| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第9-21页 |
| 1.1 白酒工业概况 | 第9页 |
| 1.2 白酒中风味物质概况 | 第9-12页 |
| 1.2.1 高级醇 | 第10页 |
| 1.2.2 酸类 | 第10-11页 |
| 1.2.3 酯类 | 第11-12页 |
| 1.2.4 其他物质 | 第12页 |
| 1.3 白酒中乳酸乙酯合成调控方法 | 第12-14页 |
| 1.4 南极假丝酵母脂肪酶B合成乳酸乙酯的研究进展 | 第14页 |
| 1.5 rDNA介导的多拷贝表达研究进展 | 第14-17页 |
| 1.5.1 酿酒酵母rDNA组成元件及功能 | 第14-16页 |
| 1.5.2 rDNA多拷贝整合的应用 | 第16-17页 |
| 1.6 表面展示表达研究进展 | 第17-19页 |
| 1.6.1 表面展示简介 | 第17页 |
| 1.6.2 α型凝集素和a型凝集素系统介绍 | 第17-19页 |
| 1.6.3 表面展示应用 | 第19页 |
| 1.7 本课题的立题依据及研究内容 | 第19-21页 |
| 1.7.1 本课题立题依据 | 第19-20页 |
| 1.7.2 本课题主要研究内容 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-40页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第21-25页 |
| 2.1.1 菌种与质粒 | 第21-22页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.5 主要溶液 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-37页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第25-28页 |
| 2.2.2 目的片段的获取及纯化 | 第28-31页 |
| 2.2.3 重组质粒的构建 | 第31-33页 |
| 2.2.4 酵母转化 | 第33-34页 |
| 2.2.5 Real-time PCR | 第34-37页 |
| 2.2.6 生长性能的测定 | 第37页 |
| 2.2.7 清香型白酒半固态发酵实验 | 第37页 |
| 2.2.8 KanMx筛选标记的去除 | 第37页 |
| 2.3 分析方法 | 第37-40页 |
| 2.3.1 CO_2排放量的测定 | 第37-38页 |
| 2.3.2 酒精度的测定 | 第38页 |
| 2.3.3 还原糖的测定 | 第38页 |
| 2.3.4 高级醇及乳酸乙酯测定 | 第38-39页 |
| 2.3.5 数据分析 | 第39-40页 |
| 3 结果与讨论 | 第40-70页 |
| 3.1 rDNA多拷贝整合表达南极假丝酵母脂肪酶B基因对酿酒酵母乳酸乙酯生成量的影响 | 第40-50页 |
| 3.1.1 rDNA多拷贝整合质粒Yip-rPCk的构建 | 第40-45页 |
| 3.1.2 rDNA多拷贝整合菌株的构建 | 第45-47页 |
| 3.1.3 rDNA多拷贝菌株与亲本菌株发酵实验 | 第47-50页 |
| 3.1.4 小结 | 第50页 |
| 3.2 a型凝集素的表面展示表达南极假丝酵母脂肪酶B对酿酒酵母乳酸乙酯生成量的影响 | 第50-62页 |
| 3.2.1 a型凝集素表达盒载体pYCD构建 | 第50-52页 |
| 3.2.2 a型凝集素表面展示载体pYCPK构建 | 第52-54页 |
| 3.2.3 含有a型凝集素AGA1基因的α型酿酒酵母菌株构建 | 第54-57页 |
| 3.2.4 a型凝集素表面展示菌株构建 | 第57-58页 |
| 3.2.5 a型凝集素的表面展示菌株与亲本菌株的发酵实验 | 第58-61页 |
| 3.2.6 小结 | 第61-62页 |
| 3.3 a型凝集素表面展示南极假丝酵母脂肪酶B基因对酿酒酵母乳酸乙酯生成量的影响 | 第62-70页 |
| 3.3.1 α型凝集素的表面展示载体Yep-PCAK构建 | 第62-65页 |
| 3.3.2 α型凝集素表面展示菌株构建 | 第65-66页 |
| 3.3.3 α型凝集素表面展示菌株与亲本菌株发酵实验 | 第66-69页 |
| 3.3.4 小结 | 第69-70页 |
| 4 结论 | 第70-71页 |
| 4.1 全文结论 | 第70页 |
| 4.2 论文创新点 | 第70-71页 |
| 5 展望 | 第71-72页 |
| 6 参考文献 | 第72-78页 |
| 7 攻读学位期间发表的论文、专利及获奖 | 第78-79页 |
| 8 致谢 | 第79页 |
