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真鲷血浆中卵黄蛋白原的柱后荧光衍生检测及其在环境雌激素生物标志物中的应用

摘要第1-16页
ABSTRACT第16-19页
缩略语表第19-21页
第一章 前言第21-57页
   ·环境雌激素第21-25页
     ·环境雌激素的定义第21页
     ·环境雌激素的种类和来源第21-23页
       ·人工合成的雌激素第21-22页
       ·烷基苯酚类化合物第22页
       ·农药类物质第22页
       ·二恶英(dioxins)、多氯联苯(PCBs)类第22页
       ·多环芳烃(PAHs)第22页
       ·添加剂第22-23页
       ·重金属第23页
       ·天然雌激素第23页
     ·环境雌激素的危害第23-25页
       ·环境雌激素对野生动物的危害第23-24页
       ·环境雌激素对人体健康的危害第24-25页
   ·环境雌激素的生物标志物第25-26页
   ·卵黄蛋白原的特性第26-29页
     ·无脊椎动物Vtg 的特性第26-27页
     ·脊椎动物Vtg 的特性第27-29页
   ·卵黄蛋白原的分离纯化第29-32页
     ·超速离心法第29-30页
     ·沉淀法第30页
     ·凝胶渗透色谱法第30-31页
     ·离子交换色谱法第31-32页
     ·金属亲和色谱法第32页
   ·卵黄蛋白原的分析方法第32-40页
     ·特异性分析方法第33-38页
       ·放射性免疫分析法(RIA)第33页
       ·酶联免疫吸附法(ELISA)第33-36页
       ·蛋白印迹法第36页
       ·其它免疫分析方法第36-38页
     ·非特异性分析方法第38-40页
       ·间接法第38页
       ·直接法第38-40页
   ·Vtg 作为环境雌激素的生物标志物的研究现状第40-41页
   ·课题的提出第41-42页
     ·立题背景第41-42页
     ·研究目的第42页
     ·研究内容和技术途径第42页
 第一章 参考文献第42-57页
第二章 真鲷 Vtg 的诱导、纯化及初步鉴定第57-72页
   ·引言第57-58页
   ·实验部分第58-61页
     ·仪器和试剂第58页
     ·实验动物第58-59页
     ·卵黄蛋白原的诱导第59页
     ·卵黄蛋白原的分离纯化第59-60页
       ·EDTA-Mg~(2+)沉淀纯化第59页
       ·Vtg 的色谱分离纯化第59-60页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析和生化分析第60-61页
       ·常规聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)第60页
       ·磷蛋白的分析第60页
       ·脂蛋白的分析第60页
       ·糖蛋白的分析第60-61页
       ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第61页
   ·结果与讨论第61-68页
     ·血浆蛋白的色谱分离第61-62页
     ·电泳分析第62-65页
       ·Native-PAGE 电泳分析第62-64页
       ·SDS-PAGE 电泳分析第64-65页
     ·磷、脂、糖分析第65-67页
     ·4-NP 对真鲷的诱导作用第67-68页
   ·本章小结第68-69页
 第二章 参考文献第69-72页
第三章 柱后荧光衍生-高效液相色谱法测定鱼血浆中的 Vtg第72-90页
   ·引言第72-73页
   ·实验部分第73-75页
     ·仪器和试剂第73页
     ·实验动物第73-74页
     ·Vtg 的诱导第74页
     ·Vtg 标样的获得第74页
     ·色谱分析参数第74-75页
   ·结果与讨论第75-87页
     ·色谱分离第75-77页
     ·荧光检测第77页
     ·衍生液中各参数的优化第77-81页
       ·衍生液pH 值的影响第77-78页
       ·硼砂浓度的影响第78页
       ·邻苯二甲醛(OPA)浓度的影响第78-79页
       ·反应温度的影响第79-80页
       ·2-巯基乙醇(MCE)浓度的影响第80-81页
     ·方法的线性范围、测定下限和重现性第81-82页
     ·鱼血浆中Vtg 的测定第82-87页
   ·本章小结第87页
 第三章 参考文献第87-90页
第四章 Vtg 作为环境雌激素生物标志物的研究第90-125页
   ·引言第90-91页
   ·实验部分第91-94页
     ·仪器和试剂第91-92页
     ·实验动物第92页
     ·污染实验第92页
     ·样品预处理第92-93页
     ·血浆中卵黄蛋白原的测定第93页
       ·流动相第93页
       ·邻苯二甲醛柱后衍生试剂第93页
       ·液相色谱参数第93页
     ·血浆蛋白总量的测定第93-94页
     ·血浆中性激素水平的测定第94页
     ·数据处理第94页
   ·结果与讨论第94-116页
     ·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼死亡数的影响第94-95页
     ·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼体长、体重及肥满度的影响第95-99页
     ·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼血浆Vtg 含量的影响第99-104页
       ·EE_2 对真鲷幼鱼血浆Vtg 含量的影响第99-101页
       ·DES 对真鲷幼鱼血浆Vtg 含量的影响第101-102页
       ·OP 对真鲷幼鱼血浆Vtg 含量的影响第102-104页
     ·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼肝胰脏指数(HSI)的影响第104-106页
     ·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼血浆蛋白总量的影响第106-108页
     ·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼血浆性激素水平的影响第108-114页
       ·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼血浆17β-雌二醇(E2)浓度的影响第108-109页
       ·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼血浆睾酮(T)浓度的影响第109-111页
       ·EE_2、DES 和OP 对真鲷幼鱼血浆E2/T 比值的影响第111-114页
     ·真鲷幼鱼血浆中Vtg 含量与其它指标的相关性第114-116页
   ·本章小结第116-118页
 第四章 参考文献第118-125页
结语第125-127页
 贡献第125页
 不足之处第125页
 研究展望第125-127页
攻读博士学位期间发表的论文第127-128页
致谢第128页

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