| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-22页 |
| 1 疫苗免疫的现状 | 第13-15页 |
| ·灭活苗 | 第13页 |
| ·弱毒苗 | 第13页 |
| ·亚单位疫苗 | 第13-14页 |
| ·合成肽疫苗 | 第14页 |
| ·基因工程载体疫苗 | 第14页 |
| ·基因工程缺失苗 | 第14页 |
| ·抗独特性抗体疫苗 | 第14-15页 |
| ·基因疫苗 | 第15页 |
| ·转基因植物疫苗 | 第15页 |
| 2 佐剂的研究进展 | 第15-19页 |
| ·铝盐佐剂 | 第16页 |
| ·弗氏佐剂 | 第16页 |
| ·免疫刺激复合物(ISCOMs) | 第16-17页 |
| ·脂质体 | 第17页 |
| ·寡脱氧核苷酸(oligodeoxyneucleotide,ODN) | 第17-18页 |
| ·细胞因子 | 第18页 |
| ·细菌毒素 | 第18页 |
| ·蜂胶 | 第18-19页 |
| 3 超抗原及金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的研究进展 | 第19-22页 |
| ·超抗原的研究 | 第19页 |
| ·超抗原的定义和发现 | 第19页 |
| ·超抗原的特性 | 第19页 |
| ·超抗原的免疫效应 | 第19页 |
| ·SEB的特性 | 第19-20页 |
| ·SEB的生物学特性 | 第20页 |
| ·SEB的超抗原性 | 第20页 |
| ·SEB的免疫学功能 | 第20页 |
| ·SEB的临床应用 | 第20-22页 |
| 第二章 金黄色葡萄球菌肠毒素B、禽流感病毒H5HA1的克隆与表达 | 第22-41页 |
| 1 研究的目的和意义 | 第22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-32页 |
| ·实验材料 | 第22-25页 |
| ·载体及菌株 | 第22-24页 |
| ·酶及主要试剂 | 第24页 |
| ·标准抗原及阳性血清 | 第24-25页 |
| ·主要溶液的配制 | 第25-26页 |
| ·抗生素类 | 第25页 |
| ·细菌培养基 | 第25页 |
| ·DNA的琼脂糖凝胶电泳相关溶液 | 第25页 |
| ·质粒抽提相关溶液 | 第25页 |
| ·SDS-PAGE相关溶液 | 第25-26页 |
| ·Western-blotting相关溶液 | 第26页 |
| ·表达提取纯化表达蛋白的相关溶液 | 第26页 |
| ·其它试剂 | 第26页 |
| ·试验方法 | 第26-32页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·目的片段的扩增 | 第26-27页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第27页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第27页 |
| ·感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第27-28页 |
| ·质粒的转化 | 第28页 |
| ·质粒的制备(碱裂解法) | 第28页 |
| ·序列测定 | 第28页 |
| ·DNA重组技术(DNA酶切、连接) | 第28-29页 |
| ·重组表达质粒的酶切鉴定 | 第29页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌BL21(DE3)的诱导表达 | 第30-31页 |
| ·重组蛋白的表达提取 | 第31页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第31页 |
| ·包涵体的制备 | 第31页 |
| ·包涵体的纯化与复性 | 第31页 |
| ·蛋白浓度的确定 | 第31页 |
| ·表达蛋白的SDS-PAGE分析和Western-blotting鉴定 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-38页 |
| ·SEB的PCR扩增 | 第32页 |
| ·SEB基因克隆和鉴定 | 第32-33页 |
| ·SEB基因的序列测定与分析 | 第33-34页 |
| ·重组质粒pKG-SEB和pET-28a-SEB的酶切鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白表达产物的SDS-PAGE分析结果 | 第35-38页 |
| ·重组蛋白表达产物的Western-blotting鉴定结果 | 第38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| ·目的蛋白的选择 | 第38-39页 |
| ·目的基因的克隆 | 第39页 |
| ·融合蛋白表达产物的处理 | 第39页 |
| ·融合蛋白表达产物的纯化 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 第三章 金黄色葡萄球菌肠毒素B作为免疫佐剂的研究 | 第41-52页 |
| 1 研究目的和意义 | 第41页 |
| 2 材料与方法 | 第41-46页 |
| ·材料 | 第41-43页 |
| ·实验动物及抗原 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41-42页 |
| ·主要溶液 | 第42页 |
| ·主要实验器材 | 第42-43页 |
| ·试验方法 | 第43-46页 |
| ·免疫原的准备 | 第43页 |
| ·动物试验 | 第43-45页 |
| ·MTT法测定淋巴细胞增值实验的步骤 | 第45页 |
| ·血凝抑制实验检测血清抗体实验步骤 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-50页 |
| ·SEB佐剂效应试验结果 | 第46-47页 |
| ·重组SEB较优剂量选择试验结果 | 第47-49页 |
| ·重组SEB增强亚单位疫苗免疫效果试验结果 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-51页 |
| ·SEB剂量的确定 | 第50页 |
| ·免疫指标的选择 | 第50页 |
| ·淋巴细胞活性测定方法的选择 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
