摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 前言 | 第13-30页 |
·日本血吸虫简介 | 第13-18页 |
·日本血吸虫的生活史 | 第13-15页 |
·日本血吸虫病在我国的流行及防治 | 第15-16页 |
·血吸虫致病机理 | 第16-18页 |
·血吸虫病的治疗 | 第18-19页 |
·血吸虫疫苗的研究 | 第19-23页 |
·虫源性疫苗 | 第19-20页 |
·分子疫苗 | 第20-23页 |
·体被蛋白的研究 | 第23-29页 |
·体被蛋白结构 | 第23-24页 |
·体被蛋白功能 | 第24-25页 |
·一些重要的膜相关蛋白 | 第25-29页 |
·展望 | 第29-30页 |
第二章 日本血吸虫 Sj29 基因的克隆与表达 | 第30-52页 |
·材料 | 第30-34页 |
·实验动物 | 第30页 |
·日本血吸虫与尾蚴 | 第30-31页 |
·文库、质粒及菌种 | 第31页 |
·试剂 | 第31页 |
·引物 | 第31-32页 |
·主要仪器设备 | 第32页 |
·试剂配制 | 第32-34页 |
·方法 | 第34-41页 |
·Sj29 基因克隆与鉴定 | 第34-37页 |
·Sj29 基因生物信息学分析 | 第37页 |
·Sj29 基因原核表达质粒的构建 | 第37-39页 |
·Sj29 基因的诱导表达 | 第39-40页 |
·重组融合蛋白的纯化 | 第40-41页 |
·融合蛋白rSj29 的Western blotting 鉴定 | 第41页 |
·结果 | 第41-49页 |
·Sj29 基因克隆的测序结果与同源性分析 | 第41-44页 |
·Sj29 基因编码蛋白的生物信息学分析 | 第44-46页 |
·重组原核表达质粒Sj29-pET28c | 第46-47页 |
·Sj29 基因在大肠杆菌中表达和纯化 | 第47-49页 |
·表达产物抗原性的鉴定 | 第49页 |
·讨论 | 第49-52页 |
第三章 Sj29 重组蛋白的动物免疫实验 | 第52-58页 |
·材料与方法 | 第52-54页 |
·实验材料 | 第52页 |
·免疫抗原制备 | 第52-53页 |
·重组蛋白免疫BALB/ c 小鼠试验 | 第53-54页 |
·统计学处理 | 第54页 |
·结果 | 第54-57页 |
·重组蛋白免疫动物 | 第54-56页 |
·检测小鼠血清抗rSj29 IgG 水平 | 第56-57页 |
·讨论 | 第57-58页 |
第四章 日本血吸虫 Sj29 基因表达时相和组织定位 | 第58-70页 |
·材料 | 第58-59页 |
·日本血吸虫(中国大陆株)童虫和成虫 | 第58页 |
·仪器与试剂 | 第58-59页 |
·荧光定量PCR 引物 | 第59页 |
·荧光实时定量PCR | 第59-63页 |
·总 RNA 的抽提 | 第59-60页 |
·去除基因组DNA | 第60页 |
·反转录PCR | 第60-61页 |
·Sj29 和 18sRNA 标准模板的制备 | 第61-62页 |
·Real-time PCR | 第62-63页 |
·Sj29 的免疫组织定位 | 第63-64页 |
·免疫血清的制备 | 第63页 |
·Sj29 在Sj 虫体组织分布定位 | 第63-64页 |
·结果 | 第64-68页 |
·Sj29 的荧光定量结果分析 | 第64-66页 |
·Sj29 在日本血吸虫虫体组织分布定位观察 | 第66-68页 |
·讨论 | 第68-70页 |
第五章 全文结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-81页 |
附录 | 第81-85页 |
附录1:氨基酸缩写一览表 | 第81-82页 |
附录2:PMDTM18-T 载体图谱和多克隆位点区 | 第82-83页 |
附录3:PET-28A-C(+)载体图谱和多克隆位点区 | 第83-84页 |
附录4:TAKARA SYBR GREEN I 荧光试剂盒原理 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
作者简历 | 第86页 |