| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 缩略词表 | 第13-16页 |
| 第1章 文献综述 | 第16-32页 |
| 1 模式识别受体 | 第16-17页 |
| ·模式识别受体的发现 | 第16页 |
| ·模式识别受体的类型 | 第16-17页 |
| 2 Nod样受体(NLR)的结构与功能 | 第17-29页 |
| ·Nod样受体的结构与组成 | 第17-22页 |
| ·Nod样受体的配体及其分布 | 第22-23页 |
| ·Nod样受体介导的信号转导机制 | 第23-26页 |
| ·Nod样受体的生物学功能 | 第26-27页 |
| ·Nod样受体介导的疾病 | 第27-29页 |
| 3 鱼类Nod样受体的研究进展 | 第29-30页 |
| 4 研究目的、研究内容及技术路线 | 第30-32页 |
| ·研究目的 | 第30页 |
| ·研究内容 | 第30页 |
| ·技术路线 | 第30-32页 |
| 第2章 草鱼核苷酸结合寡聚化结构域NOD1和NOD2基因的克隆与表达 | 第32-74页 |
| 1 前言 | 第32-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-53页 |
| ·试验材料 | 第33-35页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·试剂盒与主要试剂 | 第34-35页 |
| ·载体和菌株 | 第35页 |
| ·试验鱼 | 第35页 |
| ·核酸的提取与纯化 | 第35-36页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第36-40页 |
| ·扩增cDNA中间片段和用于3'-RACE扩增的模板制备 | 第36-37页 |
| ·用于5'-RACE扩增的cDNA模板 | 第37-40页 |
| ·RACE-PCR扩增草鱼NOD1和NOD2基因的cDNA全长 | 第40-41页 |
| ·草鱼NOD1和NOD2基因组全长的克隆 | 第41-43页 |
| ·草鱼NOD1和NOD2的cDNA全长序列分析及系统进化树的构建 | 第43页 |
| ·草鱼NOD1和NOD2基因的组织分布 | 第43-47页 |
| ·RNA的提取 | 第43页 |
| ·RNA样品中DNA的处理 | 第43-44页 |
| ·cDNA模板的准备 | 第44页 |
| ·荧光定量PCR引物的检测 | 第44-45页 |
| ·质粒标准样品的制备 | 第45-46页 |
| ·荧光定量PCR检测 | 第46页 |
| ·数据分析 | 第46-47页 |
| ·实时荧光定量PCR检测gcNOD1和gcNOD2基因的诱导表达 | 第47-48页 |
| ·草鱼NOD1基因的原核表达 | 第48-51页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·重组蛋白的诱导表达以及多克隆抗体的制备 | 第49-50页 |
| ·变性条件下纯化目的蛋白 | 第50页 |
| ·兔多克隆抗体的制备 | 第50-51页 |
| ·免疫组化检测草鱼NOD1蛋白的分布 | 第51-53页 |
| ·切片制作 | 第51-52页 |
| ·免疫组化 | 第52-53页 |
| 3 结果 | 第53-72页 |
| ·草鱼NOD1和NOD2cDNA全长及推导的氨基酸序列特征 | 第53-63页 |
| ·草鱼NOD1和NOD2的基因组结构分析 | 第63-66页 |
| ·草鱼NOD1和NOD2基因的系统发育分析 | 第66页 |
| ·草鱼NOD1和NOD2基因的组织分布 | 第66-67页 |
| ·草鱼NOD1和NOD2基因的诱导表达 | 第67-69页 |
| ·草鱼NOD1基因的原核表达 | 第69-70页 |
| ·免疫组化分析草鱼NOD1在组织细胞中的定位 | 第70-72页 |
| 4 讨论 | 第72-73页 |
| 5 小结 | 第73-74页 |
| 第3章 草鱼γ-干扰素相关基因(IFN-γrel)的克隆与表达 | 第74-91页 |
| 1 前言 | 第74-75页 |
| 2 材料与方法 | 第75-78页 |
| ·试验材料 | 第75页 |
| ·核酸的提取与cDNA第一链的合成 | 第75页 |
| ·克隆草鱼IFN-γrel的cDNA全长 | 第75-77页 |
| ·草鱼IFN-γrel cDNA全长序列分析及系统进化树的构建 | 第77页 |
| ·基因组DNA的提取和多态性分析 | 第77页 |
| ·草鱼IFN-γrel基因的组织分布 | 第77页 |
| ·实时荧光定量PCR检测IFN-γrel基因的诱导表达 | 第77-78页 |
| 3 结果 | 第78-87页 |
| ·草鱼IFN-γrel cDNA全长及推导的氨基酸序列特征 | 第78-82页 |
| ·草鱼IFN-γrel基因结构和多态性分析 | 第82-83页 |
| ·草鱼IFN-γrel基因系统进化树分析 | 第83页 |
| ·Real-time PCR检测草鱼IFN-γrel基因在各组织中的组成型表达 | 第83-84页 |
| ·Real-time PCR检测草鱼IFN-γrel基因的诱导表达 | 第84-87页 |
| ·LPS或polyI:C对草鱼IFN-γrel基因表达的影响 | 第84-85页 |
| ·PGN的刺激对草鱼IFN-γrel、NOD1和NOD2表达影响 | 第85-86页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒(GCRV)对草鱼IFN-γrel基因表达的影响 | 第86-87页 |
| 4 讨论 | 第87-89页 |
| 5 小结 | 第89-91页 |
| 本研究的主要创新点 | 第91-92页 |
| 下一步研究计划 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-104页 |
| 附录1 | 第104-105页 |
| 附录2 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
