| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-8页 |
| 文献综述 | 第8-20页 |
| 一、猪圆环病毒病研究进展 | 第8-15页 |
| 1 病原学 | 第8-12页 |
| ·病毒的分类地位 | 第8-9页 |
| ·猪圆环病毒的形态和理化特性 | 第9页 |
| ·猪圆环病毒的培养特性 | 第9页 |
| ·猪圆环病毒的分子生物学特性 | 第9-12页 |
| ·基因组结构 | 第9-10页 |
| ·编码蛋白及其功能 | 第10-12页 |
| 2 流行病学 | 第12-13页 |
| 3 猪圆环病毒2型的致病机理 | 第13-14页 |
| 4 临床症状与病理变化 | 第14页 |
| 5 免疫预防 | 第14-15页 |
| 二、猪圆环病毒检测方法的研究进展 | 第15-18页 |
| 1 病毒的检测 | 第15-17页 |
| ·病毒分离 | 第15页 |
| ·病毒抗原的检测 | 第15-16页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第15-16页 |
| ·免疫组化法 | 第16页 |
| ·抗原捕获ELISA | 第16页 |
| ·基因组检测 | 第16-17页 |
| ·PCR | 第16-17页 |
| ·PCR-限制性长度多态性分析方法 | 第17页 |
| ·原位杂交 | 第17页 |
| 2 病毒抗体的检测 | 第17-18页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第18页 |
| ·免疫过氧化物酶单层细胞试验 | 第18页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第18页 |
| 三、本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 研究部分 | 第20-36页 |
| 1 材料与方法 | 第20-29页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·病毒与细胞 | 第20页 |
| ·菌株、质粒和试剂 | 第20页 |
| ·实验所用主要溶液及培养基的制备 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-29页 |
| ·引物设计和合成 | 第21页 |
| ·PCV2 JL01株细胞毒DNA的提取 | 第21-22页 |
| ·PCV2 ORF2基因的PCR扩增 | 第22页 |
| ·PCR产物的克隆及鉴定 | 第22-25页 |
| ·PCV2 ORF2基因序列的测定 | 第25页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第25-27页 |
| ·重组表达菌的诱导表达 | 第27-28页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第28页 |
| ·Western-blot检测 | 第28-29页 |
| 2 结果 | 第29-34页 |
| ·ORF2基因的PCR扩增 | 第29页 |
| ·重组质粒pMD-ORF2的酶切及PCR鉴定 | 第29-30页 |
| ·ORF2基因的序列测定与分析结果 | 第30-32页 |
| ·重组表达质粒的构建结果 | 第32-33页 |
| ·ORFs基因的扩增结果 | 第32页 |
| ·重组质粒pMD-ORFs的鉴定结果 | 第32页 |
| ·重组表达质粒pET-ORFs的鉴定结果 | 第32-33页 |
| ·ORFs表达产物的SDS-PAGE和Western-blot分析结果 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-35页 |
| 4 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-42页 |
| 致谢 | 第42页 |