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转双价抗虫基因棉花的获得、检测和基因表达研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
论文缩写词第9-10页
1 文献综述第10-21页
 1.1 棉花遗传转化技术研究第10-14页
  1.1.1 农杆菌介导的棉花遗传转化第10-12页
  1.1.2 花粉管通道法第12-13页
  1.1.3 基因枪法第13-14页
  1.1.4 选择标记基因第14页
  1.1.5 报告基因第14页
 1.2 遗传转化技术在棉花育种实践中的应用第14-18页
  1.2.1 棉花抗虫育种第14-16页
  1.2.2 棉花抗病育种第16页
  1.2.3 棉花抗除草剂育种第16-17页
  1.2.4 棉花纤维品质改良育种第17-18页
 1.3 我国转基因棉花研究的现状及展望第18-19页
  1.3.1 探索有效的基因转化方法第18页
  1.3.2 提高棉花品质第18-19页
  1.3.3 加强棉花基因组研究第19页
 1.4 棉花叶片细胞间隙液的提取和鉴定第19页
 1.5 选题背景和立题依据第19-21页
2 材料与方法第21-29页
 2.1 材料来源第21页
 2.2 载体菌株和质粒第21页
 2.3 实验方法第21-29页
  2.3.1 质粒 DNA的提取第21-22页
  2.3.2 大肠杆菌(E.coli DH5α)感受态细胞的制备第22页
  2.3.3 DNA对E.coli DH5α的转化第22页
  2.3.4 花粉管通道途径转化第22-23页
  2.3.5 组织化学鉴定第23页
  2.3.6 抗虫性鉴定第23-24页
  2.3.7 抗虫基因的分子检测第24-27页
  2.3.8 ELISA检测第27页
  2.3.9 细胞间隙液的提取和鉴定第27-29页
3 结果与分析第29-37页
 3.1 花粉管通道法途径转化棉花第29页
 3.2 卡那霉素田间组织化学鉴定第29-30页
 3.3 转基因抗虫棉的分子检测第30-31页
  3.3.1 转基因抗虫棉的Bt.基因的PCR检测第30页
  3.3.2 转基因抗虫棉的gna基因的PCR检测第30页
  3.3.3 转基因抗虫棉的Bt基因的Southern杂交第30-31页
  3.3.4 转基因抗虫棉的gna基因的Southern杂交第31页
 3.4 转基因植株的抗虫性鉴定第31-34页
  3.4.1 棉铃虫抗性检测第31-33页
  3.4.2 蚜虫抗性鉴定第33-34页
 3.5 转基因抗虫棉的ELISA检测第34-36页
 3.6 转基因抗虫棉细胞间隙液的提取和鉴定第36-37页
  3.6.1 转基因抗虫棉细胞间隙液的鉴定第36页
  3.6.2 转基因抗虫棉细胞间隙液ELISA检测第36-37页
4 讨论与结论第37-39页
 4.1 花粉管通道法转化棉花第37页
 4.2 棉花总DNA的提取第37-38页
 4.3 转基因棉花Bt杀虫蛋白在各生育期不同组织器官的含量第38页
 4.4 细胞间隙液的提取第38页
 4.5 结论第38-39页
参考文献第39-46页
致谢第46-47页
附录第47页

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