RACE法获取顶冰花CBF1基因及其抗冻性质研究
| 内容提要 | 第1-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-27页 |
| 1. CBF1与植物冷胁迫 | 第9-16页 |
| 2. 侧金盏花研究进展 | 第16-19页 |
| 3. RACE技术的原理 | 第19-27页 |
| 第二章 实验仪器及试剂 | 第27-32页 |
| 1. 实验仪器 | 第27页 |
| 2. 实验试剂与溶液的配制 | 第27-32页 |
| (1) 培养基的配制 | 第27-28页 |
| (2) 缓冲液配制 | 第28-29页 |
| (3) 酶与Markers | 第29-30页 |
| (4) 其它试剂 | 第30页 |
| (5) 菌株和质粒 | 第30页 |
| (6) 引物合成 | 第30-31页 |
| (7) 生物信息学软件 | 第31-32页 |
| 第三章 实验方法及流程 | 第32-45页 |
| 1. 总RNA提取 | 第32-34页 |
| 2. 总RNA的反转录 | 第34页 |
| 3. RNA的甲醛变性电泳 | 第34页 |
| 4. SMART RACE | 第34-39页 |
| 5. OMEGA琼脂糖凝胶回收试剂盒操作方案 | 第39页 |
| 6. 目的DNA片段与载体DNA片段的连接 | 第39-40页 |
| 7. OMEGAPCR产物纯化试剂盒操作方案 | 第40页 |
| 8. 电转化感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| 9. 重组质粒的电转化 | 第41页 |
| 10. 重组质粒的提取 | 第41-42页 |
| 11. 重组质粒的筛选 | 第42页 |
| 12. 阳性重组质粒的测序 | 第42页 |
| 13. 荧光定量PCR | 第42-45页 |
| 第四章 实验结果 | 第45-55页 |
| 1. 总RNA提取 | 第45页 |
| 2. 获取侧金盏花CBF1基因的DBD | 第45-47页 |
| 3. 侧金盏花CBF1的3'RACE | 第47-50页 |
| 4. 侧金盏花CBF1的5'RACE | 第50-51页 |
| 5. 序列拼接和比较 | 第51-53页 |
| 6. 荧光定量PCR | 第53-55页 |
| 第五章 讨论 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 摘要 | 第63-65页 |
| Abstract | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 导师简介 | 第68页 |
