摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-18页 |
1.1 灰霉病研究进展 | 第12-13页 |
1.2 植物小分子RNA研究进展 | 第13-18页 |
1.2.1 miRNA的发现过程 | 第13页 |
1.2.2 miRNA的形成过程 | 第13-15页 |
1.2.3 miRNA的作用机制 | 第15页 |
1.2.4 siRNA的分类及形成过程 | 第15-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-30页 |
2.1 番茄中预测的PHAS基因的获得 | 第18页 |
2.2 植物的培养及灰霉菌的接种 | 第18-19页 |
2.2.1 灰霉孢子的培养 | 第18页 |
2.2.2 番茄植株的接菌 | 第18-19页 |
2.3 SDS法提取番茄总RNA | 第19-20页 |
2.3.1 SDS RNA提取液配制 | 第19页 |
2.3.2 RNA的提取 | 第19-20页 |
2.4 RT-PCR实验 | 第20-21页 |
2.5 PCR产物的回收 | 第21页 |
2.6 重组质粒的大肠杆菌热激法转化 | 第21页 |
2.7 番茄灰霉病菌侵染应答相关phasiRNA及靶标的qRT-PCR分析 | 第21-23页 |
2.7.1 灰霉病菌侵染应答相关phasiRNA的鉴定 | 第21-22页 |
2.7.2 phasi RNA靶标的鉴定 | 第22页 |
2.7.3 鉴定的phasiRNA及靶标的qRT-PCR分析 | 第22-23页 |
2.8 Sly-PHAS15全长基因的获取 | 第23-27页 |
2.8.1 5' RACE实验试剂准备 | 第23页 |
2.8.2 5' RACE实验步骤 | 第23-25页 |
2.8.3 3' RACE的实验步骤 | 第25-27页 |
2.9 番茄叶片基因组DNA提取 | 第27页 |
2.10 pCAMBIA-1300 双元表达载体的构建 | 第27-28页 |
2.11 冻融法获得重组农杆菌 | 第28-29页 |
2.12 Sly-PHAS15的瞬时表达实验 | 第29-30页 |
第三章 结果与分析 | 第30-45页 |
3.1 90 条PHAS基因的验证及组织表达分析 | 第30-34页 |
3.2 PHAS基因的染色体定位 | 第34-38页 |
3.3 灰霉病菌侵染应答相关的phasiRNA及其靶标的鉴定 | 第38-41页 |
3.4 灰霉病菌侵染应答相关的phasi RNA及其靶标的动态分析 | 第41-42页 |
3.5 Sly-PHAS15瞬时表达实验的结果及分析 | 第42-45页 |
第四章 全文结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51页 |