| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-17页 |
| 2 材料和方法 | 第17-30页 |
| ·试验材料 | 第17-18页 |
| ·供试玉米大斑病菌及酵母菌株 | 第17页 |
| ·供试载体 | 第17页 |
| ·供试培养基及溶液 | 第17-18页 |
| ·供试试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·试验方法 | 第18-30页 |
| ·玉米大斑病菌基因组DNA提取 | 第18-19页 |
| ·玉米大斑病菌总RNA提取方法及第一链cDNA的合成 | 第19-20页 |
| ·STK1 cDNA序列的PCR扩增 | 第20页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第20-21页 |
| ·PCR扩增产物的凝胶回收 | 第21页 |
| ·PCR扩增产物的克隆测序 | 第21-22页 |
| ·STK1基因的生物信息学分析 | 第22-23页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第23-26页 |
| ·酵母的遗传转化 | 第26-27页 |
| ·转化子的验证 | 第27页 |
| ·盐胁迫下酵母梯度生长试验 | 第27-28页 |
| ·盐胁迫下酵母生长速度的测定 | 第28页 |
| ·氧胁迫对酿酒酵母存活率的测定 | 第28页 |
| ·酵母甘油含量的测定 | 第28-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-44页 |
| ·玉米大斑病菌STK1基因的扩增 | 第30-32页 |
| ·玉米大斑病菌基因组DNA和总RNA的提取及cDNA的合成 | 第30页 |
| ·引物的设计 | 第30页 |
| ·STK1基因cDNA的扩增 | 第30-31页 |
| ·重组载体pMD19-T-STK1的PCR扩增和酶切检测 | 第31-32页 |
| ·STK1基因的生物信息学分析 | 第32-36页 |
| ·STK1基因cDNA全长的测序结果 | 第32-33页 |
| ·STK1基因编码产物同源性分析及保守结构域分析 | 第33-35页 |
| ·聚类分析 | 第35-36页 |
| ·表达载体的构建 | 第36-39页 |
| ·表达载体pVT102U的酶切验证 | 第36-37页 |
| ·STK1基因ORF及表达载体pVT102U的酶切 | 第37页 |
| ·pVT102U-STK1酵母表达载体的验证 | 第37-39页 |
| ·酿酒酵母的遗传转化及转化子的表型分析 | 第39-44页 |
| ·pVT102U及pVT102U-STK1的遗传转化 | 第39页 |
| ·转化子的PCR扩增鉴定 | 第39页 |
| ·酵母转化子的耐盐性 | 第39-41页 |
| ·STK1基因对钠盐的抵抗力 | 第41-43页 |
| ·氧胁迫对酵母生长的影响 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-48页 |
| ·MAP kinase的保守结构域 | 第44-45页 |
| ·利用酿酒酵母研究基因功能的特点 | 第45-47页 |
| ·Stk1的功能及应用展望 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第56-57页 |
| 作者简历 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附发表论文 | 第59-74页 |
