中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
名词缩写 | 第6-7页 |
目录 | 第7-9页 |
第一章 引言 | 第9-19页 |
·镁离子的生化特性及生理功能 | 第9-10页 |
·镁离子的生化特性 | 第9-10页 |
·镁离子的生理功能 | 第10页 |
·镁离子转运体研究的现状 | 第10-13页 |
·原核生物的镁离子转运体 | 第10-12页 |
·真核生物的镁离子转运体 | 第12-13页 |
·学位论文的立题依据和技术路线 | 第13-19页 |
·立题依据 | 第13-18页 |
·技术路线 | 第18-19页 |
第二章 实验材料和常用试剂 | 第19-24页 |
·实验材料和试剂 | 第19-22页 |
·植物材料 | 第19页 |
·细菌菌株与质粒载体 | 第19页 |
·引物及测序 | 第19页 |
·酶、各类试剂及试剂盒 | 第19页 |
·培养基及溶液的配制 | 第19-22页 |
·常用溶液 | 第22-23页 |
·植物总DNA提取溶液(CTAB法) | 第22页 |
·植物总RNA提取溶液 | 第22页 |
·质粒提取液 | 第22页 |
·常用抗生素(储存浓度) | 第22页 |
·其它常用缓冲溶液 | 第22-23页 |
·主要实验仪器 | 第23-24页 |
第三章 实验方法和过程 | 第24-40页 |
·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第24页 |
·载体构建 | 第24-25页 |
·重组质粒的转化(热激法)、阳性克隆的筛选与鉴定 | 第25-26页 |
·ATMGT10基因功能验证—MM281互补实验 | 第26-27页 |
·pTrc99A::AtMGT10载体构建 | 第26页 |
·Mg~(2+)转运体功能互补实验 | 第26-27页 |
·细菌生长曲线绘制 | 第27页 |
·农杆菌介导的拟南芥转化(花粉管侵染法) | 第27-29页 |
·农杆菌GV3101感受态的制备 | 第27页 |
·农杆菌GV3101转化及阳性克隆筛选 | 第27-28页 |
·植物材料的预处理 | 第28页 |
·花粉管侵染法转化拟南芥 | 第28-29页 |
·转基因植株的鉴定及表型分析 | 第29-30页 |
·拟南芥种子灭菌 | 第29页 |
·准转基因植株培养 | 第29页 |
·CTAB法提取基因组DNA | 第29-30页 |
·转基因植株PCR鉴定 | 第30页 |
·转基因植株表型分析 | 第30页 |
·叶脉黄化株系(Y2)叶绿素含量分析 | 第30-31页 |
·拟南芥材料培养及强光处理 | 第30页 |
·叶绿素含量测定 | 第30-31页 |
·叶脉黄化株系(Y2)基因表达量分析 | 第31-32页 |
·酵母双杂交筛选 | 第32-40页 |
·酵母双杂的pGBKT7::AtMGT10(BD)—Y10载体构建 | 第32-33页 |
·诱饵基因转化筛库宿主菌AH109 | 第33-34页 |
·含Bait基因质粒的AH109保种 | 第34-35页 |
·Bait基因的自激活检测 | 第35-36页 |
·诱饵基因筛库 | 第36-37页 |
·抽提酵母质粒 | 第37-38页 |
·酵母质粒的扩增 | 第38-40页 |
第四章 结果和分析 | 第40-53页 |
·载体构建中阳性克隆的筛选与鉴定 | 第40-41页 |
·pBI121::AtMGT10阳性克隆筛选及鉴定 | 第40页 |
·pTrc99A::AtMGT10阳性克隆筛选及鉴定 | 第40-41页 |
·农杆菌GV3101转化及阳性克隆筛选及鉴定 | 第41页 |
·ATMGT10基因功能验证—MM281互补实验 | 第41-43页 |
·pTrc99A::AtMGT10载体构建 | 第41-42页 |
·mm281互补实验 | 第42-43页 |
·转基因植株的鉴定及表型分析 | 第43-45页 |
·叶脉黄化株系(Y2)叶绿素含量分析 | 第45-47页 |
·叶脉黄化株系(Y2)基因表达量分析 | 第47-48页 |
·酵母双杂交初步筛选 | 第48-53页 |
·酵母双杂的pGBKT7::AtMGT10(BD)—Y10载体构建 | 第48页 |
·酵母双杂交初步筛选 | 第48-53页 |
第五章 小结与展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
致谢 | 第58页 |