| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-24页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶 | 第13-19页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶在果实软化中的作用 | 第13-14页 |
| ·PG 基因功能的多样性 | 第14-16页 |
| ·PG 与器官的脱落和种子发育 | 第14-15页 |
| ·PG 与花粉授粉 | 第15页 |
| ·PG 与病害发生 | 第15-16页 |
| ·PG 基因启动子功能研究 | 第16页 |
| ·其它功能 | 第16页 |
| ·PG 基因及表达调控 | 第16-18页 |
| ·植物激素对多聚半乳糖醛酸酶的影响 | 第18-19页 |
| ·乙烯对多聚半乳糖醛酸酶的影响 | 第18-19页 |
| ·ABA 对多聚半乳糖醛酸酶的影响 | 第19页 |
| ·多胺对多聚半乳糖醛酸酶的影响 | 第19页 |
| ·其他激素对多聚半乳糖醛酸酶的影响 | 第19页 |
| ·1-MCP 作用机理及生理效应 | 第19-22页 |
| ·1-MCP 的作用机理 | 第20页 |
| ·1-MCP 的生理效应 | 第20-22页 |
| ·对乙烯释放和呼吸作用的影响 | 第20-21页 |
| ·对色泽、风味及硬度的影响 | 第21页 |
| ·对可滴定酸、氨基酸、可溶性固形物等的影响 | 第21页 |
| ·对生理病害的影响 | 第21-22页 |
| ·对酶活性的影响 | 第22页 |
| ·本研究的目的意义 | 第22-24页 |
| 2. 材料与方法 | 第24-49页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌株与质粒 | 第24页 |
| ·酶及生化试剂 | 第24页 |
| ·PCR 引物 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-49页 |
| ·材料处理 | 第24-25页 |
| ·乙烯释放速率的测定 | 第25页 |
| ·果实硬度的测量 | 第25页 |
| ·呼吸速率的测定 | 第25页 |
| ·RNA的提取方法 | 第25-28页 |
| ·RNA 反转录 | 第28-29页 |
| ·苹果PG酶基因的分离 | 第29-34页 |
| ·PCR扩增PG酶的cDNA | 第29-30页 |
| ·PCR产物的回收纯化 | 第30-31页 |
| ·连接反应 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·转化及克隆筛选 | 第32页 |
| ·碱法小量提取质粒 DNA | 第32-34页 |
| ·Northern杂交 | 第34-38页 |
| ·配制药品 | 第34页 |
| ·甲醛变性胶电泳 | 第34-36页 |
| ·转膜 | 第36页 |
| ·预杂交 | 第36-37页 |
| ·探针的制备 | 第37-38页 |
| ·植物反义表达载体的构建及烟草转化 | 第38-49页 |
| ·PG酶基因片段扩增 | 第38-39页 |
| ·连接反应及转化 | 第39-40页 |
| ·碱法大量提取质粒DNA | 第40-41页 |
| ·筛选和鉴定 | 第41-42页 |
| ·转化，酶切，回收 | 第42-44页 |
| ·目的片段插入到改造过的PBI121质粒载体 | 第44页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备及转化 | 第44-45页 |
| ·转基因烟草的 PCR 检测 | 第45-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-59页 |
| ·1-MCP 处理对青香蕉苹果乙烯释放速率的影响 | 第49-50页 |
| ·1-MCP 处理对苹果果实硬度的影响 | 第50页 |
| ·1-MCP 处理对苹果果实呼吸强度的影响 | 第50-51页 |
| ·苹果果皮 RNA 的提取及反转录 | 第51-53页 |
| ·PG 基因的克隆 | 第53页 |
| ·PG 基因反义表达载体的构建及烟草转化研究 | 第53-57页 |
| ·PBI 质粒载体的酶切 | 第54页 |
| ·目的片段的 PCR 扩增 | 第54-55页 |
| ·重组质粒的 PCR 和酶切鉴定 | 第55-56页 |
| ·表达载体pBI-PG 的 PCR 及酶切鉴定 | 第56页 |
| ·转基因烟草的 PCR 检测 | 第56-57页 |
| ·northern 分析 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-62页 |
| ·RNA 提取方法的改进 | 第59-60页 |
| ·苹果果实硬度变化、乙烯释放、呼吸强度与 PG基因表达之 间的联系 | 第60页 |
| ·反义表达载体的构建和烟草转化 | 第60-61页 |
| ·进一步研究的设想 | 第61-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读硕士学位期间完成的论文 | 第75页 |