提要 | 第1-10页 |
第1章 绪论 | 第10-24页 |
·选题的意义和目的 | 第10-11页 |
·问题的提出 | 第10-11页 |
·选题的意义和目的 | 第11页 |
·文献综述 | 第11-22页 |
·乳酸简介 | 第12-14页 |
·乳酸细菌 | 第14-17页 |
·乳酸脱氢酶 | 第17-18页 |
·乳酸菌鉴定的研究进展 | 第18-20页 |
·乳酸发酵菌种的研究进展 | 第20-22页 |
·本文的主要研究内容 | 第22-24页 |
第2章 嗜热乳酸菌的鉴定 | 第24-40页 |
·引言 | 第24页 |
·试验材料 | 第24-27页 |
·菌株 | 第24页 |
·质粒 | 第24页 |
·酶和试剂 | 第24-25页 |
·主要仪器 | 第25页 |
·相关试剂及培养基的制备方法 | 第25-27页 |
·试验方法 | 第27-32页 |
·菌种活化 | 第27页 |
·菌种生长曲线的测定 | 第27页 |
·菌种的初步鉴定 | 第27-28页 |
·基因组DNA 提取 | 第28页 |
·16S rDNA 序列同源性分析 | 第28-32页 |
·结果与分析 | 第32-39页 |
·菌BAE 0421 生长曲线的绘制 | 第32-33页 |
·菌种的常规鉴定 | 第33-35页 |
·基因组DN A 的提取 | 第35页 |
·16S rDNA 基因扩增 | 第35-36页 |
·PCR 产物的纯化 | 第36页 |
·16S rDNA 克隆子的筛选与鉴定 | 第36-37页 |
·16S rDNA 序列同源性分析 | 第37-39页 |
·本章小结 | 第39-40页 |
第3章 ldhL 基因的克隆及序列分析 | 第40-54页 |
·引言 | 第40页 |
·试验材料 | 第40-41页 |
·菌株和质粒 | 第40页 |
·酶和试剂 | 第40-41页 |
·相关试剂及培养基的制备方法 | 第41页 |
·试验方法 | 第41-44页 |
·菌BAE 0421 基因组DNA 的制备 | 第41页 |
·聚合酶链式反应 | 第41-42页 |
·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第42页 |
·PCR 产物的回收与纯化 | 第42页 |
·PCR 产物的克隆和测序 | 第42-43页 |
·序列分析 | 第43-44页 |
·结果与分析 | 第44-52页 |
·乳酸脱氢酶(ldhL)基因的扩增 | 第44页 |
·目的片段与克隆载体pMD 19-T 的连接及转化 | 第44-46页 |
·ldhL 基因片段的测序结果 | 第46-47页 |
·ldhL 基因片段的序列分析 | 第47-52页 |
·本章小结 | 第52-54页 |
第4章 ldhL 基因在大肠杆菌中的表达 | 第54-66页 |
·引言 | 第54-55页 |
·试验材料 | 第55-56页 |
·菌株和质粒 | 第55页 |
·酶和试剂 | 第55页 |
·相关试剂及培养基的制备方法 | 第55-56页 |
·主要仪器 | 第56页 |
·试验方法 | 第56-61页 |
·ldhL 基因表达载体的构建 | 第56-57页 |
·外源片段在大肠杆菌中的诱导表达 | 第57-58页 |
·表达产物的SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第58-59页 |
·L - 乳酸脱氢酶(ldhL)活力测定 | 第59-60页 |
·不同诱导条件对酶活力的影响 | 第60页 |
·质粒稳定性研究 | 第60-61页 |
·结果与分析 | 第61-65页 |
·L - 乳酸脱氢酶基因(ldhL )表达质粒的构建 | 第61-62页 |
·表达产物的SDS- PAGE 分析 | 第62-63页 |
·重组ldhL 活力测定分析 | 第63-65页 |
·不同诱导条件对酶活力的影响 | 第65页 |
·重组质粒pET - ldhL 稳定性分析 | 第65页 |
·本章小结 | 第65-66页 |
第5章 结论与展望 | 第66-68页 |
·结论 | 第66-67页 |
·嗜热乳酸菌的鉴定 | 第66页 |
·ldhL 基因的克隆及序列分析 | 第66-67页 |
·ldhL 基因在大肠杆菌中的表达 | 第67页 |
·展望 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
摘要 | 第75-78页 |
Abstract | 第78-80页 |