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棉花抗黄萎病相关基因GhCyP、GhDAHPS、GhCCoAOMT的功能研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 引言第9-14页
   ·我国棉花黄萎病的危害现状第9页
   ·植物的抗病机制及遗传基础第9-10页
   ·植物的抗病基因和防卫基因第10-11页
   ·抗病相关基因在棉花基因工程中的应用第11-13页
   ·本研究的目的和意义第13-14页
2 材料与方法第14-30页
   ·材料和试剂第14页
     ·植物材料和病原菌第14页
     ·菌种和质粒第14页
     ·试剂和内切酶第14页
   ·试验方法第14-30页
     ·相对定量Real-time 表达分析第14-17页
     ·GhCyP 基因真核超表达载体的构建第17-19页
     ·GhCCoAOMT 基因真核超表达载体的构建第19-21页
     ·GhDAHPS 基因真核超表达载体的构建第21-23页
     ·真核表达载体的农杆菌转化第23页
     ·Floral dip 法转化拟南芥第23-24页
     ·拟南芥阳性植株筛选和分子检测第24-26页
     ·GhCyP、GhDAHPS、GhCCAOMT 基因花粉管通道法转化通道法转化棉花第26-27页
     ·转GhCyP 基因拟南芥抗黄萎病功能初步验证第27页
     ·GhCyP 重组蛋白对黄萎病菌的抑菌活性分析第27-30页
3 结果与分析第30-41页
   ·GhCyP、GhCCoAOMT、GhDAHPS 基因的表达分析第30-32页
     ·棉花总RNA 的提取与cDNA 的合成第30页
     ·黄萎病菌胁迫下GhCyP 基因在不同抗性品种中的表达第30-31页
     ·黄萎病菌胁迫下GhDAHPS 基因在不同抗性品种中的表达差异第31-32页
     ·黄萎病胁迫下GhCCAOMT 基因在不同抗性品种中的表达差异第32页
   ·GhCyP、GhCCoAOMT、GhDAHPS 真核表达载体的构建第32-35页
     ·GhCyP 基因表达载体的构建第32-33页
     ·GhCCoAOMT 和GhDAHPS 基因真核表达载体的构建第33-35页
   ·GhCyP、GhCCoAOMT、GhDAHPS 基因的拟南芥转化及筛选检测第35-36页
     ·GhCyP 基因的拟南芥筛选及分子检测第35页
     ·转GhCCoAOMT 基因和GhDAHPS 基因的拟南芥筛选及分子检测第35-36页
   ·GhCyP、GhCCoAOMT、GhDAHPS 基因花粉管通道法转化棉花第36-37页
   ·转GhCyP 基因拟南芥的抗黄萎病功能分析第37-39页
   ·GhCyP 重组蛋白对黄萎病菌的抑菌活性分析第39-41页
     ·重组蛋白的纯化及肽脯氨酰顺反异构酶活性分析第39-40页
     ·GhCyP 重组蛋白对棉花黄萎病菌的抑制活性第40-41页
4 讨论第41-44页
   ·GhCyP、GhCCoAOMT、GhDAHPS 基因表达分析第41-42页
   ·GhCyP 基因功能的初步验证第42-44页
5 结论第44-45页
参考文献第45-51页
附录Ⅰ:试验所用载体图第51-52页
附录Ⅱ:试验中所用试剂配方第52-54页
在读期间发表的学术论文第54-55页
作者简历第55-56页
致谢第56-57页

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