中文摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
符号说明 | 第15-18页 |
综述 空肠弯曲菌毒力因子及鞭毛介导的协同调节毒力机制 | 第18-47页 |
1 空肠弯曲菌的生物学特性及流行特征 | 第18-20页 |
2 空肠弯曲菌的传播及感染机制 | 第20-23页 |
3 空肠弯曲菌典型毒力因子 | 第23-33页 |
3.1 鞭毛运动 | 第23-25页 |
3.2 趋化性 | 第25-27页 |
3.3 脂寡糖 | 第27-28页 |
3.4 荚膜多糖 | 第28-29页 |
3.5 铁离子摄取系统 | 第29-30页 |
3.6 黏附侵袭 | 第30-31页 |
3.7 定植 | 第31-32页 |
3.8 细胞致死性肿胀毒素 | 第32-33页 |
4 空肠弯曲菌鞭毛介导的协同调节毒力机制 | 第33-37页 |
4.1 鞭毛与空肠弯曲菌感染力 | 第34页 |
4.2 三型分泌系统功能 | 第34-35页 |
4.3 鞭毛协同调节的毒力因子 | 第35-36页 |
4.4 糖基化修饰作用 | 第36-37页 |
5 结语 | 第37页 |
参考文献 | 第37-47页 |
第一章 空肠弯曲菌flhF突变株全基因转录表达谱比较分析 | 第47-74页 |
1 材料 | 第47-48页 |
1.1 菌株 | 第47页 |
1.2 主要试剂 | 第47-48页 |
1.3 主要仪器设备 | 第48页 |
2 方法 | 第48-52页 |
2.1 细菌培养 | 第48页 |
2.2 生长曲线测定 | 第48页 |
2.3 细菌RNA的提取 | 第48-49页 |
2.4 cDNA的合成 | 第49-50页 |
2.5 实时荧光定量PCR | 第50-51页 |
2.6 基因表达谱芯片 | 第51-52页 |
2.7 差异表达基因的筛选及分析 | 第52页 |
2.8 空肠弯曲菌毒力基因整理 | 第52页 |
3 结果 | 第52-68页 |
3.1 空肠弯曲菌鞭毛系统生物信息学分析 | 第52-55页 |
3.2 空肠弯曲菌鞭毛基因在不同生长阶段表达情况 | 第55-57页 |
3.3 Microarry分析FlhF突变对空肠弯曲菌基因表达谱的影响 | 第57-61页 |
3.4 FlhF在空肠弯曲菌鞭毛系统中的效应分析 | 第61-66页 |
3.5 FlhF对空肠弯曲菌毒力系统的协同影响 | 第66-68页 |
4 讨论 | 第68-71页 |
参考文献 | 第71-74页 |
第二章 FlhF影响空肠弯曲菌鞭毛合成的分子机制研究 | 第74-108页 |
1 材料 | 第74-79页 |
1.1 菌株与质粒 | 第74-76页 |
1.2 主要试剂 | 第76页 |
1.3 主要仪器设备 | 第76-77页 |
1.4 引物设计及多肽合成 | 第77-79页 |
2 方法 | 第79-84页 |
2.1 反转录PCR | 第79-80页 |
2.2 细菌质膜组分粗分离 | 第80页 |
2.3 免疫印迹分析 | 第80-81页 |
2.4 激光共聚焦显微镜观察 | 第81页 |
2.5 免疫共沉淀 | 第81-82页 |
2.6 蛋白原核表达及纯化 | 第82页 |
2.7 GST pull-down实验 | 第82-83页 |
2.8 凝胶迁移实验 | 第83-84页 |
3 结果 | 第84-100页 |
3.1 flhF所处的鞭毛基因位点及其相对表达量分析 | 第84-85页 |
3.2 FlhF蛋白在空肠弯曲菌中亚定位观察 | 第85-87页 |
3.3 FlhF突变对空肠弯曲菌鞭毛组件定位的影响 | 第87-89页 |
3.4 Co-IP筛选与FlhF相互作用的蛋白 | 第89-92页 |
3.5 GST pull-down验证FlhF蛋白互作结果 | 第92-95页 |
3.6 FlhF与互作蛋白的作用结构域分析 | 第95-97页 |
3.7 EMSA验证FlhF蛋白转录调控功能 | 第97-100页 |
4 讨论 | 第100-105页 |
参考文献 | 第105-108页 |
第三章 FlhF突变对空肠弯曲菌毒力以及致腹泻能力的影响 | 第108-132页 |
1 材料 | 第108-109页 |
1.1 菌株、细胞与质粒 | 第108-109页 |
1.2 实验动物 | 第109页 |
1.3 主要试剂 | 第109页 |
1.4 主要仪器设备 | 第109页 |
2 方法 | 第109-113页 |
2.1 空肠弯曲菌flhF突变株以及回复株的构建 | 第109-111页 |
2.2 运动力以及电子显微镜观察 | 第111页 |
2.3 细菌自凝集以及生物被膜检测 | 第111页 |
2.4 空肠弯曲菌趋化性分析 | 第111-112页 |
2.5 细胞黏附、侵袭实验 | 第112页 |
2.6 定植实验 | 第112-113页 |
3 结果 | 第113-126页 |
3.1 空肠弯曲菌flhF突变株及回复株的构建与鉴定 | 第113-114页 |
3.2 FlhF突变对空肠弯曲菌鞭毛及运动力的影响 | 第114-116页 |
3.3 FlhF对空肠弯曲菌自凝集以及生物被膜形成能力的影响 | 第116-118页 |
3.4 FlhF对空肠弯曲菌趋化性影响分析 | 第118-119页 |
3.5 FlhF对空肠弯曲菌黏附、侵袭能力的影响 | 第119-120页 |
3.6 FlhF对空肠弯曲菌在鸡和小鼠体内的定植影响分析 | 第120-123页 |
3.7 FlhF在空肠弯曲菌感染仔兔并致腹泻过程中的作用分析 | 第123-126页 |
4 讨论 | 第126-129页 |
参考文献 | 第129-132页 |
全文总结 | 第132-133页 |
附录 Microarry分析FlhF突变空肠弯曲菌毒力系统基因表达变化 | 第133-140页 |
致谢 | 第140-141页 |
攻读博士学位期间发表论文目录 | 第141-142页 |