| 第1章 文献综述 | 第1-17页 |
| 1 基因工程人胰岛素研究概况 | 第8-11页 |
| ·基因工程人胰岛素在大肠杆菌中的生物合成 | 第8-9页 |
| ·基因工程人胰岛素在酵母中的生物合成 | 第9-10页 |
| ·基因工程人胰岛素在高等动植物中的生物合成 | 第10-11页 |
| 2 大豆转基因研究进展 | 第11-16页 |
| ·大豆的遗传转化方法 | 第11-14页 |
| ·农杆菌介导的大豆遗传转化 | 第12-13页 |
| ·DNA直接转化法 | 第13页 |
| ·种质介导的转化方法 | 第13-14页 |
| ·大豆的转基因应用 | 第14-16页 |
| ·抗病虫害基因 | 第14-15页 |
| ·品质改良基因 | 第15页 |
| ·其它方面的应用 | 第15-16页 |
| 3 本研究的目的意义 | 第16-17页 |
| 第2章 人胰岛素A、B链基因大豆表达载体pBI121-IN的构建 | 第17-32页 |
| ·材料 | 第17-32页 |
| ·菌株与质粒 | 第17-20页 |
| ·仪器设备 | 第17页 |
| ·试剂 | 第17-18页 |
| ·引物 | 第18页 |
| ·常用溶液的配制 | 第18-19页 |
| ·细菌培养基的配制 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-26页 |
| ·人胰岛素A、B链基因的合成 | 第20-21页 |
| ·碱裂解法提取质粒DNA(小量法) | 第21-22页 |
| ·DNA纯度检测与浓度估算 | 第22页 |
| ·重组质粒pUC18-IN的测序鉴定 | 第22页 |
| ·质粒DNA的酶切 | 第22-23页 |
| ·DNA片段的回收 | 第23页 |
| ·DNA连接 | 第23-24页 |
| ·大肠杆菌DH5α和根癌农杆菌EHA105电激感受态细胞的制备 | 第24页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌DH5α和根癌农杆菌EHA105感受态细胞 | 第24-25页 |
| ·重组质粒pBI121-IN的PCR检测 | 第25页 |
| ·重组质粒pBI121-IN的酶切检测 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-31页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第26页 |
| ·目的基因片段与载体大片段的制备 | 第26-27页 |
| ·大豆表达载体pBI121-IN的构建 | 第27页 |
| ·重组克隆的PCR筛选及双酶切鉴定 | 第27-30页 |
| ·根癌农杆菌的转化及PCR鉴定 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·关于大豆偏爱密码子及其使用的研究 | 第29-31页 |
| ·关于实现大肠杆菌及农杆菌高效电激转化的讨论 | 第31-32页 |
| 第3章 pBI121-IN对大豆的遗传转化 | 第32-42页 |
| ·材料 | 第32-42页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·仪器设备 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·常用溶液的配制 | 第32-33页 |
| ·植物培养基 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·根癌农杆菌EHA105(pBI121-IN)工程菌液的制备 | 第33-34页 |
| ·外植体的制备 | 第34页 |
| ·受体材料的选择 | 第34页 |
| ·抗生素浓度的筛选 | 第34页 |
| ·6-BA浓度的选择 | 第34-35页 |
| ·子叶节预培养时间的选择 | 第35页 |
| ·农杆菌工程菌液对子叶节侵染时间的选择 | 第35页 |
| ·共培养时间的选择 | 第35页 |
| ·根癌农杆菌介导大豆子叶节遗传转化体系的建立 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-40页 |
| ·不同基因型大豆子叶节芽诱导效率的比较 | 第35页 |
| ·卡那霉素对大豆子叶节绿芽分化率的影响 | 第35-36页 |
| ·6-BA对芽诱导和芽成苗能力的影响 | 第36-37页 |
| ·预培养时间对转化效率的影响 | 第37-38页 |
| ·农杆菌工程菌液侵染时间对转化效率的影响 | 第38页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第38-39页 |
| ·农杆菌介导大豆子叶节遗传转化体系的建立 | 第39页 |
| ·抗卡那霉素转化苗的获得 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| ·关于种子萌发培养基的选择 | 第40-41页 |
| ·关于影响农杆菌介导大豆子叶节遗传转化的因素的探讨 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 附件1 | 第46-47页 |
| 附件2 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49页 |
