| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第1章 水稻Bel基因打靶载体的构建及转化 | 第9-46页 |
| ·引言 | 第9-25页 |
| ·植物基因工程 | 第9-14页 |
| ·抗除草剂植物基因工程 | 第9-10页 |
| ·抗虫植物基因工程 | 第10页 |
| ·抗病植物基因工程 | 第10-11页 |
| ·抗逆境转基因工程 | 第11-12页 |
| ·植物基因工程中存在的问题及展望 | 第12-14页 |
| ·基因打靶技术 | 第14-21页 |
| ·基因打靶机制 | 第14-15页 |
| ·基因打靶策略 | 第15-17页 |
| ·基因打靶过程 | 第17-18页 |
| ·影响打靶效率的因素 | 第18-19页 |
| ·植物基因打靶技术的发展 | 第19-20页 |
| ·植物基因打靶的应用 | 第20-21页 |
| ·水稻苯达松敏感致死突变基因的研究 | 第21-24页 |
| ·水稻苯达松敏感致死性突变材料 | 第21-22页 |
| ·水稻苯达松敏感致死突变基因的遗传学研究 | 第22页 |
| ·水稻苯达松敏感致死突变基因的定位及相关研究 | 第22-23页 |
| ·苯达松敏感致死基因在水稻杂交制种中的应用 | 第23-24页 |
| ·本实验的目的和意义 | 第24-25页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·载体与菌株 | 第25页 |
| ·主要酶或试剂 | 第25页 |
| ·细菌培养基 | 第25页 |
| ·植物材料 | 第25-26页 |
| ·水稻培养基和营养液 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-33页 |
| ·水稻叶片基因组DNA提取 | 第26-27页 |
| ·水稻Bel基因区域PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·连接反应 | 第28页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第28-29页 |
| ·质粒的转化 | 第29页 |
| ·菌体PCR | 第29页 |
| ·提取质粒 | 第29页 |
| ·限制性内切酶酶切 | 第29-30页 |
| ·左右同源臂分别为2 kb打靶载体的构建 | 第30页 |
| ·载体pJL9的构建 | 第30-31页 |
| ·农杆菌EHA105的电激转化 | 第31页 |
| ·农杆菌介导水稻Bel基因pRB2打靶载体的转化 | 第31-32页 |
| ·无菌苗移栽 | 第32页 |
| ·抗性水稻PCR检测 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-44页 |
| ·pRB2打靶载体构建 | 第33-37页 |
| ·同源臂PCR扩增与克隆载体构建 | 第35-36页 |
| ·中间载体构建 | 第36页 |
| ·打靶载体构建 | 第36-37页 |
| ·中间载体pJL9构建 | 第37-40页 |
| ·PCR扩增与同源臂克隆载体构建 | 第37-39页 |
| ·中间载体pJL7、pJL8和pJL9构建 | 第39-40页 |
| ·农杆菌介导pRB2打靶 | 第40-41页 |
| ·抗性植株PCR鉴定 | 第41-44页 |
| ·转化体鉴定 | 第41页 |
| ·中靶植株鉴定 | 第41-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| ·载体构建 | 第44页 |
| ·打靶材料的选择 | 第44-45页 |
| ·打靶外植体分化 | 第45页 |
| ·展望 | 第45-46页 |
| 第2章 农杆菌介导的世锦B悬浮细胞团转基因体系的初步建立 | 第46-57页 |
| ·引言 | 第46-51页 |
| ·植物转基因技术 | 第46-49页 |
| ·PEG(聚乙二醇)介导法 | 第46页 |
| ·电激法 | 第46-47页 |
| ·花粉管通道法 | 第47页 |
| ·基因枪法 | 第47-48页 |
| ·农杆菌介导法 | 第48-49页 |
| ·运用于水稻悬浮细胞团转化的转基因技术 | 第49-50页 |
| ·本实验的目的和意义 | 第50-51页 |
| ·实验材料 | 第51页 |
| ·菌株与载体 | 第51页 |
| ·植物材料 | 第51页 |
| ·培养基 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-53页 |
| ·悬浮细胞团的获得 | 第51-52页 |
| ·转化 | 第52页 |
| ·GUS活性检测与抗性愈伤筛选 | 第52页 |
| ·细胞团分化 | 第52-53页 |
| ·抗性愈伤再生 | 第53页 |
| ·转化植株PCR鉴定 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-56页 |
| ·头孢霉素和羧苄青霉素的抑菌效果 | 第53-54页 |
| ·不同转化方式对转化效率的影响 | 第54页 |
| ·不同分化培养基的分化效率 | 第54-55页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| 第3章 结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 图版 | 第64页 |