| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-32页 |
| ·香蕉及香蕉产业 | 第10页 |
| ·香蕉寒害机理的相关研究 | 第10-12页 |
| ·叶片组织结构与细胞膜透性 | 第10-11页 |
| ·生物自由基学说 | 第11页 |
| ·冷调节蛋白及其诱导物质 | 第11-12页 |
| ·香蕉抗寒相关基因的克隆与表达 | 第12页 |
| ·差异表达基因分离技术及其应用 | 第12-21页 |
| ·mRNA差异显示 | 第13-14页 |
| ·cDNA代表性差异分析 | 第14页 |
| ·cDNA-AFLP | 第14-16页 |
| ·抑制性消减杂交 | 第16-21页 |
| ·SSH主要技术流程 | 第17-20页 |
| ·SSH技术操作要点 | 第20页 |
| ·SSH技术评价 | 第20-21页 |
| ·SSH技术的应用 | 第21页 |
| ·蛋白质组学在植物病害中的研究应用 | 第21-30页 |
| ·蛋白质组学的概念及研究内容 | 第22页 |
| ·蛋白质组学研究的基本路线及相关技术 | 第22-28页 |
| ·蛋白质的提取技术 | 第23页 |
| ·蛋白质的分离技术 | 第23-26页 |
| ·蛋白质的检测技术 | 第26页 |
| ·蛋白质的图像分析技术 | 第26页 |
| ·蛋白质质谱鉴定技术 | 第26-27页 |
| ·蛋白质的生物信息学 | 第27-28页 |
| ·植物蛋白质组学 | 第28-30页 |
| ·作物遗传育种 | 第28页 |
| ·作物逆境胁迫应答 | 第28-29页 |
| ·作物品质改良和产量影响因子分析 | 第29页 |
| ·林木病害蛋白质组学分析 | 第29-30页 |
| ·技术路线 | 第30-31页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第31-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-50页 |
| ·材料准备 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·生物信息学软件 | 第32页 |
| ·方法与步骤 | 第32-50页 |
| ·RNA提取 | 第32-34页 |
| ·准备工作 | 第33页 |
| ·改良的SDS法提取香蕉叶片RNA | 第33页 |
| ·RNA电泳检测 | 第33-34页 |
| ·总RNA纯度、浓度检测 | 第34页 |
| ·mRNA的分离 | 第34-35页 |
| ·SSH文库的构建 | 第35-42页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第35-36页 |
| ·第二链cDNA的合成 | 第36页 |
| ·双链cDNA的RsaI酶切 | 第36-37页 |
| ·接头的连接 | 第37-38页 |
| ·接头连接效率检测 | 第38-39页 |
| ·第一次杂交 | 第39-40页 |
| ·第二次杂交 | 第40页 |
| ·两次PCR扩增 | 第40-42页 |
| ·差减文库构建及菌落PCR产物筛选 | 第42-44页 |
| ·PCR产物连接 | 第42页 |
| ·感受态细胞制备 | 第42页 |
| ·连接产物转化宿主菌E.coli DH5α感受态细胞 | 第42-43页 |
| ·菌落PCR鉴定重组子 | 第43-44页 |
| ·香蕉叶片总蛋白质提取 | 第44-45页 |
| ·三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA法) | 第44页 |
| ·酚法提取香蕉叶片总蛋白 | 第44-45页 |
| ·蛋白质含量的测定(Bradford,1976) | 第45-46页 |
| ·基本原理 | 第45页 |
| ·操作步骤 | 第45-46页 |
| ·蛋白质的单向电泳 | 第46页 |
| ·蛋白质的双向电泳 | 第46-49页 |
| ·第一向等电聚焦 | 第46-48页 |
| ·胶条平衡 | 第48页 |
| ·第二向SDS-PAGE电泳 | 第48-49页 |
| ·凝胶染色 | 第49-50页 |
| ·胶图象扫描与分析 | 第50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-61页 |
| ·叶片总RNA提取与质量检测 | 第50-51页 |
| ·叶片cDNA的2次差减杂交和抑制性PCR | 第51-52页 |
| ·抑制性差减cDNA文库的构建及PCR检测 | 第52页 |
| ·EST片段的测序和同源性分析 | 第52-53页 |
| ·No.28 EST的差异表达分析 | 第53-54页 |
| ·蛋白质的定量检测 | 第54页 |
| ·两种方法提取香蕉叶片蛋白的比较 | 第54-56页 |
| ·两种方法分别提取香蕉蛋白提取效率的比较 | 第54-55页 |
| ·两种方法分别提取香蕉叶片总蛋白SDS-PAGE电泳结果的比较 | 第55-56页 |
| ·不同上样量SDS-PAGE电泳结果的比较 | 第56页 |
| ·香蕉叶片总蛋白双向电泳分析 | 第56-61页 |
| ·香蕉低温胁迫差异蛋白质点在图谱中的位置 | 第57-59页 |
| ·香蕉低温胁迫差异蛋白质点的质谱鉴定与数据库查询 | 第59-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| ·香蕉低温胁迫cDNA消减文库的构建及初步分析 | 第61-62页 |
| ·香蕉低温胁迫差异蛋白的筛选及初步分析 | 第62-63页 |
| ·核酮糖-1,5一二磷酸羧化酶/加氧酶 | 第62-63页 |
| ·乙酰辅酶A羧化酶 | 第63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 6 展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附录 | 第71-78页 |
| 致谢 | 第78页 |