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空肠弯曲菌FlhF调节鞭毛合成分子机制及其对细菌毒力的影响分析

中文摘要第3-6页
Abstract第6-10页
符号说明第15-18页
综述 空肠弯曲菌毒力因子及鞭毛介导的协同调节毒力机制第18-47页
    1 空肠弯曲菌的生物学特性及流行特征第18-20页
    2 空肠弯曲菌的传播及感染机制第20-23页
    3 空肠弯曲菌典型毒力因子第23-33页
        3.1 鞭毛运动第23-25页
        3.2 趋化性第25-27页
        3.3 脂寡糖第27-28页
        3.4 荚膜多糖第28-29页
        3.5 铁离子摄取系统第29-30页
        3.6 黏附侵袭第30-31页
        3.7 定植第31-32页
        3.8 细胞致死性肿胀毒素第32-33页
    4 空肠弯曲菌鞭毛介导的协同调节毒力机制第33-37页
        4.1 鞭毛与空肠弯曲菌感染力第34页
        4.2 三型分泌系统功能第34-35页
        4.3 鞭毛协同调节的毒力因子第35-36页
        4.4 糖基化修饰作用第36-37页
    5 结语第37页
    参考文献第37-47页
第一章 空肠弯曲菌flhF突变株全基因转录表达谱比较分析第47-74页
    1 材料第47-48页
        1.1 菌株第47页
        1.2 主要试剂第47-48页
        1.3 主要仪器设备第48页
    2 方法第48-52页
        2.1 细菌培养第48页
        2.2 生长曲线测定第48页
        2.3 细菌RNA的提取第48-49页
        2.4 cDNA的合成第49-50页
        2.5 实时荧光定量PCR第50-51页
        2.6 基因表达谱芯片第51-52页
        2.7 差异表达基因的筛选及分析第52页
        2.8 空肠弯曲菌毒力基因整理第52页
    3 结果第52-68页
        3.1 空肠弯曲菌鞭毛系统生物信息学分析第52-55页
        3.2 空肠弯曲菌鞭毛基因在不同生长阶段表达情况第55-57页
        3.3 Microarry分析FlhF突变对空肠弯曲菌基因表达谱的影响第57-61页
        3.4 FlhF在空肠弯曲菌鞭毛系统中的效应分析第61-66页
        3.5 FlhF对空肠弯曲菌毒力系统的协同影响第66-68页
    4 讨论第68-71页
    参考文献第71-74页
第二章 FlhF影响空肠弯曲菌鞭毛合成的分子机制研究第74-108页
    1 材料第74-79页
        1.1 菌株与质粒第74-76页
        1.2 主要试剂第76页
        1.3 主要仪器设备第76-77页
        1.4 引物设计及多肽合成第77-79页
    2 方法第79-84页
        2.1 反转录PCR第79-80页
        2.2 细菌质膜组分粗分离第80页
        2.3 免疫印迹分析第80-81页
        2.4 激光共聚焦显微镜观察第81页
        2.5 免疫共沉淀第81-82页
        2.6 蛋白原核表达及纯化第82页
        2.7 GST pull-down实验第82-83页
        2.8 凝胶迁移实验第83-84页
    3 结果第84-100页
        3.1 flhF所处的鞭毛基因位点及其相对表达量分析第84-85页
        3.2 FlhF蛋白在空肠弯曲菌中亚定位观察第85-87页
        3.3 FlhF突变对空肠弯曲菌鞭毛组件定位的影响第87-89页
        3.4 Co-IP筛选与FlhF相互作用的蛋白第89-92页
        3.5 GST pull-down验证FlhF蛋白互作结果第92-95页
        3.6 FlhF与互作蛋白的作用结构域分析第95-97页
        3.7 EMSA验证FlhF蛋白转录调控功能第97-100页
    4 讨论第100-105页
    参考文献第105-108页
第三章 FlhF突变对空肠弯曲菌毒力以及致腹泻能力的影响第108-132页
    1 材料第108-109页
        1.1 菌株、细胞与质粒第108-109页
        1.2 实验动物第109页
        1.3 主要试剂第109页
        1.4 主要仪器设备第109页
    2 方法第109-113页
        2.1 空肠弯曲菌flhF突变株以及回复株的构建第109-111页
        2.2 运动力以及电子显微镜观察第111页
        2.3 细菌自凝集以及生物被膜检测第111页
        2.4 空肠弯曲菌趋化性分析第111-112页
        2.5 细胞黏附、侵袭实验第112页
        2.6 定植实验第112-113页
    3 结果第113-126页
        3.1 空肠弯曲菌flhF突变株及回复株的构建与鉴定第113-114页
        3.2 FlhF突变对空肠弯曲菌鞭毛及运动力的影响第114-116页
        3.3 FlhF对空肠弯曲菌自凝集以及生物被膜形成能力的影响第116-118页
        3.4 FlhF对空肠弯曲菌趋化性影响分析第118-119页
        3.5 FlhF对空肠弯曲菌黏附、侵袭能力的影响第119-120页
        3.6 FlhF对空肠弯曲菌在鸡和小鼠体内的定植影响分析第120-123页
        3.7 FlhF在空肠弯曲菌感染仔兔并致腹泻过程中的作用分析第123-126页
    4 讨论第126-129页
    参考文献第129-132页
全文总结第132-133页
附录 Microarry分析FlhF突变空肠弯曲菌毒力系统基因表达变化第133-140页
致谢第140-141页
攻读博士学位期间发表论文目录第141-142页

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