| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一篇 文献综述 | 第10-33页 |
| ·重要的糖肽类抗生素—万古霉素 | 第10-17页 |
| ·万古霉素发展概况 | 第10页 |
| ·万古霉素的作用机制和细菌产生耐药性的作用机制 | 第10-12页 |
| ·新型糖肽类抗生素的研究与开发 | 第12-17页 |
| ·拟无枝酸菌遗传操作的研究进展 | 第17-23页 |
| ·拟无枝酸菌中所用载体质粒 | 第18-21页 |
| ·外源基因的导入方法 | 第21-23页 |
| ·A-因子对灰色链霉菌形态分化和次级代谢的分子调控 | 第23-31页 |
| ·A-因子的发现及其类似物 | 第24-25页 |
| ·A因子的生物合成途径中的关键酶 | 第25-26页 |
| ·A因子受体的研究 | 第26-27页 |
| ·A因子信号向下游传递的中介体——AdpA | 第27页 |
| ·从A因子到链霉素产生基因的信号传递 | 第27-28页 |
| ·AdpA调控网络 | 第28-31页 |
| ·黄色色素grixazone的研究 | 第31页 |
| ·本研究的立题依据和研究内容 | 第31-33页 |
| ·万古霉素产生菌遗传操作系统建立的研究 | 第31页 |
| ·黄色色素grixazone的研究 | 第31-33页 |
| 第二篇 东方拟无枝酸菌HCCB10007遗传操作系统建立 | 第33-62页 |
| 第一章 质粒DNA转化东方拟无枝酸菌HCCB10007原生质体 | 第33-46页 |
| ·实验材料 | 第33-36页 |
| ·主要生化试剂 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33-34页 |
| ·主要溶液和缓冲液 | 第34-35页 |
| ·菌种和质粒 | 第35-36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-40页 |
| ·大肠埃希菌相关DNA克隆操作 | 第36-38页 |
| ·东方拟无枝酸菌HCCB10007相关操作 | 第38-40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-46页 |
| ·东方拟无枝酸菌抗生素抗性标记的选择 | 第40-41页 |
| ·原生质体制备和再生 | 第41-43页 |
| ·PEG介导原生质体转化 | 第43-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| 第二章 基因破坏用质粒的构建及糖基转移酶gtfD基因的克隆 | 第46-62页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·菌种和质粒 | 第46-47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| ·主要溶液 | 第47页 |
| ·主要仪器和设备 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-50页 |
| ·大肠埃希菌相关DNA克隆操作 | 第47-49页 |
| ·东方拟无枝酸菌HCCB10007相关操作 | 第49-50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-62页 |
| ·基因破坏用质粒的构建 | 第50-53页 |
| ·基因破坏质粒pLYBAM和pLYNAM的转化 | 第53-55页 |
| ·PCR扩增gtfD基因 | 第55-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| 第三篇 黄色色素生物合成途径中griA、griB、griJ基因功能研究 | 第62-110页 |
| 第三章 griA，griB基因功能研究 | 第62-87页 |
| ·实验材料 | 第62-66页 |
| ·试剂 | 第62页 |
| ·菌种和质粒 | 第62-64页 |
| ·培养基 | 第64-65页 |
| ·所用溶液及缓冲液 | 第65-66页 |
| ·实验方法 | 第66-71页 |
| ·氯化铯—溴化乙锭密度梯度离心大量制备质粒 | 第66-67页 |
| ·Southern杂交 | 第67-68页 |
| ·CEQ2000 DNA测序 | 第68-71页 |
| ·结果与讨论 | 第71-87页 |
| ·griA基因功能研究 | 第71-79页 |
| ·griB基因功能研究 | 第79-87页 |
| 第四章 griJ基因功能的研究 | 第87-110页 |
| ·实验材料 | 第87-89页 |
| ·主要生化试剂 | 第87页 |
| ·菌种和质粒 | 第87-88页 |
| ·培养基 | 第88页 |
| ·主要溶液 | 第88-89页 |
| ·主要仪器和设备 | 第89页 |
| ·实验方法 | 第89-93页 |
| ·LI-COR DNA测序 | 第89-90页 |
| ·SDS—PAGE蛋白电泳 | 第90-91页 |
| ·含有表达质粒的宿主细胞的培养及表达蛋白检测 | 第91-93页 |
| ·结果与讨论 | 第93-110页 |
| ·griJ基因破坏 | 第93-101页 |
| ·GriJ的表达 | 第101-110页 |
| 结论 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-120页 |
| 附录 | 第120-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 在读期间发表的论文 | 第129页 |
