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棉花生殖器官发育相关基因的克隆与表达研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-12页
第一章 前言第12-45页
 第一节 转基因抗虫棉的主要研究现状与对策第12-21页
   ·棉铃虫危害与害虫治理第12-16页
     ·基因工程在棉花抗虫研究上的应用第12-13页
     ·我国棉抗虫基因工程研究现状、存在问题与对策第13-16页
   ·棉花纤维品质研究进展第16-21页
     ·棉花纤维发育的生理基础第16-17页
     ·棉纤维的发生第17-18页
       ·植物激素与纤维发生第17页
       ·纤维发育起始特异性RNA和蛋白质第17-18页
       ·纤维发生突变体第18页
     ·纤维的伸长与向次生壁形成的转变第18-19页
       ·棉花纤维的扩散生长第18页
       ·次生壁的形成第18页
       ·细胞分裂第18-19页
     ·纤维伸长第19页
     ·幼棉花纤维纤维素合成第19-21页
 第二节 植物MADS-box基因和繁殖器官发育第21-30页
   ·花发育的ABC模型第21-23页
   ·花发育的ABC模型的发展第23-25页
   ·MASD-box基因的模块化组织形式第25-26页
   ·MADS-box基因主要分类第26-30页
     ·ARG80类MADS-box基因第27页
     ·MEF2类MADS-Box基因第27-28页
     ·DEFICIENS类MADS-Box基因第28页
     ·GLOBOSA类MADS-box基因第28-29页
     ·TM3类MADS-box基因第29页
     ·AGAMOUS类MADS-box基因第29页
     ·AGL2类MADS-box基因第29-30页
     ·金鱼草SQUAMOSA类MADS-box基因第30页
     ·AGL15类MADS-box基因第30页
 第三节 MADS-box基因与基因表达与调控第30-33页
   ·拟南芥APETALA3启动子CarG box调控元件的作用第30-32页
   ·MADS-box基因与MADS box蛋白转录因子的相互作用第32-33页
 第四节 植物MADS-box基因功能的多样性第33-38页
   ·单子叶植物的MADS-box基因第33-34页
   ·双子叶植物的MADS-box基因第34-36页
   ·裸子植物的MADS-box基因第36-38页
 第五节 植物MADS-box基因研究与农作物改良第38-45页
   ·果实成熟的调控第39-40页
   ·MADS-box基因与植物性状的改良第40-45页
     ·植物性状的种间转移第40页
     ·重瓣花的生产第40-41页
     ·开花时间的调节第41页
     ·不育型植株的产生第41-42页
     ·通过改变转录因子的表达活性修饰植物的形态发生第42-45页
第二章 材料与方法第45-64页
   ·实验材料第45-46页
     ·本工作所用菌株第45页
     ·与本文有关的载体第45-46页
     ·植物材料第46页
   ·仪器及药品预处理第46-47页
     ·仪器处理第46-47页
     ·试剂准备第47页
   ·棉花RNA提取的热硼酸法第47-48页
     ·溶液配制第47页
     ·提取步骤第47-48页
   ·棉花RNA提取的酚-SDS法第48-49页
     ·溶液配制第48-49页
     ·提取步骤第49页
   ·cDNA文库构建第49-56页
     ·试剂及培养基制备第49-51页
     ·cDNA第一链的合成第51-52页
     ·cDNA第二链的合成第52页
     ·Proteinase K和SfiI消化第52-53页
     ·cDNA纯化第53页
     ·载体连接第53页
     ·连接产物的包装第53-54页
     ·噬菌体平板的铺制以及文库滴度测定第54-56页
   ·Northern杂交第56-59页
     ·DIG-DNA探针的标记第56页
     ·DNA转移和固定第56-57页
     ·分子杂交第57-58页
     ·免疫学检测第58-59页
   ·质粒DNA的小量提取第59-60页
   ·DNA的限制性酶切反应第60页
   ·目的DNA片段的电泳回收第60-61页
   ·外源片段与质粒DNA的连接反应第61页
   ·大肠杆菌感受态细胞的制备第61页
   ·质粒DNA转化大肠杆菌第61-62页
   ·MADS-box结构域引物设计第62页
   ·RT-PCR分析第62-64页
     ·反转录反应液组成及反应条件第62-63页
     ·PCR反应第63-64页
第三章 结果与分析第64-91页
   ·两种棉花总RNA提取方法比较第64-66页
     ·总RNA的紫外分光光度分析第64-65页
     ·棉花总RNA的快速琼脂糖凝胶分析第65-66页
   ·花后10天棉铃外壳cDNA文库的构建第66-78页
     ·cDNA第一链的合成第67页
     ·cDNA第二链的合成第67-68页
     ·文库分析第68-70页
       ·滴度测定第68-69页
       ·cDNA文库的滴度、重组率分析第69-70页
     ·λ噬菌体的提取第70页
     ·λ噬菌体DNA的PCR扩增第70-72页
     ·231和235的序列查询与比对第72-76页
       ·231的序列及功能预测第72-74页
       ·235的序列及其功能第74-76页
     ·棉铃高丰度表达基因片段在棉花各组织部位Northern杂交分析第76-78页
   ·棉花MADS-box基因保守片段的RT-PCR克隆与分析第78-91页
     ·棉花MADS-box基因保守片段的RT-PCR克隆第78-79页
     ·棉花MADS-box基因保守片段序列比对分析第79-82页
     ·MADS-box保守区系统进化树分析第82-84页
     ·棉花MADS-box基因MADS保守区代表基因分类及特点推测第84-85页
     ·部分MADS-box片段的5’-RACE克隆及分析第85-91页
       ·棉花繁殖器官基因的5’-RACE克隆第85-86页
       ·棉花繁殖器官基因克隆基因的序列分析第86-89页
       ·基因在棉花各组织器官的表达研究第89-91页
第四章 讨论第91-96页
本研究的创新点及结论第96-97页
参考文献第97-111页
附录第111-113页
致谢第113-114页
作者简历及在读期间发表学术论文第114页

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