摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-31页 |
·植物启动子结构与功能研究 | 第12-22页 |
·启动子特征与结构 | 第12-14页 |
·植物基因工程中的常用启动子 | 第14-18页 |
·启动子分离克隆的方法 | 第18-19页 |
·启动子功能检测 | 第19-20页 |
·启动子DNA结合蛋白研究 | 第20-22页 |
·rbcS基因研究进展 | 第22-24页 |
·rbcS基因及其蛋白概况 | 第22-23页 |
·rbcS基因光诱导表达 | 第23-24页 |
·植物遗传转化方法及特点 | 第24-30页 |
·基因枪介导的基因转移 | 第24页 |
·PEG介导的基因转移 | 第24-25页 |
·花粉管通道法 | 第25页 |
·根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第25-29页 |
·其它植物转基因方法 | 第29-30页 |
·研究目的与意义 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-44页 |
·实验材料 | 第31页 |
·受体植物材料 | 第31页 |
·菌株、质粒、及外源片段 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-44页 |
·外源启动子片段的克隆及植物表达载体构建 | 第31-32页 |
·Osrbcs启动子不同长度缺失体的获得及植物表达载体构建 | 第32-33页 |
·cry1C植物表达载体的构建 | 第33-34页 |
·农杆菌介导的中花11的遗传转化 | 第34页 |
·转基因植株的PCR阳性检测 | 第34-35页 |
·1301r、1301a阳性植株组织化学分析 | 第35页 |
·1301r、1301a阳性植株GUS定量检测 | 第35-37页 |
·Os1320、Os941、Os550、Os344和Os62阳性植株GUS组织化学分析及定量分析 | 第37页 |
·Os1619、Os1320、Os941、Os550、Os344和Os62 T_1代幼苗植株光诱导表达GUS活性检测 | 第37页 |
·Osrbcs启动子片段凝胶阻滞分析(EMSA) | 第37-40页 |
·3300rc转基因植株的PCR阳性检测 | 第40-41页 |
·3300rc转基因植株的Southern blot检测及拷贝数鉴定 | 第41-43页 |
·3300rc转基因阳性植株的Bt蛋白含量测定 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-57页 |
·启动子克隆及功能分析 | 第44-54页 |
·Osrbcs及ats1A基因启动子序列分析 | 第44页 |
·转化载体鉴定 | 第44-45页 |
·表达载体的转化 | 第45-46页 |
·1301a及1301rT_0代转化植株的PCR检测 | 第46-47页 |
·1301a及1301r阳性植株GUS染色及GUS定量检测 | 第47-48页 |
·不同长度Posrbcs启动子缺失体转化植株GUS组织化学分析 | 第48-50页 |
·不同长度Osrbcs启动子缺失体转化植株GUS定量检测 | 第50-51页 |
·不同长度Osrbcs启动子缺失体转化植株经暗培养及光诱导后gus基因的表达 | 第51-52页 |
·Osrbcs基因启动子序列凝胶阻滞分析 | 第52-54页 |
·Osrbcs启动子应用 | 第54-57页 |
·p3300rc表达载体的转化 | 第54页 |
·T_0代植株的PCR阳性检测 | 第54-55页 |
·T_0代植株的拷贝数检测 | 第55页 |
·3300rc部分单拷贝植株Bt蛋白含量检测 | 第55-57页 |
4 讨论 | 第57-62页 |
·Osrbcs基因启动子表达的特点 | 第57页 |
·实验过程中的一些体会 | 第57-60页 |
·GUS作为报告基因的优缺点 | 第57-58页 |
·以hpt和bar基因为筛选基因的比较 | 第58-59页 |
·转基因植株中的基因沉默现象 | 第59-60页 |
·凝胶阻滞试验中的一点体会 | 第60页 |
·Bt基因启动子的选择 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-70页 |
附录 | 第70-80页 |
致谢 | 第80页 |