| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 蛋白质精氨酸甲基转移酶家族(PRMTs) | 第10页 |
| 1.2 蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5) | 第10-11页 |
| 1.3 与PRMT5功能相关的基因 | 第11-13页 |
| 1.3.1 与生殖发育有关的基因 | 第11页 |
| 1.3.2 与细胞凋亡有关的基因 | 第11-12页 |
| 1.3.3 与肌肉发育有关的基因 | 第12-13页 |
| 1.4 基因组编辑技术 | 第13-18页 |
| 1.4.1 TALEN技术 | 第14-15页 |
| 1.4.2 CRISPR/Cas9技术 | 第15-17页 |
| 1.4.3 筛选后代方法 | 第17-18页 |
| 1.5 鱼类模式生物 | 第18-19页 |
| 1.5.1 青鳉 | 第18页 |
| 1.5.2 斑马鱼 | 第18-19页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 利用TALEN基因敲除技术突变青鳉和斑马鱼prmt5 | 第20-48页 |
| 2.1 材料与方法 | 第20-35页 |
| 2.1.1 材料 | 第20-22页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第22-35页 |
| 2.2 结果与分析 | 第35-48页 |
| 2.2.1 TALEN靶位点的选择 | 第35-36页 |
| 2.2.2 单元重组法构建TALEN表达载体 | 第36-38页 |
| 2.2.3 体外转录合成TALEN mRNA | 第38页 |
| 2.2.4 显微注射TALEN mRNA对 | 第38-39页 |
| 2.2.5 青鳉和斑马鱼突变体筛选 | 第39-48页 |
| 3 利用CRISPR/Cas9基因敲除技术突变青鳉和斑马鱼prmt5 | 第48-61页 |
| 3.1 材料与方法 | 第48-51页 |
| 3.1.1 材料 | 第48-49页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第49-51页 |
| 3.2 结果与分析 | 第51-61页 |
| 3.2.1 gRNA靶位点设计 | 第51-52页 |
| 3.2.2 体外合成gRNA | 第52-53页 |
| 3.2.3 体外合成戴帽子的Cas9 mRNA(T7试剂盒) | 第53-54页 |
| 3.2.4 注射体系 | 第54页 |
| 3.2.5 青鳉和斑马鱼突变体筛选 | 第54-61页 |
| 4 讨论 | 第61-64页 |
| 4.1 TALEN基因组编辑技术及其对青鳉和斑马鱼prmt5的突变 | 第61-62页 |
| 4.2 CRISPR/Cas9基因组编辑技术及其对青鳉和斑马鱼prmt5的突变 | 第62页 |
| 4.3 结论与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
