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柑桔转基因成分精准检测技术研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 文献综述第11-25页
     ·转基因作物发展概况第11页
     ·转基因作物的安全性争论及转基因产品管理制度第11-13页
       ·转基因作物的潜在安全性问题第11-12页
       ·世界各国政府对转基因产品的管理制度第12-13页
     ·植物转基因成分检测方法第13-21页
       ·基于核酸水平的检测第13-19页
       ·基于蛋白质水平的检测第19-20页
       ·几种常用转基因检测方法比较第20-21页
     ·柑桔转基因研究概况第21-25页
       ·柑桔第21页
       ·柑桔转基因方法第21-22页
       ·柑桔转基因成分检测第22-25页
第二章 引言第25-27页
     ·研究背景及意义第25-26页
     ·技术路线第26-27页
第三章 柑桔转基因成分多重PCR定性检测体系的建立第27-39页
     ·材料第27页
     ·仪器与试剂第27-28页
       ·主要仪器第27页
       ·试剂第27页
       ·常用溶液第27-28页
     ·方法第28-32页
       ·MPCR引物设计第28页
       ·转基因柑桔叶片总DNA的提取第28-29页
       ·MPCR扩增及电泳检测第29页
       ·最佳退火温度的确定第29-30页
       ·最佳引物浓度比例组合的确定第30页
       ·最佳PCR组分水平的确定第30页
       ·最佳延伸温度及循环参数的确定第30页
       ·转基因成分最小检测量水平的确定第30页
       ·转基因成分可检测最低混入量水平的确定第30-32页
       ·利用建立的MPCR体系检测转基因柑桔第32页
     ·结果与分析第32-39页
       ·不同退火温度对MPCR的影响第32-33页
       ·不同的引物浓度比例对MPCR的影响第33-34页
       ·不同的PCR组分水平对MPCR的影响第34-35页
       ·不同的延伸温度及循环参数对MPCR的影响第35-36页
       ·转基因成分最小检测量水平的确定第36页
       ·转基因成分可检测最低混入量水平的确定第36-37页
       ·转基因柑桔的MPCR检测第37-39页
第四章 柑桔转基因成分定量检测体系的建立第39-51页
     ·材料第39页
     ·仪器与试剂第39页
       ·主要仪器第39页
       ·主要试剂第39页
     ·方法第39-41页
       ·引物与探针的设计合成第39-40页
       ·转基因柑桔叶片总DNA的提取第40页
     ·实时荧光定量PCR反应体系第40页
       ·退火温度的优化第40页
       ·单重实时定量PCR检测体系的评价第40页
       ·多重实时定量PCR实验性能确定第40-41页
       ·双重实时荧光定量PCR检测体系的建立第41页
       ·双重实时定量PCR体系的评价第41页
     ·结果与分析第41-51页
       ·退火温度的选择第41-43页
       ·单重实时荧光定量PCR检测结果第43-44页
       ·双重实时定量PCR体系性能评价第44-46页
       ·标准曲线的绘制第46-48页
       ·双重实时定量PCR体系的评价第48-51页
第五章 讨论第51-53页
第六章 小结第53-55页
参考文献第55-61页
致谢第61页

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