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水稻rbcs基因启动子的克隆、功能分析及应用

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第11-12页
1 文献综述第12-31页
   ·植物启动子结构与功能研究第12-22页
     ·启动子特征与结构第12-14页
     ·植物基因工程中的常用启动子第14-18页
     ·启动子分离克隆的方法第18-19页
     ·启动子功能检测第19-20页
     ·启动子DNA结合蛋白研究第20-22页
   ·rbcS基因研究进展第22-24页
     ·rbcS基因及其蛋白概况第22-23页
     ·rbcS基因光诱导表达第23-24页
   ·植物遗传转化方法及特点第24-30页
     ·基因枪介导的基因转移第24页
     ·PEG介导的基因转移第24-25页
     ·花粉管通道法第25页
     ·根癌农杆菌介导的遗传转化第25-29页
     ·其它植物转基因方法第29-30页
   ·研究目的与意义第30-31页
2 材料与方法第31-44页
   ·实验材料第31页
     ·受体植物材料第31页
     ·菌株、质粒、及外源片段第31页
   ·实验方法第31-44页
     ·外源启动子片段的克隆及植物表达载体构建第31-32页
     ·Osrbcs启动子不同长度缺失体的获得及植物表达载体构建第32-33页
     ·cry1C植物表达载体的构建第33-34页
     ·农杆菌介导的中花11的遗传转化第34页
     ·转基因植株的PCR阳性检测第34-35页
     ·1301r、1301a阳性植株组织化学分析第35页
     ·1301r、1301a阳性植株GUS定量检测第35-37页
     ·Os1320、Os941、Os550、Os344和Os62阳性植株GUS组织化学分析及定量分析第37页
     ·Os1619、Os1320、Os941、Os550、Os344和Os62 T_1代幼苗植株光诱导表达GUS活性检测第37页
     ·Osrbcs启动子片段凝胶阻滞分析(EMSA)第37-40页
     ·3300rc转基因植株的PCR阳性检测第40-41页
     ·3300rc转基因植株的Southern blot检测及拷贝数鉴定第41-43页
     ·3300rc转基因阳性植株的Bt蛋白含量测定第43-44页
3 结果与分析第44-57页
   ·启动子克隆及功能分析第44-54页
     ·Osrbcs及ats1A基因启动子序列分析第44页
     ·转化载体鉴定第44-45页
     ·表达载体的转化第45-46页
     ·1301a及1301rT_0代转化植株的PCR检测第46-47页
     ·1301a及1301r阳性植株GUS染色及GUS定量检测第47-48页
     ·不同长度Posrbcs启动子缺失体转化植株GUS组织化学分析第48-50页
     ·不同长度Osrbcs启动子缺失体转化植株GUS定量检测第50-51页
     ·不同长度Osrbcs启动子缺失体转化植株经暗培养及光诱导后gus基因的表达第51-52页
     ·Osrbcs基因启动子序列凝胶阻滞分析第52-54页
   ·Osrbcs启动子应用第54-57页
     ·p3300rc表达载体的转化第54页
     ·T_0代植株的PCR阳性检测第54-55页
     ·T_0代植株的拷贝数检测第55页
     ·3300rc部分单拷贝植株Bt蛋白含量检测第55-57页
4 讨论第57-62页
   ·Osrbcs基因启动子表达的特点第57页
   ·实验过程中的一些体会第57-60页
     ·GUS作为报告基因的优缺点第57-58页
     ·以hpt和bar基因为筛选基因的比较第58-59页
     ·转基因植株中的基因沉默现象第59-60页
     ·凝胶阻滞试验中的一点体会第60页
   ·Bt基因启动子的选择第60-62页
参考文献第62-70页
附录第70-80页
致谢第80页

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