| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 1 绪论 | 第11-26页 |
| ·基因工程抗体的种类及特性 | 第11-15页 |
| ·抗体的基本结构 | 第11-12页 |
| ·基因工程重组抗体 | 第12-13页 |
| ·二硫键稳定Fv 抗体 | 第13-15页 |
| ·柑桔溃疡病及柑桔黄单胞菌 | 第15-23页 |
| ·柑桔溃疡病的发生与危害 | 第15-17页 |
| ·柑桔溃疡病菌及其种下分类变动 | 第17-19页 |
| ·柑桔溃疡病菌的基因组研究 | 第19-20页 |
| ·柑桔溃疡病菌的检疫检验技术 | 第20-23页 |
| ·研究的目的和意义 | 第23页 |
| ·研究目的 | 第23页 |
| ·研究的意义 | 第23页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第23-24页 |
| ·研究内容 | 第23-24页 |
| ·技术路线 | 第24页 |
| ·本研究的创新之处 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-38页 |
| ·供试菌株及载体 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第26-29页 |
| ·Xac-dsFv 基因的构建、克隆及表达 | 第29-33页 |
| ·VH 和VL 突变基因的构建 | 第29-30页 |
| ·VH 及VL 基因的克隆 | 第30-32页 |
| ·VH 与VL 的诱导表达 | 第32页 |
| ·VH/VL 的SDS-PAGE 及western-blot 分析 | 第32-33页 |
| ·Xac-dsFv 抗体的复性及纯化 | 第33-34页 |
| ·Xac-dsFv 抗体的稀释复性 | 第33页 |
| ·Xac-dsFv 抗体的纯化 | 第33-34页 |
| ·复性及纯化后Xac-dsFv 抗体的分析 | 第34页 |
| ·Xac-dsFv 抗体亲和力的测定 | 第34-36页 |
| ·柑桔溃疡病菌脂多糖的提取 | 第34-35页 |
| ·Biacore 检测Xac-dsFv 抗体的亲和力 | 第35-36页 |
| ·Xac-dsFv 抗体抗原特异性的测定 | 第36-37页 |
| ·Dot-blot 检测Xac-dsFv 抗体的抗原特异性特异性 | 第36页 |
| ·ELISA 检测Xac-dsFv 抗体的抗原特异性 | 第36-37页 |
| ·Xac-dsFv 抗体稳定性的测定 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-48页 |
| ·Xac-dsFv 基因的构建、克隆及表达 | 第38-41页 |
| ·VH 和VL 突变基因的构建 | 第38-39页 |
| ·VH 和VL 突变基因序列的测定 | 第39-40页 |
| ·VH 及VL 的表达及产物分析 | 第40-41页 |
| ·Xac-dsFv 抗体的复性及纯化 | 第41-43页 |
| ·Xac-dsFv 抗体的复性 | 第41-42页 |
| ·Xac-dsFv 抗体的纯化 | 第42页 |
| ·纯化后Xac-dsFv 抗体的分析 | 第42-43页 |
| ·Xac-dsFv 抗体亲和力的测定 | 第43-45页 |
| ·预偶联确定包被缓冲液最适pH 值 | 第43-44页 |
| ·Xac-dsFv 抗体在芯片表面的包被 | 第44页 |
| ·Xac-dsFv 抗体亲和力的测定 | 第44-45页 |
| ·Xac-dsFv 抗体特异性的测定 | 第45-46页 |
| ·Dot-blot 检测Xac-dsFv 抗体的特异性 | 第45页 |
| ·ELISA 检测Xac-dsFv 抗体的特异性 | 第45-46页 |
| ·Xac-dsFv 的稳定性检测 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| ·VH 与VL 突变基因的构建及表达 | 第48-49页 |
| ·VH 与VL 突变基因的构建 | 第48页 |
| ·VH 与VL 的包涵体表达 | 第48-49页 |
| ·VH 与VL 的复性及纯化 | 第49-50页 |
| ·Xac-dsFv 抗体的复性 | 第49页 |
| ·Xac-dsFv抗体的纯化 | 第49-50页 |
| ·Xac-dsFv 抗体的生物学活性检测 | 第50-51页 |
| ·Xac-dsFv 亲和力的测定 | 第50页 |
| ·Xac-dsFv 抗体特异性与稳定性的测定 | 第50-51页 |
| 5 结论及后续工作 | 第51-52页 |
| ·主要研究结论 | 第51页 |
| ·后续工作思路 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 附录 | 第60页 |
