摘要 | 第1-16页 |
ABSTRACT | 第16-19页 |
缩略语表 | 第19-21页 |
第一章 前言 | 第21-57页 |
·环境雌激素 | 第21-25页 |
·环境雌激素的定义 | 第21页 |
·环境雌激素的种类和来源 | 第21-23页 |
·人工合成的雌激素 | 第21-22页 |
·烷基苯酚类化合物 | 第22页 |
·农药类物质 | 第22页 |
·二恶英(dioxins)、多氯联苯(PCBs)类 | 第22页 |
·多环芳烃(PAHs) | 第22页 |
·添加剂 | 第22-23页 |
·重金属 | 第23页 |
·天然雌激素 | 第23页 |
·环境雌激素的危害 | 第23-25页 |
·环境雌激素对野生动物的危害 | 第23-24页 |
·环境雌激素对人体健康的危害 | 第24-25页 |
·环境雌激素的生物标志物 | 第25-26页 |
·卵黄蛋白原的特性 | 第26-29页 |
·无脊椎动物Vtg 的特性 | 第26-27页 |
·脊椎动物Vtg 的特性 | 第27-29页 |
·卵黄蛋白原的分离纯化 | 第29-32页 |
·超速离心法 | 第29-30页 |
·沉淀法 | 第30页 |
·凝胶渗透色谱法 | 第30-31页 |
·离子交换色谱法 | 第31-32页 |
·金属亲和色谱法 | 第32页 |
·卵黄蛋白原的分析方法 | 第32-40页 |
·特异性分析方法 | 第33-38页 |
·放射性免疫分析法(RIA) | 第33页 |
·酶联免疫吸附法(ELISA) | 第33-36页 |
·蛋白印迹法 | 第36页 |
·其它免疫分析方法 | 第36-38页 |
·非特异性分析方法 | 第38-40页 |
·间接法 | 第38页 |
·直接法 | 第38-40页 |
·Vtg 作为环境雌激素的生物标志物的研究现状 | 第40-41页 |
·课题的提出 | 第41-42页 |
·立题背景 | 第41-42页 |
·研究目的 | 第42页 |
·研究内容和技术途径 | 第42页 |
第一章 参考文献 | 第42-57页 |
第二章 真鲷 Vtg 的诱导、纯化及初步鉴定 | 第57-72页 |
·引言 | 第57-58页 |
·实验部分 | 第58-61页 |
·仪器和试剂 | 第58页 |
·实验动物 | 第58-59页 |
·卵黄蛋白原的诱导 | 第59页 |
·卵黄蛋白原的分离纯化 | 第59-60页 |
·EDTA-Mg~(2+)沉淀纯化 | 第59页 |
·Vtg 的色谱分离纯化 | 第59-60页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析和生化分析 | 第60-61页 |
·常规聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE) | 第60页 |
·磷蛋白的分析 | 第60页 |
·脂蛋白的分析 | 第60页 |
·糖蛋白的分析 | 第60-61页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第61页 |
·结果与讨论 | 第61-68页 |
·血浆蛋白的色谱分离 | 第61-62页 |
·电泳分析 | 第62-65页 |
·Native-PAGE 电泳分析 | 第62-64页 |
·SDS-PAGE 电泳分析 | 第64-65页 |
·磷、脂、糖分析 | 第65-67页 |
·4-NP 对真鲷的诱导作用 | 第67-68页 |
·本章小结 | 第68-69页 |
第二章 参考文献 | 第69-72页 |
第三章 柱后荧光衍生-高效液相色谱法测定鱼血浆中的 Vtg | 第72-90页 |
·引言 | 第72-73页 |
·实验部分 | 第73-75页 |
·仪器和试剂 | 第73页 |
·实验动物 | 第73-74页 |
·Vtg 的诱导 | 第74页 |
·Vtg 标样的获得 | 第74页 |
·色谱分析参数 | 第74-75页 |
·结果与讨论 | 第75-87页 |
·色谱分离 | 第75-77页 |
·荧光检测 | 第77页 |
·衍生液中各参数的优化 | 第77-81页 |
·衍生液pH 值的影响 | 第77-78页 |
·硼砂浓度的影响 | 第78页 |
·邻苯二甲醛(OPA)浓度的影响 | 第78-79页 |
·反应温度的影响 | 第79-80页 |
·2-巯基乙醇(MCE)浓度的影响 | 第80-81页 |
·方法的线性范围、测定下限和重现性 | 第81-82页 |
·鱼血浆中Vtg 的测定 | 第82-87页 |
·本章小结 | 第87页 |
第三章 参考文献 | 第87-90页 |
第四章 Vtg 作为环境雌激素生物标志物的研究 | 第90-125页 |
·引言 | 第90-91页 |
·实验部分 | 第91-94页 |
·仪器和试剂 | 第91-92页 |
·实验动物 | 第92页 |
·污染实验 | 第92页 |
·样品预处理 | 第92-93页 |
·血浆中卵黄蛋白原的测定 | 第93页 |
·流动相 | 第93页 |
·邻苯二甲醛柱后衍生试剂 | 第93页 |
·液相色谱参数 | 第93页 |
·血浆蛋白总量的测定 | 第93-94页 |
·血浆中性激素水平的测定 | 第94页 |
·数据处理 | 第94页 |
·结果与讨论 | 第94-116页 |
·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼死亡数的影响 | 第94-95页 |
·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼体长、体重及肥满度的影响 | 第95-99页 |
·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼血浆Vtg 含量的影响 | 第99-104页 |
·EE_2 对真鲷幼鱼血浆Vtg 含量的影响 | 第99-101页 |
·DES 对真鲷幼鱼血浆Vtg 含量的影响 | 第101-102页 |
·OP 对真鲷幼鱼血浆Vtg 含量的影响 | 第102-104页 |
·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼肝胰脏指数(HSI)的影响 | 第104-106页 |
·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼血浆蛋白总量的影响 | 第106-108页 |
·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼血浆性激素水平的影响 | 第108-114页 |
·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼血浆17β-雌二醇(E2)浓度的影响 | 第108-109页 |
·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼血浆睾酮(T)浓度的影响 | 第109-111页 |
·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼血浆E2/T 比值的影响 | 第111-114页 |
·真鲷幼鱼血浆中Vtg 含量与其它指标的相关性 | 第114-116页 |
·本章小结 | 第116-118页 |
第四章 参考文献 | 第118-125页 |
结语 | 第125-127页 |
贡献 | 第125页 |
不足之处 | 第125页 |
研究展望 | 第125-127页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第127-128页 |
致谢 | 第128页 |