| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-29页 |
| ·概述 | 第15-17页 |
| ·昆虫多态性与遗传物质 | 第15-16页 |
| ·鳞翅目昆虫概述 | 第16页 |
| ·昆虫的基因组计划 | 第16-17页 |
| ·物种的特有基因 | 第17-27页 |
| ·物种特有基因的定义及特点 | 第17-18页 |
| ·关于孤儿基因成因的几个推测 | 第18-19页 |
| ·孤儿基因的研究现状 | 第19-25页 |
| ·研究孤儿基因的意义 | 第25-26页 |
| ·研究孤儿基因的主要手段 | 第26-27页 |
| ·家蚕基因组和特有基因 | 第27-29页 |
| 第二章 引言 | 第29-33页 |
| ·研究背景及目的意义 | 第29-31页 |
| ·研究的主要内容 | 第31页 |
| ·技术路线 | 第31-33页 |
| 第三章 家蚕特有基因的鉴定及功能分析 | 第33-42页 |
| ·材料和方法 | 第33-34页 |
| ·数据库和基因组序列 | 第33页 |
| ·基因组序列建库及序列比对 | 第33-34页 |
| ·家蚕特有基因的序列分析 | 第34页 |
| ·家蚕特有基因染色体分布分析 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-38页 |
| ·六个昆虫基因组特有基因的鉴定 | 第34-36页 |
| ·家蚕特有基因的EST分析 | 第36页 |
| ·家蚕特有基因功能注释分析 | 第36-37页 |
| ·拷贝数及染色体分布分析 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-42页 |
| 第四章 基于芯片数据的家蚕特有基因的表达分析 | 第42-49页 |
| ·材料和方法 | 第42页 |
| ·基因芯片数据来源 | 第42页 |
| ·芯片数据分析 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-47页 |
| ·家蚕特有基因组织芯片分析 | 第42-43页 |
| ·家蚕特有基因胚胎期芯片分析 | 第43-44页 |
| ·家蚕特有基因在幼虫发育期的芯片分析 | 第44-45页 |
| ·家蚕特有基因在变态发育期芯片分析 | 第45-46页 |
| ·家蚕特有基因在免疫诱导芯片中的分析 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 利用RNAi探索候选基因的功能 | 第49-65页 |
| ·实验材料与试剂 | 第49-51页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·实验试剂 | 第49-50页 |
| ·主要仪器 | 第50页 |
| ·主要溶液的配置 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-57页 |
| ·目标基因的筛选 | 第51页 |
| ·RNA材料的提取及反转录 | 第51-53页 |
| ·dsRNA引物的设计 | 第53-54页 |
| ·dsRNA的体外转录 | 第54-56页 |
| ·家蚕预蛹dsRNA注射 | 第56页 |
| ·BGIBMGA000702基因RNAi效应的分子检测 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-63页 |
| ·目标基因的确定 | 第57-58页 |
| ·候选基因dsRNA的制备 | 第58页 |
| ·目标基因的RNAi表型观察 | 第58-59页 |
| ·BGIBMGA000702基因的时期与组织表达特征检测 | 第59-61页 |
| ·BGIBMGA000702的干涉验证 | 第61-63页 |
| ·BGIBMGA000702基因干涉效应分子水平检测 | 第63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 第六章 BGIBMGA000702基因的原核表达、蛋白纯化及Western-blotting检测 | 第65-89页 |
| ·材料 | 第65-72页 |
| ·主要试剂 | 第65页 |
| ·载体和菌株 | 第65页 |
| ·主要使用仪器 | 第65-66页 |
| ·实验溶液配置 | 第66-72页 |
| ·实验方法 | 第72-81页 |
| ·BGIBMGA000702的序列分析 | 第72页 |
| ·BGIBMGA000702基因重组表达质粒的构建 | 第72-75页 |
| ·BGIBMGA000702基因的原核表达 | 第75-77页 |
| ·蛋白纯化 | 第77-78页 |
| ·抗体制备及纯化 | 第78-79页 |
| ·Western blotting检测表达蛋白 | 第79-81页 |
| ·结果与分析 | 第81-86页 |
| ·BGIBMGA000702基因的序列分析及结构域预测 | 第81-82页 |
| ·BGIBMGA000702基因的表达载体构建 | 第82页 |
| ·重组质粒诱导表达及表达形式鉴定 | 第82-84页 |
| ·BGIBMGA000702重组蛋白的纯化 | 第84页 |
| ·BGIBMGA000702抗体的制备和纯化 | 第84-85页 |
| ·Western blotting检测目的蛋白的表达 | 第85-86页 |
| ·讨论 | 第86-89页 |
| ·外源蛋白在大肠杆菌中的原核表达 | 第86-87页 |
| ·蛋白水平表达检测 | 第87-89页 |
| 第七章 总结 | 第89-93页 |
| ·鉴定家蚕等六个昆虫基因组中的特有基因 | 第89页 |
| ·家蚕特有基因的生物信息学分析 | 第89页 |
| ·家蚕特有基因时空及免疫表达模式分析 | 第89-90页 |
| ·筛选了13个候选基因并进行RNAi干涉实验 | 第90页 |
| ·对BGIBMGA000702基因进行原核表达及western blotting检测 | 第90-93页 |
| 参考文献 | 第93-99页 |
| 硕士在读期间发表文章及课题参研情况 | 第99-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
