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日本血吸虫表膜蛋白Sj29的鉴定和保护性效果评估

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 前言第13-30页
   ·日本血吸虫简介第13-18页
     ·日本血吸虫的生活史第13-15页
     ·日本血吸虫病在我国的流行及防治第15-16页
     ·血吸虫致病机理第16-18页
   ·血吸虫病的治疗第18-19页
   ·血吸虫疫苗的研究第19-23页
     ·虫源性疫苗第19-20页
     ·分子疫苗第20-23页
   ·体被蛋白的研究第23-29页
     ·体被蛋白结构第23-24页
     ·体被蛋白功能第24-25页
     ·一些重要的膜相关蛋白第25-29页
   ·展望第29-30页
第二章 日本血吸虫 Sj29 基因的克隆与表达第30-52页
   ·材料第30-34页
     ·实验动物第30页
     ·日本血吸虫与尾蚴第30-31页
     ·文库、质粒及菌种第31页
     ·试剂第31页
     ·引物第31-32页
     ·主要仪器设备第32页
     ·试剂配制第32-34页
   ·方法第34-41页
     ·Sj29 基因克隆与鉴定第34-37页
     ·Sj29 基因生物信息学分析第37页
     ·Sj29 基因原核表达质粒的构建第37-39页
     ·Sj29 基因的诱导表达第39-40页
     ·重组融合蛋白的纯化第40-41页
     ·融合蛋白rSj29 的Western blotting 鉴定第41页
   ·结果第41-49页
     ·Sj29 基因克隆的测序结果与同源性分析第41-44页
     ·Sj29 基因编码蛋白的生物信息学分析第44-46页
     ·重组原核表达质粒Sj29-pET28c第46-47页
     ·Sj29 基因在大肠杆菌中表达和纯化第47-49页
     ·表达产物抗原性的鉴定第49页
   ·讨论第49-52页
第三章 Sj29 重组蛋白的动物免疫实验第52-58页
   ·材料与方法第52-54页
     ·实验材料第52页
     ·免疫抗原制备第52-53页
     ·重组蛋白免疫BALB/ c 小鼠试验第53-54页
     ·统计学处理第54页
   ·结果第54-57页
     ·重组蛋白免疫动物第54-56页
     ·检测小鼠血清抗rSj29 IgG 水平第56-57页
   ·讨论第57-58页
第四章 日本血吸虫 Sj29 基因表达时相和组织定位第58-70页
   ·材料第58-59页
     ·日本血吸虫(中国大陆株)童虫和成虫第58页
     ·仪器与试剂第58-59页
     ·荧光定量PCR 引物第59页
   ·荧光实时定量PCR第59-63页
     ·总 RNA 的抽提第59-60页
     ·去除基因组DNA第60页
     ·反转录PCR第60-61页
     ·Sj29 和 18sRNA 标准模板的制备第61-62页
     ·Real-time PCR第62-63页
   ·Sj29 的免疫组织定位第63-64页
     ·免疫血清的制备第63页
     ·Sj29 在Sj 虫体组织分布定位第63-64页
   ·结果第64-68页
     ·Sj29 的荧光定量结果分析第64-66页
     ·Sj29 在日本血吸虫虫体组织分布定位观察第66-68页
   ·讨论第68-70页
第五章 全文结论第70-71页
参考文献第71-81页
附录第81-85页
 附录1:氨基酸缩写一览表第81-82页
 附录2:PMDTM18-T 载体图谱和多克隆位点区第82-83页
 附录3:PET-28A-C(+)载体图谱和多克隆位点区第83-84页
 附录4:TAKARA SYBR GREEN I 荧光试剂盒原理第84-85页
致谢第85-86页
作者简历第86页

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