第43-44页
第三章 有机相中脂肪酶拆分1-苯乙胺的研究第44-54页
   ·引言第44-45页
   ·材料与方法第45-46页
     ·材料第45页
       ·脂肪酶第45页
       ·试剂第45页
       ·仪器与设备第45页
     ·实验方法第45-46页
       ·酶促1-苯乙胺转酯化反应第45页
       ·手性物质的分析方法第45-46页
       ·反应转化率的测定第46页
       ·产物对映体过量的测定第46页
   ·实验结果与讨论第46-53页
     ·1-苯乙胺和N-乙酰-1-苯乙胺的HPLC分析第46-47页
     ·不同酶选择性的对照实验第47-48页
     ·有机溶剂的选择第48-50页
     ·反应温度的选择第50-51页
     ·反应时间的研究第51-53页
   ·小结第53-54页
第四章 分子印迹固定化脂肪酶的催化拆分研究第54-64页
   ·引言第54-55页
   ·材料与方法第55-57页
     ·材料第55页
       ·脂肪酶第55页
       ·试剂第55页
       ·仪器与设备第55页
     ·实验方法第55-57页
       ·溶胶-凝胶固定化脂肪酶的制备过程第55-56页
       ·分子印迹固定化脂肪酶的制备程序第56-57页
       ·固定化酶催化拆分1-苯乙胺的反应第57页
       ·固定化酶活性的测定第57页
       ·拆分反应转化率及对映选择性的测定第57页
   ·实验结果与讨论第57-63页
     ·溶胶凝胶法制备固定化酶的研究第57-60页
       ·固定化酶与游离酶活性的比较第57-58页
       ·表面活性剂对固定化酶的影响第58-59页
       ·改性剂对固定化酶的影响第59-60页
     ·分子印迹固定化脂肪酶的催化拆分1-苯乙胺研究第60-63页
       ·不同底物类似物对分子印迹固定化脂肪酶的影响第60-61页
       ·底物的量对分子印迹固定化脂肪酶的影响第61-62页
       ·分子印迹固定化脂肪酶制备条件的研究第62-63页
   ·小结第63-64页
第五章 结论与建议第64-66页
参考文献第66-71页
附录第71-73页
致谢第73-74页
研究成果及发表的学术论文第74页

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