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宠物跳蚤皮炎疫苗的研制及其免疫效力评价

摘要第3-5页
abstract第5-7页
常用英文缩略词表第8-12页
1 前言第12-23页
    1.1 跳蚤过敏性皮炎简介第12页
    1.2 跳蚤第12-16页
        1.2.1 跳蚤的危害第13-14页
        1.2.2 跳蚤的防治第14-16页
    1.3 超敏反应及其类型第16-20页
        1.3.1 超敏反应第16页
        1.3.2 I型超敏反应第16-18页
        1.3.3 II型超敏反应第18页
        1.3.4 III型超敏反应第18-19页
        1.3.5 Ⅳ型超敏反应第19-20页
    1.4 过敏性皮炎第20-22页
    1.5 动物模型第22-23页
        1.5.1 动物模型第22页
        1.5.2 动物模型类型及设计原则第22-23页
        1.5.3 过敏性皮炎动物模型第23页
2 材料与方法第23-38页
    2.1 主要仪器与试剂第23-25页
        2.1.1 主要仪器设备第23-24页
        2.1.2 主要试剂第24页
        2.1.3 实验室试剂配置第24-25页
        2.1.4 实验动物与跳蚤第25页
    2.2 方法第25-38页
        2.2.1 FSA1基因与引物的设计合成第25-26页
        2.2.2 PCR扩增FSA1基因片段第26页
        2.2.3 FSA1基因和载体pET28a、p VAX1的双酶切第26-27页
        2.2.4 FSA1基因片段和克隆载体的连接第27页
        2.2.5 重组质粒的转化第27-28页
        2.2.6 重组质粒的鉴定第28页
        2.2.7 RT-PCR鉴定pVAX-FSAl在真核细胞中的表达第28-30页
        2.2.8 pET28a-FSA1在大肠杆菌中诱导表达的条件优化第30-31页
        2.2.9 目的蛋白rFSA1的诱导表达第31页
        2.2.10 目的蛋白rFSA1的纯化第31-32页
        2.2.11 目的蛋白rFSA1的浓缩与复性第32页
        2.2.12 rFSA1蛋白的SDS-PAGE分析第32-33页
        2.2.13 rFSA1蛋白的Western Blot鉴定第33-34页
        2.2.14 真核表达质粒pVAX1-FSA1的大量提取第34页
        2.2.15 宠物皮炎疫苗的准备第34-35页
        2.2.16 建立猫过敏性皮炎模型及评分标准第35页
        2.2.17 免疫效力评价第35-36页
        2.2.18 外周血嗜酸性粒细胞的检测第36页
        2.2.19 MTT法检测猫外周血T细胞增殖活性第36-37页
        2.2.20 ELISA法检测猫血清中特异性IgE抗体水平第37页
        2.2.21 统计分析第37-38页
3 结果第38-48页
    3.1 FSA1基因的克隆及鉴定第38-41页
        3.1.1 原核表达质粒的鉴定结果第38页
        3.1.2 真核表达质粒的双酶切鉴定结果第38-39页
        3.1.3 重组质粒pVAX1-FSA1转染BHK-21 细胞的RT-PCR鉴定结果第39页
        3.1.4 rFSA1蛋白的诱导表达条件优化结果第39-40页
        3.1.5 rFSA1蛋白的SDS-PAGE和Western Blot鉴定结果第40-41页
        3.1.6 rFSA1蛋白和重组pVAX1-FSA1质粒的质量鉴定结果第41页
    3.2 猫FAD模型的建立第41-45页
        3.2.1 对猫FAD模型临床皮炎症状评分结果第41-44页
        3.2.2 猫外周血嗜酸性粒细胞所占比率统计结果第44页
        3.2.3 猫外周血T细胞增殖反应实验结果第44-45页
        3.2.4 猫血清中特异性IgE水平测定结果第45页
    3.3 应用宠物皮炎疫苗治疗猫FAD第45-46页
        3.3.1 共免疫治疗猫FAD的临床皮炎评分结果第45-46页
        3.3.2 共免疫治疗对外周血T细胞增殖反应的影响第46页
    3.4 应用宠物皮炎疫苗预防猫FAD第46-48页
        3.4.1 共免疫预防猫FAD的临床皮炎评分结果第46-47页
        3.4.2 共免疫预防对外周血T细胞增殖反应的影响第47-48页
4 讨论第48-51页
    4.1 宠物皮炎疫苗第48页
    4.2 共免疫机理第48-49页
    4.3 猫跳蚤过敏性皮炎模型的建立第49-50页
    4.4 宠物皮炎疫苗对猫FAD的防治效果第50-51页
    4.5 宠物皮炎疫苗对T淋巴细胞增殖的抑制效果第51页
5 结论第51-53页
致谢第53-54页
参考文献第54-59页
附录第59页

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