渗透胁迫信号传导关键基因的克隆及DREB1A基因对水稻的遗传转化
| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-29页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第12-13页 |
| ·国内外文献综述 | 第13-27页 |
| ·植物抗渗透胁迫的分子机制 | 第13-20页 |
| ·植物抗渗透胁迫基因工程研究进展 | 第20-27页 |
| ·本研究的主要内容 | 第27-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-43页 |
| ·渗透胁迫信号传导关键基因的克隆 | 第29-33页 |
| ·试验材料 | 第29页 |
| ·试验方法 | 第29-33页 |
| ·植物表达载体构建 | 第33-36页 |
| ·试验材料 | 第33页 |
| ·试验方法 | 第33-36页 |
| ·水稻再生体系的建立 | 第36-38页 |
| ·试验材料 | 第36页 |
| ·试验方法 | 第36-38页 |
| ·农杆菌介导的DREB1A基因对水稻的遗传转化 | 第38-40页 |
| ·试验材料 | 第38页 |
| ·试验方法 | 第38-40页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第40-43页 |
| ·试验材料 | 第40-41页 |
| ·试验方法 | 第41-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-83页 |
| ·渗透胁迫信号传导关键基因的克隆 | 第43-56页 |
| ·抗盐水稻品种的筛选 | 第43页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第43页 |
| ·基因克隆PCR引物设计 | 第43-44页 |
| ·DREB2A基因的克隆 | 第44-46页 |
| ·osCDPK7基因的克隆 | 第46-47页 |
| ·osMSRMK2基因的克隆 | 第47-50页 |
| ·osMAPK4基因的克隆 | 第50-51页 |
| ·rd29A启动子序列分析 | 第51页 |
| ·DREB1A基因序列分析 | 第51-55页 |
| ·DREB2A基因序列分析 | 第55-56页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第56-74页 |
| ·植物表达载体卡盒的构建 | 第56-66页 |
| ·DREB1A基因植物表达载体的构建 | 第66-70页 |
| ·DREB2A基因植物表达载体的构建 | 第70-74页 |
| ·重组质粒导入根癌农杆菌 | 第74页 |
| ·水稻再生体系建立 | 第74-78页 |
| ·2，4-D浓度对愈伤组织诱导的影响 | 第74-75页 |
| ·基因型对愈伤组织诱导的影响 | 第75-76页 |
| ·琼脂及蔗糖浓度对愈伤组织状态的影响 | 第76页 |
| ·PGR对不定芽分化的影响 | 第76-77页 |
| ·基因型对不定芽分化的影响 | 第77页 |
| ·再生植株的驯化移栽 | 第77-78页 |
| ·农杆菌介导的DREB1A基因对水稻的遗传转化 | 第78-81页 |
| ·PPT筛选压力的确定 | 第78-79页 |
| ·影响遗传转化主要因素的探讨 | 第79-80页 |
| ·抗性芽筛选及再生 | 第80-81页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第81-83页 |
| ·植物DNA小量提取方法的建立 | 第81页 |
| ·PCR检测反应条件的确定 | 第81-82页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第82-83页 |
| 4 讨论 | 第83-87页 |
| 5 结论 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-99页 |
| 图板说明 | 第99-104页 |
| 附录 | 第104-122页 |
| 攻读博士学位期间所承担的科研课题和发表的学术论文 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
