牙鲆rag基因的克隆及表达研究
| 第一章 引言 | 第1-39页 |
| 一、鱼类免疫系统组成及其个体发育 | 第8-20页 |
| 1 鱼类的免疫器官和组织 | 第8-10页 |
| 2 免疫细胞 | 第10-12页 |
| 3 体液免疫因子 | 第12-15页 |
| 4 鱼类免疫系统的个体分子发育 | 第15-20页 |
| 二、抗原受体的结构及功能多样性产生机制 | 第20-26页 |
| 1 B淋巴细胞和T淋巴细胞抗原受体的结构及分类 | 第20-22页 |
| 2 功能多样性产生机制 | 第22-26页 |
| 三、V(D)J重排机制与RAG蛋白 | 第26-38页 |
| 1 V(D)J 重排机制 | 第26-31页 |
| 2 RAG蛋白 | 第31-34页 |
| 3 重排反应相关因子 | 第34-38页 |
| 四、研究意义 | 第38-39页 |
| 第二章 ra91 和ra92 基因的克隆 | 第39-65页 |
| 1 材料和方法 | 第39-46页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·引物序列 | 第39-41页 |
| ·PCR反应体系及程序 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-46页 |
| 2 实验结果 | 第46-58页 |
| ·牙鲆ra91 基因序列 | 第46-53页 |
| ·牙鲆ra92 基因序列 | 第53-56页 |
| ·基因间序列 | 第56-58页 |
| 3 讨论 | 第58-65页 |
| ·rag基因的构成 | 第58-59页 |
| ·rag基因的表达调控 | 第59-61页 |
| ·RAG蛋白的分析 | 第61-63页 |
| ·rag基因座位 | 第63-65页 |
| 第三章 牙鲆ra91 和ra92 基因的表达分析 | 第65-77页 |
| 1 材料和方法 | 第65-69页 |
| ·组织特异性检测 | 第65-66页 |
| ·探针制备 | 第66页 |
| ·整装原位杂交 | 第66-67页 |
| ·冰冻切片 | 第67-68页 |
| ·石蜡切片原位杂交 | 第68-69页 |
| 2 实验结果 | 第69-73页 |
| ·组织特异性表达 | 第69-70页 |
| ·rag基因时空表达 | 第70-73页 |
| 3 讨论 | 第73-77页 |
| ·基因表达水平的组织特异性 | 第73页 |
| ·rag表达与胸腺的发生 | 第73-75页 |
| ·胸腺的位置 | 第75-77页 |
| 第四章 RAG1 和RAG2 蛋白的原核表达 | 第77-87页 |
| 1 材料和方法 | 第77-80页 |
| ·试验材料 | 第77页 |
| ·引物序列 | 第77-78页 |
| ·感受态细胞的制备及表达质粒转化 | 第78页 |
| ·IPTG诱导浓度对重组蛋白表达量的影响 | 第78-79页 |
| ·诱导时间对重组蛋白表达量的影响 | 第79页 |
| ·蛋白可溶性确定 | 第79页 |
| ·RAG2 蛋白的纯化 | 第79页 |
| ·SDS-PAGE检测 | 第79-80页 |
| 2 实验结果 | 第80-85页 |
| ·重组表达质粒的构建及表达蛋白分子量的确定 | 第80-81页 |
| ·诱导时间对重组蛋白表达量的影响 | 第81-82页 |
| ·IPTG浓度对重组蛋白产生量的影响 | 第82-83页 |
| ·蛋白可溶性确定 | 第83-84页 |
| ·RAG2 蛋白纯化结果 | 第84-85页 |
| 3 讨论 | 第85-87页 |
| 结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-105页 |
| 发表文章目录 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
