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中国特有小型猪内源性反转录病毒感染性克隆的构建与鉴定

缩略词表(Abbreviation)第1-8页
中文摘要第8-11页
英文摘要第11-14页
前言第14-17页
材料与方法第17-31页
 1. 材料第17-19页
 2. PERV前病毒全基因扩增与克隆第19-25页
   ·PERV前病毒全基因克隆的引物设计与合成第19-20页
   ·PBMC外周血单个核细胞的分离第20页
   ·五指山猪PBMC基因组的制备第20-21页
   ·PBMC总RNA的制备第21页
   ·反转录合成cDNA第一链第21页
   ·PCR扩增产物的克隆与鉴定第21-25页
 3. PERV前病毒全基因克隆构建与鉴定第25-26页
   ·PERV前病毒全基因克隆PCR鉴定第25-26页
   ·PERV前病毒全基因克隆酶切鉴定第26页
 4. PERV感染性克隆的筛选第26-31页
   ·细胞转染第26页
   ·RT-PCR鉴定及PERV亚型鉴定第26-27页
   ·PERV病毒传代后实时荧光定量RT-PCR分析第27-28页
   ·SDS-PAGE与Western Blot鉴定第28-30页
   ·间接免疫荧光法检测细胞特异性抗原表达第30页
   ·透射电子显微镜观察PERV病毒粒子第30页
   ·PERV感染性克隆序列测定与分析第30-31页
结果第31-43页
 1 PERV前病毒序列扩增结果第31页
 2 PCR克隆产物鉴定结果第31-34页
   ·pMD18-5’half重组质粒鉴定结果第31-32页
   ·pMD18-3’half重组质粒鉴定结果第32-33页
   ·pBluescript SK+-3’half重组质粒鉴定结果第33-34页
 3 PERV 前病毒全基因克隆鉴定结果第34-35页
   ·PERV前病毒全基因克隆PCR鉴定结果第34页
   ·PERV前病毒全基因克隆酶切鉴定结果第34-35页
 4 PERV感染性克隆筛选及PERV亚型分析结果第35-36页
 5 PERV感染性克隆细胞培养上清感染HEK293 细胞结果第36-37页
 6 PERV病毒传代后实时定量RT-PCR结果第37-38页
 7 SDS-PAGE与Western Blot鉴定结果第38-39页
 8 细胞免疫荧光分析结果第39-40页
 9 透射电子显微镜结果第40页
 10 PERV感染性克隆序列测定与初步分析第40-43页
讨论第43-49页
 1. PERV及其在异种移植中的相关研究第43-44页
 2. PERV感染性克隆的构建第44-47页
 3. PERV感染性克隆构建的意义第47-49页
结论第49-50页
参考文献第50-56页
文献综述第56-65页
代表性论著第65-75页
附录第75-76页
个人简历第76-77页
致谢第77页

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