小麦硬度主效基因pinA和pinB植物高效表达载体的构建
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第7-8页 |
| 文献综述 | 第8-26页 |
| 1 小麦籽粒硬度的形成 | 第8-10页 |
| 2 硬度的测试方法 | 第10-11页 |
| ·粒度指数 | 第10页 |
| ·近红外仪 | 第10-11页 |
| ·单籽粒硬度仪 | 第11页 |
| 3 角质与硬度 | 第11页 |
| 4 小麦籽粒硬度的经典遗传学研究 | 第11-12页 |
| 5 Friabilin蛋白 | 第12-14页 |
| 6 Puroindolines蛋白 | 第14-20页 |
| ·特点 | 第15-16页 |
| ·硬度的突变类型 | 第16-18页 |
| ·将来应进一步开展的研究 | 第18-20页 |
| 7 基因表达调控元件的作用及载体构建策略 | 第20-24页 |
| ·启动子 | 第20-22页 |
| ·终止子 | 第22页 |
| ·内含子 | 第22页 |
| ·Ω和Kozak序列 | 第22-23页 |
| ·poly(A)序列 | 第23页 |
| ·表达载体的构建策略 | 第23-24页 |
| 8 本研究的目的及意义 | 第24-26页 |
| 材料与方法 | 第26-34页 |
| 1 实验材料: | 第26-27页 |
| ·基本质粒载体 | 第26页 |
| ·菌株 | 第26页 |
| ·小麦材料 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·生化试剂 | 第26-27页 |
| ·PCR引物 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-34页 |
| ·酚/氯仿大量法提取、纯化基因组总DNA | 第27-28页 |
| ·PCR扩增 | 第28-29页 |
| ·回收 | 第29页 |
| ·酶切 | 第29-30页 |
| ·连接 | 第30-31页 |
| ·质粒DNA转化大肠杆菌 | 第31-32页 |
| ·克隆子的快速鉴定 | 第32页 |
| ·提取质粒DNA | 第32-34页 |
| 结果与分析 | 第34-49页 |
| 1 pinA和pinB基因克隆 | 第34-39页 |
| ·pinA和pinB的克隆过程 | 第34页 |
| ·提取、纯化基因组总DNA | 第34页 |
| ·pinA和pinB基因扩增结果 | 第34-35页 |
| ·pGEMPa、pGEMPb的酶切鉴定 | 第35-37页 |
| ·序列分析 | 第37-39页 |
| 2 基础质粒的酶切图谱及鉴定 | 第39-41页 |
| ·pG4AB的鉴定 | 第39-40页 |
| ·pAHC25的鉴定 | 第40-41页 |
| 3 植物表达载体的构建、鉴定、及其酶切图谱 | 第41-49页 |
| ·植物表达载体pUBPa构建、鉴定、及其酶切图谱 | 第41-44页 |
| ·植物表达载体pUBPb构建、鉴定、及其酶切图谱 | 第44-49页 |
| 讨论 | 第49-52页 |
| 1 pinA和pinB基因的克隆 | 第49页 |
| 2 硬度改良转基因研究 | 第49-50页 |
| 3 载体构建 | 第50-51页 |
| 4 前景预测及分析 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 附录 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
