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一株嗜热乳酸菌的鉴定及L-乳酸脱氢酶基因的克隆表达

提要第1-10页
第1章 绪论第10-24页
   ·选题的意义和目的第10-11页
     ·问题的提出第10-11页
     ·选题的意义和目的第11页
   ·文献综述第11-22页
     ·乳酸简介第12-14页
     ·乳酸细菌第14-17页
     ·乳酸脱氢酶第17-18页
     ·乳酸菌鉴定的研究进展第18-20页
     ·乳酸发酵菌种的研究进展第20-22页
   ·本文的主要研究内容第22-24页
第2章 嗜热乳酸菌的鉴定第24-40页
   ·引言第24页
   ·试验材料第24-27页
     ·菌株第24页
     ·质粒第24页
     ·酶和试剂第24-25页
     ·主要仪器第25页
     ·相关试剂及培养基的制备方法第25-27页
   ·试验方法第27-32页
     ·菌种活化第27页
     ·菌种生长曲线的测定第27页
     ·菌种的初步鉴定第27-28页
     ·基因组DNA 提取第28页
     ·16S rDNA 序列同源性分析第28-32页
   ·结果与分析第32-39页
     ·菌BAE 0421 生长曲线的绘制第32-33页
     ·菌种的常规鉴定第33-35页
     ·基因组DN A 的提取第35页
     ·16S rDNA 基因扩增第35-36页
     ·PCR 产物的纯化第36页
     ·16S rDNA 克隆子的筛选与鉴定第36-37页
     ·16S rDNA 序列同源性分析第37-39页
   ·本章小结第39-40页
第3章 ldhL 基因的克隆及序列分析第40-54页
   ·引言第40页
   ·试验材料第40-41页
     ·菌株和质粒第40页
     ·酶和试剂第40-41页
     ·相关试剂及培养基的制备方法第41页
   ·试验方法第41-44页
     ·菌BAE 0421 基因组DNA 的制备第41页
     ·聚合酶链式反应第41-42页
     ·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳第42页
     ·PCR 产物的回收与纯化第42页
     ·PCR 产物的克隆和测序第42-43页
     ·序列分析第43-44页
   ·结果与分析第44-52页
     ·乳酸脱氢酶(ldhL)基因的扩增第44页
     ·目的片段与克隆载体pMD 19-T 的连接及转化第44-46页
     ·ldhL 基因片段的测序结果第46-47页
     ·ldhL 基因片段的序列分析第47-52页
   ·本章小结第52-54页
第4章 ldhL 基因在大肠杆菌中的表达第54-66页
   ·引言第54-55页
   ·试验材料第55-56页
     ·菌株和质粒第55页
     ·酶和试剂第55页
     ·相关试剂及培养基的制备方法第55-56页
     ·主要仪器第56页
   ·试验方法第56-61页
     ·ldhL 基因表达载体的构建第56-57页
     ·外源片段在大肠杆菌中的诱导表达第57-58页
     ·表达产物的SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳第58-59页
     ·L - 乳酸脱氢酶(ldhL)活力测定第59-60页
     ·不同诱导条件对酶活力的影响第60页
     ·质粒稳定性研究第60-61页
   ·结果与分析第61-65页
     ·L - 乳酸脱氢酶基因(ldhL )表达质粒的构建第61-62页
     ·表达产物的SDS- PAGE 分析第62-63页
     ·重组ldhL 活力测定分析第63-65页
     ·不同诱导条件对酶活力的影响第65页
     ·重组质粒pET - ldhL 稳定性分析第65页
   ·本章小结第65-66页
第5章 结论与展望第66-68页
   ·结论第66-67页
     ·嗜热乳酸菌的鉴定第66页
     ·ldhL 基因的克隆及序列分析第66-67页
     ·ldhL 基因在大肠杆菌中的表达第67页
   ·展望第67-68页
参考文献第68-74页
致谢第74-75页
摘要第75-78页
Abstract第78-80页

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