摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
插图和附表清单 | 第10-11页 |
缩略语索引 | 第11-12页 |
第一章 呼吸道合胞病毒及F蛋白的相关研究 | 第12-26页 |
·呼吸道合胞病毒的研究 | 第12-16页 |
·RSV的发现史 | 第12页 |
·RSV的发病率和流行性 | 第12-13页 |
·RSV特征和结构研究 | 第13-14页 |
·RSV感染及机体的免疫反应 | 第14-15页 |
·RSV的检测方法 | 第15-16页 |
·RSV引起的相关疾病 | 第16页 |
·RSV F蛋白及RSV疫苗研究 | 第16-21页 |
·F蛋白作用 | 第16-17页 |
·F蛋白结构 | 第17-19页 |
·RSV疫苗研究 | 第19-21页 |
·RSV疫苗佐剂和动物模型 | 第21-23页 |
·RSV疫苗佐剂 | 第22页 |
·动物模型 | 第22-23页 |
·RSV感染的预防及治疗 | 第23-25页 |
·RSV预防 | 第23页 |
·RSV治疗 | 第23-25页 |
·结束语 | 第25-26页 |
第二章 前言 | 第26-28页 |
第三章 F2基因的克隆 | 第28-40页 |
·材料和方法 | 第28-35页 |
·材料 | 第28-32页 |
·方法 | 第32-35页 |
·结果 | 第35-37页 |
·Hela细胞培养 | 第35页 |
·RSV培养 | 第35页 |
·RNA提取结果 | 第35-36页 |
·F2基因扩增 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-39页 |
·细胞和病毒的培养 | 第37页 |
·RNA的提取 | 第37-38页 |
·RSV F2蛋白和基因引物设计 | 第38-39页 |
·小结 | 第39-40页 |
第四章 表达载体F2/pGEX-6p-1的构建 | 第40-54页 |
·材料和方法 | 第40-47页 |
·材料 | 第40-41页 |
·方法 | 第41-47页 |
·结果 | 第47-51页 |
·菌落PCR鉴定F2/pMD18-T/DH5α | 第47页 |
·重组质粒F2/pMD18-T酶切鉴定 | 第47-48页 |
·测序结果 | 第48-49页 |
·菌落PCR鉴定F2/pGEX-6p-1/DH5α | 第49-50页 |
·重组质粒F2/pGEX-6p-1酶切鉴定 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-54页 |
·表达系统的选择 | 第51页 |
·载体的选择和构建 | 第51-52页 |
·测序结果分析 | 第52-54页 |
第五章 目的蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化 | 第54-68页 |
·材料和方法 | 第54-62页 |
·材料 | 第54-58页 |
·方法 | 第58-62页 |
·结果 | 第62-65页 |
·目的蛋白的表达 | 第62页 |
·Western Blotting检测重组蛋白 | 第62-63页 |
·目的蛋白的表达形式确定 | 第63-64页 |
·目的蛋白的纯化 | 第64-65页 |
·讨论 | 第65-67页 |
·表达宿主的选择 | 第65页 |
·目的蛋白的表达形式 | 第65页 |
·目的蛋白的纯化 | 第65-67页 |
·小结 | 第67-68页 |
第六章 目的蛋白免疫原性的测定 | 第68-80页 |
·材料和方法 | 第68-72页 |
·材料 | 第68-69页 |
·方法 | 第69-72页 |
·结果 | 第72-77页 |
·蛋白定量结果 | 第72页 |
·小鼠血清F2蛋白特异性IgG检测 | 第72-73页 |
·小鼠血清F2蛋白特异性IgG1检测 | 第73页 |
·小鼠血清F2蛋白特异性IgG2a检测 | 第73-74页 |
·IgG1/IgG2a结果 | 第74-75页 |
·小鼠血清F2蛋白特异性IgA检测 | 第75页 |
·小鼠呼吸道粘膜F2蛋白特异性IgA检测 | 第75-77页 |
·讨论 | 第77-79页 |
·疫苗佐剂的选取 | 第77页 |
·疫苗的免疫原性初步评价 | 第77-79页 |
·小结 | 第79-80页 |
第七章 全文总结 | 第80-81页 |
第八章 展望 | 第81-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-92页 |
附录A | 第92页 |